Штамм соматических структур макроскопического гриба Agaricus bisporus – продуцент биологически активных веществ

НАЦИОНАЛЬНОЕ ПАТЕНТНОЕ ВЕДОМСТВО ПРИ КАБИНЕТЕ МИНИСТРОВ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН(54) ШТАММ СОМАТИЧЕСКИХ СТРУКТУР МАКРОСКОПИЧЕСКОГО ГРИБА АСАКТСПБ ВТЗРОКПЗПРОДУЦЕНТ БИОЛОГИЧЕСКИ(57) Изобретение относится к биотехнологии И МОЖСТ бЫТЬ ИСПОЛЬЗОВЕЪНО вкачестве продуцента биологически ЕЪКТИВНЬТХ ВСЩССТВ.Штамм Аагйсиз Ьйзрогиз - Д 492 получен из природного материала, аименно выделен в чистую культуру из пластинок плодового тела шампиньона.Штамм депонирован в коллекции микроорганизмов ВНИИСХМ - ВИЗР под Д 49. При культивировании штамма на твердых и жидких питательных средах продуцент накапливает биомассу до 27,3 г/л, витамины С,РР и группы В, ферменть 1 целлюлозу 83 ед/г, амилазу 55 ед/г,протеазу 40-50 ед/г,липазу 6-27 ед/г, карбоновые кислоты ( в т.ч. сорбиновую щавелевую,фумарову , яблочную, винную,лимонную).На основе штамма готовят кормовую добавку для сельскохозяйственных животных и птиц.Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в качестве продуцента биологически активных веществ.Известны промышленные штаммы грибов шампиньонов,используемые в основном ,как продуценты плодовых тел.Близким к заявляемому объекту по габитусу плодового тела является применяемый в промышленности штамм ГДР-2 (совхоз Заречье, Московской обл.) Основной недостаток этого штамма состоит в том , что он медленно растет на жидких и твердых питательных средах,что делает не эффективным его культивирование в промышленности сцелью получения биомассы и биологически активных веществ.Технический результат изобретения расширение ассортимента непатогенных штаммов, продуцирующих биологически активные вещества , а также ускорение процесса выращивания продуцента .Новый штамм мицелия Аагйсиз Ызрогиз выделен из пластинок плодового тела шампиньона, произрастающего в Балхашском районе Алма-Атинской области. Депонирован в коллекции непатогенных микроорганизмов ВНИИ сельскохозяйственной микробиологии ВАСХНИЛ, г.Ленинград,номер Д 49.Штамм имеет следующие признаки3 Культурно-морфологические. На сусло агаре культура образует бархатистые колонии из плотного слоя прямых коротких воздушного мицелия. Край колонии волнообразный, погруженный,с пушистой внешней линией, обратная сторона колонии не окрашена. Воздушный мицелий состоит из хорошо развитых генеративных и скелетных гифов. Генеративные гифы (толщина -2-3 мкм),тонкостенные, прозрачные , слабоветвящиеся , септированы. Гомогенная протоплазма расположена у перегородок и точках роста гиф. Пряжки редкие. Скелетные гифы толстые (4-6 мкм), почтибез перегородок встречаются вздутия ,ОТВСТВЛСНИС генеративных ГИфОВ. Протоплазма скелетных гифовинкрустирована кристиллами неправильной формы.Физиолого-биохимические признаки аэроб, оптимальный рН среды 6-7 ,оптимальная температура роста 18-20 С. При более высокой и более низкой температуре рост угнетен . Нижний предел температуры роста 13 С.Из источников углерода культура ассимилирует крахмал, мальтозу,аробинозу, глюкозу.Из источников азота предпочтительно усваивает пептон дрожжевой автолизат,хуже минеральные - мочевину аммоний сернокислый, аммоний азотно-кислый,аммоний хлористый.При поверхностном способе культивирования на зерновом субстрате продуцент синтезирует ферменты целлюлозу, протеозу,липазу карбоновые кислоты преимущественно янтарную,яблочную витамины группы В, РР, С, а также липиды.Сущность изобретения поясняется следующими примерами конкретного выполнения .Пример 1. Характеристика энергии роста ( ростовой коэффициент).Культуры штаммов ГДР-2 и заявляемого посеяны поверхностно на твердую среду сусло-агар с мелом, через 7 суток культивирования при температуре 2028 С получены следующие результатыРостовой коэффициент 32 3,4 Коэффициент размножения заявля- Глюкоза 1,0 емого штамма превышает коэффициент Малыша 1,0 прототипа почти в 10 раз. автодизат 1,0 Пример 2. Продуктивность штамма на Вода 1 Лжидких питательных средах Культуру выращивания глубинно при температуре 28-30 С , в течение 5 суток, на качалке с 160 об/мин, в колбах с 100 мл питательной среды следующего состава , г/л 1. Среда Лэмбергакислый фосфорнокислый калий - 1,0 аммиачная селитра -1,0 магний сернокислый - 0,5 сахароза - 3,0200 г очищенного измельченного картофеля кипятят 30-40 мин в 1 л воды ,отвар фильтруют , добавляют к нему испарившуюся часть воды и соли5 глюкоза - 1,0 3. Овсяной отвар овсяная Мука - 30 г вода - 970 мл 4. Морковный отвар экстрат моркови - 400 млвода - 600 мл Примечание экстрат готовят из раздробленной моркови , которуюУрожай сырого мицелия на овсяной среде (г/л)На жидкой овсяной среде заявляемый штамм растет лучше всех испытанных сред . Накапливает сырой биомассы 27 г/л,что в 3 раза больше , что урожай прототипа на этой же среде.Полезность или другая эффективность штамма обусловлена его способностью продуцировать биологически активные вещества , что найдет применение в практике сельского хозяйства например,в качестве кормовой добавки , в виде следующего продуктаПродукт, полученный методом твердофазной формантации зерна пшеницы, грибом Адагйсиз Ьйзрошз Д 49,имеет следующие показателиВизуальная оценка роста мицелия заявляемый Д - 49 удовлетворит,хороший отличный удовлетворит, 7,0 27,0Продукт назван автором кормовойФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Штамм соматических структурмакроскопического гриба Адагйсиз Ьйзрошз ВНИИСХМ - ВИЗР Д-49 - продуцент ОИОПОГИЧССКИ активных ВСЩССТВ.Ответственный за выпуск Э.3.Фаизова