Штамм Frichosporon Kashiwayama – продуцент вещества, обладающего стимулирующим действием на репаративные процессы кожи, и способ получения вещества, обладающего стимулирующим действием на репаративные процессы кожи.

Изобретение относится к микробиологии, н частности к микробиологиЧВСКОМУ ПРОИЗВОДСТВУ лекарственным средств. - .,соба получения вещества, используе мого для стимуляции репаративныш процессов кои, и выявление штамиа-продуцента, способного вырабатывать вещество, обладающее стимулирующим дейСТВНЕМ на репаративиые процессы КОЖИ.Штамм Тг 1 сЬоарогоп Кааойоауаша депоиирован в коллекции культур НИИ ферментации, Япония, под номером ЕЕЫР АВ 21 ииарактеривуется следующими признаками.Форме н размер (жидкая-среда на солодовом экстракте НЧ).форму и размер (З-)т (22 О)мкм после проведения культивирования в течение 5 сут и более форма клеток становится нерегулярной и, наконец,клетки становятся ммпелиондныни.Образование псевдомицелия Скультура на предметном стекле, культуральная среда - агар с картофельным экстрактом).клетки псевдогифальные или псевдоиицелиальные, имеют характерные вигзагообразные артроспоры, но без ко индий,шАскоспоры. Аскоспор клетки не имеют.Баллистоспоры. Баллистоспор клеткн не имеют.Катании цв апеплвпй инпътппзпьипй .среде со штриховой разводкой (ага ровая культуральнея среда на солодовом.экстракте НЧ).Пленка на жидкой культуральиой среде (жидкая культуралъиая среда на солодовом экстракте МР).На 502 (мес/нас) глюковном атаре рост отсутствует, на 602 (маснас) агаровол среде с дрожжевым экстрактом не растет.Использование нитратов не используются.использование нитритов не ис-. пользуютсяиспользование этиламииа гидрохлорида не используется.Образование пигмента не образу етсн . , Образование сложных эфиров образуются.Реакция с лакмусовым молоком не коагулирует.Устойчивость к соли критическая концентрация 6 о 82 (нас./об).Оптимальное значение рН 5,0.Разложение мочевины не разлагается.Ойрячппдицд кислоты из глюкозы не образуется.Выделяет при культивировании на среде, состоящей из 0,32 (нас./об.) глюкозы, 0,52 (мас.об.) снятого молока и 0,О 51 (нас./об) дровшевого экстракта, при рН 4,0-6,0 при 20-3 ОС в течение 20 ч биологически активное вещество, и фильтрат, содержат шин данное вещество, имеет спедукг щне свойства.Беснлеточный очищенный фильтрат иадосацочной жидкости культурелъиого продукта содержит иесольше количества аминокислот, сахаридов н липидов. При проведении количественного анализа фильтрата оказалось,что сумариыя азот составляет 0,0050015 Х,.а оумерный фосфор - 0,004Фильтрат представляет собой прозрачную жидкость цветом от бесцветного до слабо желтоватого н имеет слабый вапан.20 мл фильтрата упаривают на водяной бане до уменьшении объема приблизительно до 50 нл. