Способ определения восстановленного молока по оптической плотности сыворотки

(51) 01 33/04 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ контрольно-заготовительных пунктах, а также в научных исследованиях. Технической задачей реализации настоящего изобретения, является достижение быстрого определения (в течении 15 минут) восстановленного(порошкового) молока при проведении ветеринарносанитарной экспертизы натуральности молока. Указанный результат достигается измерением оптической плотности сыворотки исследуемого молока, отделившейся после сворачивания белка молока (казеина). При этом оптическая плотность сыворотки цельного молока составляет 0,198-0,384,а восстановленного - 0,082-0,095. Изобретение позволяет получить возможность оперативной качественной оценки натуральности цельного молока, с установлением наличия или отсутствия в нем примеси восстановленного молока.(72) Балджи Юрий Александрович Галкина Елена Николаевна(73) Акционерное общество Казахский агротехнический университет им. Сакена Сейфуллина(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВОССТАНОВЛЕННОГО МОЛОКА ПО ОПТИЧЕСКОЙ ПЛОТНОСТИ СЫВОРОТКИ(57) Изобретение относится к ветеринарии, а именно к ветеринарно-санитарной экспертизе для экспресс определения восстановленного молока, и может быть использовано при проведении оценки качества молока в ветеринарных лабораториях,лабораториях пищевой безопасности, молочных Изобретение относится к ветеринарии, а именно к ветеринарно-санитарной экспертизе для экспресс определения восстановленного молока, и может быть использовано при проведении оценки качества молока в ветеринарных лабораториях, лабораториях пищевой безопасности, молочных контрольнозаготовительных пунктах, а также в научных исследованиях. В настоящее время, согласно Технического регламента Требования к безопасности молока и молочной продукции,утвержденного постановлением Правительства Республики Казахстан от 11 марта 2008 года, молоко отличается от молокосодержащего продукта. Тем не менее,производители продолжают изготавливать молоко из сухого порошкового молока (восстановленное молоко), при этом называют конечный продукт молоком,что соответственно нарушает потребительские права. При добавлении восстановленного молока в питьевое снижается пищевая ценность продукта за счет многократного проведения тепловой обработки, усугубляются процессы, приводящие к блокированию некоторых аминокислот молока,особенно реакционноспособных лизина и цистеина,снижается содержание ионно-молекулярного кальция,витаминов,происходит частичный гидролиз триглицеридов молочного жира и уменьшение в их составе количества ненасыщенных жирных кислот,уменьшается количество фосфолипидов, что существенно снижает его пищевую ценность. В каких-либо нормативно-технических документах нет рекомендованных официальных методик определения восстановленного молока или молока полученного из сухого молока, поэтому не представляется возможным определить действительную натуральность молока, в связи с чем предложенный способ является актуальным и востребованным для лабораторий пищевой безопасности и ветеринарно-санитарной экспертизы. Известно определение восстановленного молока по степени его температурной обработки, в результате чего образуется аминокислота фурозин. Для определения концентрации фурозина, после кислотного гидролиза белка молока, используют точные и воспроизводимые методы газожидкостной и высокоэффективной жидкостной хроматографии, . , ... . .. 1990, 3, 173183. Известен метод количественной оценки степени теплового воздействия на молоко, который учитывает одновременно два процесса,протекающих в молоке при сушке снижение количества свободной аминокислоты -триптофана и увеличение содержания конечных продуктов реакции. Для учета данных процессов введена универсальная величина -индекс, который получается путем деления значения флуоресценции конечных продуктов реакции на значение 2 флюоресценции триптофана и умножения на 100 Галстян А.Г. Функционально-технологические свойства сырья в производстве сгущенных молочных консервов из сухого молока / А.Г. Галстян, В.В. Павлова, А.Н. Петров // Сборник научных трудов. Серия Продовольствие, СКГТУ.-Ставрополь, 2002. с.13-16. Известен способ обнаружения восстановленного молока путем измерения отношения стабильных изотопов 2 Н/1 Н. Данный метод основан на разнице в количестве свободных протонов аминокислот и аминокислотных остатков в сыром молоке и прошедшем термообработку. Реакция изотопного(1 Н-2 Н) обмена протекает по механизму электрофильного замещения и затрагивает лишь определенные наиболее чувствительные к замещению протоны в ароматических аминокислотах. Затем снимают ИК-спектр и по интенсивности показаний судят о степени тепловой обработки молока Мосин О.В. Включение атомов дейтрия 2 Н, углерода 13 С, азота 15, и кислорода 180 в молекулы аминокислот и белков. Журнал Биотехнология, 10, 1996 г Недостатком данного способа является то, что при исследовании стерилизованного, прошедшего УВТ-обработку или нормализованного молока продукты реакции меланоидинообразования также будут накапливаться в конечном продукте в достаточно высокой степени и оценить наличие восстановленного молока в питьевом (цельном) становиться не возможным. Общими недостатками выше перечисленных методов являются их трудоемкость, использование определенного аналитического оборудования(газожидкостный или высокоэффективножидкостный хроматограф, флюороскоп, ИКспектрометр), длительность выполнения, что не приемлемо при рутинной работе ветеринарносанитарного врача в лабораториях ветеринарносанитарной экспертизы и пищевой безопасности. Известен способ определения наличия примеси восстановленного молока в пастеризованном молоке Антонов А.