Питательная среда для культирования молочнокислых бактерий

(51) 12 1/20 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН(2 О 4) - 0,15-0,2 хлорида калия (С) - 0,2-0,4 химозин 0,8-1,2 10 едкий натр- 0,080,12 воды дистиллированной до 100. После перемешивания смесь подвергают пастеризации при 85 С в течение 30 минут, затем охлаждают до 37 С и вносят закваску в соотношении 5, сквашивание осуществляют в течение 3 часов при температуре 37 С. Затем проводят первую нейтрализацию до 7,0, добавляют химозин. Затем нейтрализацию проводят через каждый час до 7,0, выдерживают в термостате 19 часов при температуре 37 С. За время выращивания перемешивание осуществляют каждые полчаса при 150 об/мин. Полученные результаты свидетельствуют, что предлагаемая питательная среда, обогащенная смесью органических и неорганических веществ обладает стимулирующим действием на рост молочнокислых микроорганизмов, что позволяет повысить их выход.(72) Конуспаева Гаухар Сапаркалиевна Баубекова Алмагуль Сериковна Кожаев Аскар Нурсултанович Ахметсадыкова Шынар Нурлановна Ахметсадыков Нурлан Нуролдинович Хусаинов Дамир Микдатович(54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИРОВАНИЯ МОЛОЧНОКИСЛЫХ БАКТЕРИЙ(57) Изобретение относится к биотехнологии и может применяться в молочной промышленности при производстве бактериальных заквасок и кисломолочных продуктов. Штаммы молочнокислых культур культивируют на питательной среде следующего состава масс. СОБ (сухое обезжиренное коровье молоко) - 9,011,0 экстракт дрожжей 0,18-0,22 пептон ферментативный - 0,08-0,12 МПБ (мясо-пептонный бульон) - 1,6-2,0 глюкоза - 1,8-2,2 аммоний Изобретение относится к биотехнологии и может применяться в молочной промышленности при производстве бактериальных заквасок и кисломолочных продуктов. При промышленном использовании микроорганизмов необходимо постоянно разрабатывать приемы интенсификации их роста и размножения. К способам регуляции роста относятся различные стимуляторы. Известна питательная среда для культивирования молочнокислых бактерий, содержащая молоко и стимуляторы, при этом в качестве стимулятора содержащая водный экстракт из листьев амаранта Способ культивирования микроорганизмов пробиотиков. Патент РФ 2233322 С 2, М. кл. 12 1/20, 12 1/38,2001. Недостатком питательной среды являются низкие ростовые свойства. Известна питательная среда для культивирования молочнокислых бактерий, содержащая молоко и стимуляторы, при этом в качестве стимулятора содержащая растворы отдельных солей 4 в концентрации 5 мг/л 1,25 мг/л 4 - 1 мг/л 4 - 5 мг/л 4 - 0,25 мг/л Способ культивирования молочнокислых бактерий в молоке. Патент РФ 2316585 С 2, М. кл. 12 1/20,2008. Недостатком питательной среды являются низкие ростовые свойства. Цель изобретения - разработка питательной среды для культивирования молочнокислых бактерий, содержащая молоко и смесь органических и неорганических веществ,обладающих выраженным стимулирующим эффектом. Технический результат изобретения заключается в повышении репродуктивных свойств молочнокислых бактерий при выращивании в питательной среде. Сущность изобретения состоит в разработке питательной среды для культивирования молочнокислых бактерий, обогащенной смесью органических и неорганических веществ. Штаммы молочнокислых культур, например,выделенные из кумыса и шубата культивируют на питательной среде следующего состава масс. СОБ (сухое обезжиренное коровье молоко) - 9,011,0 экстракт дрожжей - 0,18-0,22 пептон ферментативный - 0,08-0,12 МПБ (мясо-пептонный бульон) - 1,6-2,0 глюкоза - 1,8-2,2 аммоний лимоннокислый, двузамещенный (61472) - 0,180,22 натрий уксуснокислый (СН 3 СООа 3 Н 2 О) 0,4-0,6 сернокислый магний семиводный(а 2 НР 4) - 0,15-0,2 хлорида калия (С) - 0,2-0,4 химозин 0,8-1,2 10 едкий натр- 0,080,12 воды дистиллированной до 100. После перемешивания смесь подвергают пастеризации при 85 С в течение 30 минут, затем охлаждают до 37 С и вносят закваску в