Штамм lactobacillus bulgaricus fl-2, используемый для приготовления кисломолочного продукта кумыс

(51) 12 1/20 (2006.01) 23 9/127 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ ПРИГОТОВЛЕНИЯ КИСЛОМОЛОЧНОГО ПРОДУКТА КУМЫС из микрофлоры кисломолочного продукта кумыс в естественных условиях. В Депозитарии ТОО КАЗНИИППП штамм депонирован под регистрационным номером ВКПМ В-341. Штамм культивируют на питательных средах обезжиренное молоко,питательная среда МРС. Изобретение обеспечивает получение кисломолочного продукта кумыс.(72) Балпанов Дархан Серикович Тен Олег Андреевич Вайтман Анна Николаевна(73) Республиканское государственное предприятие на праве хозяйственного ведения Национальный центр биотехнологии Комитет науки Министерства образования и науки Республики Казахстан Изобретение относится к биотехнологии и молочной промышленности и представляет собой новый штамм молочнокислой культуры, предназначенный для производства кисломолочного продукта кумыс. Кумыс - напиток, традиционно изготавливаемый из молока кобылиц, реже - козьего молока или коровьего. Кумыс получается в результате сквашивания молока молочнокислыми бактериями и дрожжами, которые синтезируют витамины группы С и В, образуют алкоголь, обильно выделяют углекислоту, которая придат кумысу характер освежающего шипучего напитка. Кумыс обладает выраженной антимикробной активностью в связи с наличием в нм антибиотических веществ,вырабатываемых микроорганизмами при брожении,обладает значительной питательной ценностью и способен стимулировать биологические процессы в организме. Благодаря наличию алкоголя, углекислоты и молочной кислоты кумыс возбуждает деятельность желудочных желез и улучшает пищеварение. Антибиотические вещества кумыса повышают сопротивляемость организма к инфекции, а молочнокислые бактерии создают благоприятную для организма микрофлору кишечника и подавляют в нм гнилостные процессы, ведущие к самоотравлению организма. Использование штаммов молочнокислых культур для получения кисломолочных продуктов,предназначенных для продуктов питания,биологически активных добавок, диетического,лечебно-профилактического питания широко известно. Известны штаммы, ,, , обладающие высокой устойчивостью к ингибиторам роста, способностью стабильно образовывать вязкий молочный сгусток,обладают хорошей сочетаемостью с другими штаммами лактобактерий и выраженными физиолого-биохимическими свойствами. Известен штаммР 22110, продуцирующий молочную кислоту и способный оказывать значимое положительное влияние на сужение дыхательных путей, для приготовления питательной композиции и лекарственного средства для лечения и профилактики легочной дисфункции у субъекта(Патент РФ 2407784 С 2, опубл. 27.12.2010 г.). Недостатком данных штаммов является более низкая антагонистическая активность. Задачей заявляемого изобретения является создание кисломолочного продукта с использованием лактобактерий,обладающих высокой кислотообразующей и антагонистической активностью. Местный штаммвыделен в естественных условиях из микрофлоры кисломолочного продукта кумыс. Идентификацию штамма проводили по методике, приведенной в книге Определитель бактерий Берджи /Под ред. Дж. Хоулта. 2 Штамм депонирован в Депозитарии ТОО КАЗНИИППП и имеет номер ВКПМ В-341. ШтаммВКПМ В-341 имеет следующие характеристики 1. Культурально-морфологические- эндоспор не образуют На поверхности агаризованной среды МРС через 24 часа при температуре (370,5)С образуют- характер контура края - расплывчатый- консистенция мягкая. Изучение культуральных или морфологических свойств отобранного штамма молочнокислых микроорганизмов проводили на обрате молока 2. Физиолого-биохимические- скорость сквашивания молока - 14 часов.- растет при температуре (370,5)С- растет в мясопептонном бульоне при рН 8,3- растет в молоке с 0,4 фенола. штамм выдерживает нагревание при температуре 60 С в течении 90 минут штамм выдерживает нагревание при температуре 65 С с течении 30 минут. 