Р., Ковалев Д.В., Меренкова Л.И.,Новоселов Я.Б. 2406085, заявка 2010102952/10 от 28.01.2010. Указанный способ включает следующее пробу молочного продукта подвергают кипячению в течении 15 с, после чего пробу переливают в темную фарфоровую емкость и охлаждают преимущественно в течении не менее 30 минут. Затем сливают, через края емкости,медленными равномерными вращательными движениями и после полного высыхания при комнатной температуре внутренней поверхности указанной емкости визуально оценивают наличие или отсутствие на ее дне осадка (казеина), при наличии которого в виде мелких зерен белого цвета судят о присутствии примеси восстановленного молока в исследуемой пробе в количестве не менее 20 от общего объема продукта. Недостатком, способа является то, что при современных технологиях производства сухого молока получается продукт с повышенной Отделение сыворотки осуществляется следующим образом в пробирку наливают 15 мл молока, добавляют 15 капель 4 раствора хлорида кальция, перемешивают, затем помещают в водяную баню (100 С) и кипятят не менее 10 минут, далее пробирки извлекают, энергичным встряхиванием разрушают белковый сгусток (казеин), после чего пробирки центрифугируют в течении 10 минут. После центрифугирования отбирают 300 микролитров отделившейся сыворотки,переливают в планшет и измеряют на фотометре ее оптическую плотность. В проведенных исследованиях использовали различные пробы молока, условно обозначаемые в следующем порядке ЦМ - цельное молоко,КЦМ - кипяченое цельное молоко,ВМ - восстановленное молоко,КВМ - кипяченное восстановленное молоко,ЦМВМ - цельное и восстановленное молоко в соотношении 11,КЦМКВМ - кипяченое цельное и кипяченое восстановленное молоко в соотношении 11. В ходе проведенных нами измерений получены результаты, представленные в таблице 1, из которой видно, что оптическая плотность цельного молока в несколько раз выше, чем восстановленного, при этом результаты исследований цельного молока,полученные от разных коров, имеют большие границы оптической плотности. Но, тем не менее,имеется существенная разница между цельным и восстановленным молоком. В результате проведенного измерения,оптическая плотность сыворотки цельного молока составляла 0,198-0,384, а восстановленного - 0,0820,095. Таблица 1 Результаты измерения оптической плотности сыворотки молока растворимостью и однородностью при смешивании сухого молока с водой, при этом после кипячения не образуется осадок в виде мелких зерен белого цвета. Наиболее близким способом к заявленному,является рефрактометрический способ определения белка молока ГОСТ 25179-90 Молоко. Методы определения белка, при котором отделяют сыворотку молока следующим путем в пробирку наливают 5 мл молока, добавляют 6 капель 4 раствора хлорида кальция, перемешивают, затем помещают в водяную баню (100 С) и кипятят не менее 10 минут, далее пробирки извлекают,энергичным встряхиванием разрушают белковый сгусток(казеин),после чего пробирки центрифугируют в течении 10 минут. Далее на рефрактометре определяют коэффициент преломления сыворотки и коэффициент преломления молока, после чего отнимают полученное значение сыворотки от молока,полученная разница является процентным содержанием белка в молоке. Но данный метод не определяет восстановленное молоко или присутствие его в цельном молоке. Технической задачей реализации настоящего изобретения, является достижение быстрого определения (в течении 15 минут) восстановленного(порошкового) молока при проведении ветеринарносанитарной экспертизы натуральности молока. Указанный результат достигается измерением оптической плотности сыворотки исследуемого молока, отделившейся после сворачивания белка молока (казеина). Способ выполняется в два этапа 1) отделение молочной сыворотки, 2) измерение оптической плотности сыворотки. Исследуемое молоко ЦМ КЦМ ВМ КВМ ЦМВМ(11) КЦМКВМ(11) При смешивании цельного молока с восстановленным, оптическая плотность изменяется незначительно по сравнению с показателем сыворотки восстановленного молока и различается на 0,009. При разведении кипяченого цельного молока с кипяченым сухим молоком оптическая плотность сыворотки резко снижается и составляет 0,0038. Таким образом,полученные результаты свидетельствуют о возможности экспресс оценки натуральности молока,идентификации восстановленного (порошкового) молока путем измерения оптической плотности сыворотки. Изобретение позволяет получить возможность оперативной качественной оценки натуральности Оптическая плотность 0,198 0,384 0,223-0,229 0,082-0,095 0,016-0,021 0,091-0,098 0,0038-0,0040 цельного молока, с установлением наличия или отсутствия в нем примеси восстановленного молока. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ определения восстановленного молока по оптической плотности сыворотки, включающий отделение сыворотки молока, перемешивание,кипячение в водяной бане при 100 С в течении 10 минут, разрушение встряхиванием белкового сгустка (казеина), центрифугирование в течении 10 минут, отличающийся тем, что сыворотку отделяют путем добавления в пробирку к 15 мл молока 15-и капель 4 раствора хлорида кальция,отделившуюся после центрифугирования сыворотку 3 отбирают в объеме 300 микролитров, переливают в планшет и определяют на фотометре ее оптическую плотность, при этом оптическая плотность сыворотки цельного молока составляет 0,198-0,384,а восстановленного - 0,082-0,095.