Обогащенная питательная среда для культивирования молочнокислых бактерий

(51) 12 1/20 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ аммоний лимоннокислый, двузамещенный 0,180,22 натрий уксуснокислый - 0,4-0,6 сернокислый магний - 0,04-0,06 твин - 80 - 0,08-0,12 гидрофосфат натрия - 0,15-0,2 хлорида калия - 0,20,4 химозин 0,8-1,210 едкий натр - 0,08-0,12 цинк сернокилый - 0,003 - 0,005 железа сульфат 0,0005 - 0,0015 сернокислая медь- 0,003 - 0,005 марганец сернокислый - 0,0005 - 0,0015 хлористый кобальт - 0,0005 - 0,0015 селенит натрия - 0,0005 0,0015 деминерализованная вода - до 100. После перемешивания смесь подвергают пастеризации при 85 С в течение 30 минут, затем охлаждают до 37 С и вносят закваску в соотношении 5, сквашивание осуществляют в течение 3 часов при температуре 37 С. Затем проводят первую нейтрализацию до 7,0, добавляют химозин. Затем нейтрализацию проводят через каждый час до 7,0, выдерживают в термостате 19 часов при температуре 37 С. За время выращивания перемешивание осуществляют каждые полчаса при 150 об/мин. Полученные результаты свидетельствуют, что предлагаемая обогащенная питательная среда смесью органических и неорганических веществ обладает стимулирующим действием на рост молочнокислых микроорганизмов, что позволяет повысить их выход.(72) Конуспаева Гаухар Сапаркалиевна Баубекова Алмагуль Сериковна Кожаев Аскар Нурсултанович Ахметсадыкова Шынар Нурлановна Ахметсадыков Нурлан Нуролдинович Ахметсадыкова Назия Нурлановна Хусаинов Дамир Микдатович(54) ОБОГАЩЕННАЯ ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ МОЛОЧНОКИСЛЫХ БАКТЕРИЙ(57) Изобретение относится к биотехнологии и может применяться в молочной промышленности при производстве бактериальных заквасок и кисломолочных продуктов. Штаммы молочнокислых культур, выделенные из кумыса и шубата культивируют на питательной среде следующего состава масс. СОБ (сухое обезжиренное коровье молоко) - 9,0-11,0 экстракт дрожжей - 0,18-0,22 гидролизат казеина - 0,08-0,12 казеиновый пептон - 1,6-2,0 глюкоза - 1,8-2,2 Изобретение относится к биотехнологии и может применяться в молочной промышленности при производстве бактериальных заквасок и кисломолочных продуктов. При промышленном использовании микроорганизмов необходимо постоянно разрабатывать приемы интенсификации их роста и размножения. К способам регуляции роста относятся различные стимуляторы. Известна обогащенная питательная среда для культивирования молочнокислых бактерий,содержащая молоко и стимуляторы, при этом в качестве стимулятора содержащая водный экстракт из листьев амаранта Способ культивирования микроорганизмов - пробиотиков. Патент РФ 2233322 С 2, М. кл. 12 1/20, 12 1/38, 2001. Недостатком такой обогащенной питательной среды являются низкие ростовые свойства. Известна обогащенная питательная среда для культивирования молочнокислых бактерий,содержащая молоко и стимуляторы, при этом в качестве стимулятора содержащая растворы отдельных солей 4 в концентрации 5 мг/л 1,25 мг/л 4 - 1 мг/л 4 - 5 мг/л 4 0,25 мг/л Способ культивирования молочнокислых бактерий в Молоке. Патент РФ 2316585 С 2, М. кл. 12 1/20, 2008. Недостатком такой обогащенной питательной среды являются низкие ростовые свойства. Цель изобретения - разработка обогащенной питательной среды для культивирования молочнокислых бактерий, содержащая молоко и смесь органических и неорганических веществ,обладающих выраженным стимулирующим эффектом. Технический результат изобретения заключается в повышении репродуктивных свойств молочнокислых бактерий при выращивании в питательной среде. Сущность изобретения состоит в разработке обогащенной питательной среды для культивирования молочнокислых бактерий,обогащенной смесью органических и неорганических веществ. Штаммы молочнокислых культур, например,выделанные из кумыса и шубата культивируют на обогащенной питательной среде следующего состава масс. СОБ (сухое обезжиренное коровье молоко) - 9,0-11,0 экстракт дрожжей - 0,18-0,22 гидролизат казеина - 0,08-0,12 казеиновый пептон 1,6-2,0 глюкоза - 1,8-2,2 аммоний лимоннокислый,двузамещенный (61472) - 0,18-0,22 натрий уксуснокислый (СН 3 СООНа 32 О) - 0,4-0,6 сернокислый магний семиводный (О 472) 0,04-0,06 твин - 80 (С 58 Н 11426) - 0,08-0,12 гидрофосфат натрия одноводный (а 2 НРО 4) - 0,150,2 хлорида калия (С) - 0,2-0,4 химозин 0,8-1,210 едкий натр- 0,08-0,12 4 - 0,003- 0,005 семиводный железа сульфат (47 Н 2 О)0,0005 - 0,0015 пятиводная сернокислая медь 2(45 Н 2 О) - 0,003 - 0,005 пятиводный марганец сернокислый (45 Н 2 О) - 0,0005 - 0,0015 шестиводный хлористый кобальт СоС 126 Н 2 0,0005 - 0,0015 селенит натрия (23) - 0,0005 0,0015 деминерализованная вода - до 100. После перемешивания смесь подвергают пастеризации при 85 С в течение 30 минут, затем охлаждают до 37 С и вносят закваску в соотношении 5, сквашивание осуществляют в течение 3 часов при температуре 37 С. Затем проводят первую нейтрализацию до 7,0, добавляют химозин. Затем нейтрализацию проводят через каждый час до 7,0, выдерживают в термостате 19 часов при температуре 37 С. За время выращивания перемешивание осуществляют каждые полчаса при 150 об/мин. По окончании культивирования осуществляют лиофильное высушивание готового продукта. Компонентный состав среды оптимизирован для молочнокислых микроорганизмов- сухое молоко - основной компонент среды, а также ее исходная азотистая - дешевый и легкодоступный источник углеводов, белков и микроэлементов- экстракт дрожжей - источник витаминов группы В и других факторов роста, необходимых для жизнедеятельности молочнокислой микрофлоры- гидролизат казеина - продукт, получаемый при кислотном гидролизе белка молока - казеина,содержит раствор аминокислот и простейших пептидов. Содержание общего азота 0,7 - 0,95 аминный азот составляет 40 - 60 общего азота,содержание триптофана не менее 15 мг в 100 мл.- казеиновый пептон - ферментативный перевар казеина, содержащий крупные белковые фрагменты,называемые пептонами, образуемые на начальных стадиях процесса переваривания белков под действием ферментов, например, пепсина необходимый дополнительный компонент азотистой основы предлагаемой питательной среды. Его применение в составе среды повышает уровень аминного азота, обогащает питательную среду аминокислотами, пептидами, факторами роста и способствует реактивации и активному размножению заквасочной микрофлоры- глюкоза - источник легко усвояемого источника питания, повышающего энергетические запасы микроорганизмов- комплекс солей (аммоний лимоннокислый двузамещенный,натрий уксуснокислый,сернокислый магний семиводный, гидрофосфат натрия одноводный, хлорид калия) повышает буферную емкость среды, снижает отрицательное влияние активной кислотности на клетки микроорганизмов, чем обеспечивает их активное размножение и высокий урожай- твин 80 - неионогенное поверхностно активное вещество, является эмульгатором- едкий натр - самая распространнная щлочь,используется для корректировкисреды. Изобретение поясняется следующими примерами. Пример 1 Для реализации предлагаемого способа используют питательную среду следующего состава, масс. СОБ (сухое обезжиренное коровье молоко) - 9,0 экстракт дрожжей - 0,18 гидролизат казеина - 0,08 казеиновый пептон - 1,6 глюкоза 1,8 аммоний лимоннокислый, двузамещенный(СН 3 СОа 3 Н 2 О) - 0,4 сернокислый магний семиводный (472) - 0,04 твин - 80(С 58 Н 114 О 26) - 0,08 гидрофосфат натрия одноводный (24) - 0,15 хлорида калия (С) 0,2 химозин 0,8 10 едкий натр- 0,08 4 - 0,003 семиводный железа сульфат(472) - 0,0005 пятиводная сернокислая медь (452) - 0,003 пятиводный марганец сернокислый (452) - 0,0005 шестиводный хлористый кобальт СоС 126 Н 2 О - 0,0005 селенит натрия (23) - 0,0005 деминерализованная вода- до 100. После перемешивания смесь подвергают пастеризации при 85 С в течение 30 минут, затем охлаждают до 37 С и вносят закваску в соотношении 5, сквашивание осуществляют в течение 3 часов при температуре 37 С. Затем проводят первую нейтрализацию до 7,0,добавляют химозин. Затем нейтрализацию проводят через каждый час до 7,0, выдерживают в термостате 19 часов при температуре 37 С. За время выращивания перемешивание осуществляют каждые полчаса при 150 об/мин. По окончании культивирования осуществляют лиофильное высушивание готового продукта. Определение КОЕ проводят методом посева образцов на питательную среду. Штаммы культивируют по указанному выше способу. Количество КОЕ определяют на питательной среде . Технологическую оценку влияния питательной среды проводили по количеству выращенных молочнокислых бактерий. Данные приведены в таблице 1. Пример 2 Для реализации предлагаемого