3. Антибиотическая активность- диаметр зоны подавления роста по отношению к представителю патогенной микрофлорысоставил - 22 мм- диаметр зоны подавления роста по отношению к представителю условно-патогенной микрофлорысоставил - 26 мм. Определение антагонистической активности штаммаВКПМ В-341 проводили на плотной питательной среде (МПА) методом диффузии в агар. Способ, условия и состав сред для длительного хранения штамма - лиофилизация при температуре не выше 4 С в защитной среде следующего состава сахароза - 100 г/л, желатоза - 30 г/л,дистиллированная вода до 1 л. Стерилизуют текучим паром в течение трех дней по 30 мин. Способ, условия и состав сред для размножения штамма - глубинное культивирование на среде обрат молока, температура инкубации (370,5)С,время инкубации 10-16 час в термостате. В колбе объемом 100 мл с 50 мл питательной среды. Доза посевного материала составляет 1 мл (2). При поверхностном культивировании на средевремя инкубации - 2 суток. Состав обрата, сухое обезжиренное молоко - 87 г, вода дистиллированная- до 1 л. Стерилизация обрата при 120 С в течении 20 мин. Состав среды , О 4 - 0,05 О 4 0,2- цистин - 0,2 2 О 4 - 2,9 4 лимоннокислый СН 3 СООа х 3 Н 2 О - 2,0 пептон - 5,0 глюкоза - 20,0 печеночный экстракт 100 мл дрожжевой автолизат - 50 мл молоко гидролизованное по Богданову -500 мл твин - 0,2 агар-агар - 20. Стерилизуют при 121 С 30 мин. Оптимальные условия и состав среды для ферментации - глубинное культивирование с использованием обрата молока с 3 20-ного раствора кукурузного экстракта. Условия культивирования температура (370,5)С, время культивирования -11 час. Стерилизация (1101)С в течении 30 мин. Предлагаемый новый штамм, выделенный из кисломолочного продукта кумыс,хорошо приспособлен к местным условиям, прост в культивировании и хранении. Штамм растет при температуре (370,5)С на простой питательной среде - обрат молока, время инкубации 10-16 часов,условия хранения - лиофилизация при температуре не выше 4 С. Кроме того, штамм обладает высокой продуктивностью (титр жизнеспособных клеток в лиофилизированном образце составляет КОЕ/г),а также высокой 2,01010 кислотообразующей и антагонистической активностью (диаметр зоны подавления роста по отношению к представителю патогенной микрофлорысоставил -22 мм,диаметр зоны подавления роста по отношению к представителю условно-патогенной микрофлорысоставил - 26 мм) по отношению к условно-патогенной и патогенной микрофлоре. Благодаря своим выраженным биологическим и антибиотическим свойствам(способности к высокой кислотообразующей и антагонистической активностью, диаметр зоны подавления роста- 22 мм,26 мм) штамм представляет производственную ценность для молочной промышленности. Пример 1. Использование штаммаВКПМ В-341 при производстве кумыса из кобыльего молока При производстве кумыса использовали парное кобылье молоко кислотностью не выше 7 Т, чистое без посторонних привкусов и запахов. В молоко вносили сахар, а затем сквашивали культурамиВКПМ В-341, а также ацидофильной палочкой и дрожжами,сбраживающими лактозу и обладающими антибиотическими свойствами. Готовый кумыс характеризуется кисломолочным, острым, слегка спиртовым вкусом и жидкой пенистой консистенцией, по густоте он мало отличается от коровьего молока. Пример 2. Использование штаммаВКПМ В-341 при производстве кумыса из коровьего молока При производстве кумыса использовали коровье молоко кислотностью не выше 7 Т, чистое без посторонних привкусов и запахов. В обезжиренное молоко вносили сахар, а затем сквашивали культурамиВКПМ В-341, а также ацидофильной палочкой и дрожжами,сбраживающими лактозу и обладающими антибиотическими свойствами. Процесс сквашивания длится 10 часов. Готовый кумыс характеризуется кисломолочным, острым, слегка спиртовым вкусом и жидкой пенистой консистенцией, по густоте он мало отличается от коровьего молока. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Штамм-2,депонирован в Депозитарии ТОО Казахский научно-исследовательский институт перерабатывающей и пищевой промышленности под номером ВКПМ В-341, используемый для приготовления кисломолочного продукта кумыс.