соотношении 5, сквашивание 2 осуществляют в течение 3 часов при температуре 37 С. Затем проводят первую нейтрализацию до 7,0, добавляют химозин. Затем нейтрализацию проводят через каждый час до 7,0, выдерживают в термостате 19 часов при температуре 37 С. За время выращивания перемешивание осуществляют каждые полчаса при 150 об/мин. По окончании культивирования осуществляют лиофильное высушивание готового продукта. Компонентный состав среды оптимизирован для молочнокислых микроорганизмов- сухое молоко - основной компонент среды, а также ее исходная азотистая основа - дешевый и легкодоступный источник углеводов, белков и микроэлементов- экстракт дрожжей - источник витаминов группы В и других факторов роста, необходимых для жизнедеятельности молочнокислой микрофлоры- пептон ферментативный - ферментативный перевар белка мяса, содержащий крупные белковые фрагменты, называемые пептонами, образуемые на начальных стадиях процесса переваривания белков под действием ферментов, например, пепсина необходимый дополнительный компонент азотистой основы предлагаемой питательной среды. Его применение в составе среды повышает уровень аминного азота, обогащает питательную среду аминокислотами, пептидами, факторами роста и способствует реактивации и активному размножению заквасочной микрофлоры- мясо-пептонный бульон - общепринятый компонент питательной среды, источник белков и микроэлементов- глюкоза - источник легко усвояемого источника питания, повышающего энергетические запасы микроорганизмов- комплекс солей (аммоний лимоннокислый двузамещенный,натрий уксуснокислый,сернокислый магний семиводный, гидрофосфат натрия одноводный, хлорид калия) повышает буферную емкость среды, снижает отрицательное влияние активной кислотности на клетки микроорганизмов, чем обеспечивает их активное размножение и высокий урожай- химозин - фермент, вызывающий свертывание молока, обусловленное превращением казеина молока в параказеин, который в присутствии солей кальция выпадает в виде творожистой массы- твин 80 - неионогенное поверхностно активное вещество, является эмульгатором- едкий натр - самая распространнная щлочь,используется для корректировкисреды. Изобретение поясняется следующими примерами. Пример 1 Для реализации предлагаемого способа используют питательную среду следующего состава, масс. СОБ (сухое обезжиренное коровье молоко) - 9,0 экстракт дрожжей - 0,18 пептон ферментативный - 0,08 МПБ (мясо-пептонный бульон) - 1,6 глюкоза - 1,8 аммоний лимоннокислый, двузамещенный (61472) - 0,18 натрий уксуснокислый (СН 3 СОа 3 Н 2 О) - 0,4 сернокислый магний семиводный (472) 0,04 твин - 80 (С 58 Н 114 О 26) - 0,08 гидрофосфат натрия одноводный (24) - 0,15 хлорида калия(С) - 0,2 химозин 0,8 10 едкий натр 0,08 воды дистиллированной до 100. После перемешивания смесь подвергают пастеризации при 85 С в течение 30 минут, затем охлаждают до 37 С и вносят закваску в соотношении 5, сквашивание осуществляют в течение 3 часов при температуре 37 С. Затем проводят первую нейтрализацию до 7,0,добавляют химозин. Затем нейтрализацию проводят через каждый час до 7,0, выдерживают в термостате 19 часов при температуре 37 С. За время выращивания перемешивание осуществляют каждые полчаса при 150 об/мин. По окончании культивирования осуществляют лиофильное высушивание готового продукта. Определение КОЕ проводят методом посева образцов на питательную среду. Штаммы культивируют по указанному выше способу. Количество КОЕ определяют на питательной среде . Технологическую оценку влияния питательной среды проводили по количеству выращенных молочнокислых бактерий. Данные приведены в таблице 1. Пример 2 Для реализации предлагаемого способа используют питательную среду следующего состава, масс. СОБ (сухое обезжиренное коровье молоко) - 10,0 экстракт дрожжей - 0,2 пептон ферментативный - 0,1 МПБ (мясо-пептонный бульон) - 1,8 глюкоза - 2,0 аммоний лимоннокислый двузамещенный (61472) - 0,2 натрий уксуснокислый (332) - 0,5 сернокислый магний семиводный (472) 0,05 твин - 80 (С 58 Н 114 О 26) - 0,1 гидрофосфат натрия одноводный (24) - 0,175 хлорид калия(С) - 0,3 химозин 1,0 10 едкий натр 0,1 воды дистиллированной до 100. После перемешивания смесь подвергают пастеризации при 85 С в течение 30 минут, затем охлаждают до 37 С и вносят закваску в соотношении 5, сквашивание осуществляют в течение 3 часов при температуре 37 С. Затем проводят первую нейтрализацию до 7,0,добавляют химозин. Затем нейтрализацию проводят через каждый час до 7,0, выдерживают в термостате 19 часов при температуре 37 С. За время выращивания перемешивание осуществляют каждые полчаса при 150 об/мин. По окончании культивирования осуществляют лиофильное высушивание готового продукта. Определение КОЕ проводят методом посева образцов на питательную среду . Штаммы культивируют по указанному выше способу. Количество КОЕ определяют на питательной среде . Технологическую оценку влияния питательной среды проводили по количеству выращенных молочнокислых бактерий. Данные приведены в таблице 1. Пример 3 Для реализации предлагаемого способа используют питательную среду следующего состава, масс. СОБ (сухое обезжиренное коровье молоко) - 11,0 экстракт дрожжей - 0,22 пептон ферментативный - 0,12 МПБ (мясо-пептонный бульон) - 2,0 глюкоза - 2,2 аммоний лимоннокислый, двузамещенный (61472) - 0,22 натрий уксуснокислый (СНзСООа 3 Н 2 О) - 0,6 сернокислый магний семиводный (472) 0,06 твин - 80 (С 58 Н 114 О 26) - 0,12 гидрофосфат натрия одноводный (24) - 0,2 хлорида калия(С) - 0,4 химозин 1,2 10 едкий натр 0,12 воды дистиллированной до 100. После перемешивания смесь подвергают пастеризации при 85 С в течение 30 минут, затем охлаждают до 37 С и вносят закваску в соотношении 5, сквашивание осуществляют в течение 3 часов при температуре 37 С. Затем проводят первую нейтрализацию до 7,0,добавляют химозин. Затем нейтрализацию проводят через каждый час до 7,0, выдерживают в термостате 19 часов при температуре 37 С. За время выращивания перемешивание осуществляют каждые полчаса при 150 об/мин. По окончании культивирования осуществляют лиофильное высушивание готового продукта. Определение КОЕ проводят методом посева образцов на питательную среду . Штаммы культивируют по указанному выше способу. Количество КОЕ определяют на питательной среде . Технологическую оценку влияния питательной среды проводили по количеству выращенных молочнокислых бактерий. Данные приведены в таблице 1. Полученные результаты свидетельствуют, что предлагаемая питательная среда, обогащенная смесью органических и неорганических веществ обладает стимулирующим действием на рост молочнокислых микроорганизмов, что позволяет повысить их выход. Таблица 1 Влияние питательной среды, обогащенной смесью органических и неорганических веществ на рост молочнокислых микроорганизмов Исследуемые штаммы культур молочнокислых бактерий Изменение количества бактерий в сравнении с контролем, млрд. КОЕ/см 3 молоко Питательная среда Питательная среда по Питательная среда по примеру 1 примеру 2 по примеру 3 22,8 14,8 Исследуемые штаммы культур молочнокислых бактерий Изменение количества бактерий в сравнении с контролем, млрд. КОЕ/см 3 молоко Питательная среда Питательная среда по Питательная среда по примеру 1 примеру 2 по примеру 3 19,2 ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Питательная среда для культивирования молочнокислых бактерий, содержащая молоко и стимуляторы, отличающаяся тем, что состоит их сухого молока, обогащенного смесью органических и неорганических веществ, при следующем соотношении компонентов, масс. СОБ (сухое обезжиренное коровье молоко) 9,0-11,0 экстракт дрожжей 0,18-0,22 пептон ферментативный 0,08-0,12 МПБ (мясо-пептонный бульон) 1,6-2,0 глюкоза 1,8-2,2(СН 3 С 3 Н 2) 0,4-0,6 сернокислый магний семиводный 0,04-0,06(24) 0,15-0,2 хлорида калия (К) 0,2-0,4 химозин 0,8-1,2 10 едкий натр (ОН) 0,08-0,12 вода дистиллированная до 100.