способа используют питательную среду следующего состава, масс. СОБ (сухое обезжиренное коровье молоко) - 10,0 экстракт дрожжей - 0,20 гидролизат казеина - 0,10 казеиновый пептон - 1,80 глюкоза 2,0 аммоний лимоннокислый, двузамещенный(СН 3 СООа 3 Н 2 О) - 0,5 сернокислый магний семиводный (472) - 0,05 твин - 80(С 58 Н 114 О 26) - 0,10 гидрофосфат натрия одноводный (24) - 0,175 хлорида калия (С)(452) - 0,004 пятиводный марганец сернокислый (452) - 0,00001 шестиводный хлористый кобальт СоС 126 Н 2 О - 0,001 селенит натрия (23) - 0,001 деминерализованная вода до 100. После перемешивания смесь подвергают пастеризации при 85 С в течение 30 минут, затем охлаждают до 37 С и вносят закваску в соотношении 5, сквашивание осуществляют в течение 3 часов при температуре 37 С. Затем проводят первую нейтрализацию до 7,0,добавляют химозин. Затем нейтрализацию проводят через каждый час до 7,0, выдерживают в термостате 19 часов при температуре 37 С. За время выращивания перемешивание осуществляют каждые полчаса при 150 об/мин. По окончании культивирования осуществляют лиофильное высушивание готового продукта. Определение КОЕ проводят методом посева образцов на питательную среду . Штаммы культивируют по указанному выше способу. Количество КОЕ определяют на питательной среде . Технологическую оценку влияния питательной среды проводили по количеству выращенных молочнокислых бактерий. Данные приведены в таблице 1. Пример 3 Для реализации предлагаемого способа используют питательную среду следующего состава, масс. СОБ (сухое обезжиренное коровье молоко) - 11,0 экстракт дрожжей - 0,22 гидролизат казеина - 0,12 казеиновый пептон - 2,0 глюкоза 2,2 аммоний лимоннокислый, двузамещенный(СН 3 СООа 3 Н 2 О) - 0,6 сернокислый магний семиводный (472) - 0,06 твин - 80(С 58 Н 114 О 26) - 0,12 гидрофосфат натрия одноводный (24) - 0,2 хлорида калия (С) 0,4 химозин - 1,2 10 едкий натр- 0,12 4 - 0,005 семиводный железа сульфат(472) - 0,0015 пятиводная сернокислая медь (452) - 0,005 пятиводный марганец сернокислый (452) - 0,0015 шестиводный хлористый кобальт СоС 126 Н 2 - 0,0015 селенит натрия (23) - 0,0015 деминерализованная вода- до 100. После перемешивания смесь подвергают пастеризации при 85 С в течение 30 минут, затем охлаждают до 37 С и вносят закваску в соотношении 5, сквашивание осуществляют в течение 3 часов при температуре 37 С. Затем проводят первую нейтрализацию до 7,0,добавляют химозин. Затем нейтрализацию проводят через каждый час до 7,0, выдерживают в термостате 19 часов при температуре 37 С. За время выращивания перемешивание осуществляют каждые полчаса при 150 об/мин. По окончании культивирования осуществляют лиофильное высушивание готового продукта. Определение КОЕ проводят методом посева образцов на питательную среду . Штаммы культивируют по указанному выше способу. Количество КОЕ определяют на питательной среде . 3 Технологическую оценку влияния питательной среды проводили по количеству выращенных молочнокислых бактерий. Данные приведены в таблице 1. Полученные результаты свидетельствуют, что предлагаемая обогащенная питательная среда смесью органических и неорганических веществ обладает стимулирующим действием на рост молочнокислых микроорганизмов, что позволяет повысить их выход. Таблица 1 Влияние питательной среды, обогащенной смесью органических и неорганических веществ на рост молочнокислых микроорганизмов Исследуемые штаммы культур молочнокислых бактерий Изменение количества бактерий в сравнении с контролем, млрд. КОЕ/см 3 молоко Питательная среда Питательная среда по Питательная среда по по примеру 1 примеру 2 примеру 3 23,4 15,2 ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Обогащенная питательная среда для культивирования молочнокислых бактерий,содержащая молоко и стимуляторы,отличающаяся тем, что состоит их сухого молока,обогащенного смесью органических и неорганических веществ,при следующем соотношении компонентов, масс. СОБ (сухое обезжиренное коровье молоко) 9,0-11,0 экстракт дрожжей 0,18-0,22 гидролизат казеина 0,08-0,12 казеиновый пептон 1,6-2,0 глюкоза 1,8-2,2 аммоний лимоннокислый,двузамещенный (С 6 Н 14 О 72) 0,18-0,22 натрий уксуснокислый(45 Н 2) 0,0005-0,0015 шестиводный хлористый кобальт СоС 126 Н 2 0,0005-0,0015 селенит натрия (23) 0,0005-0,0015 деминерализованная вода до 100.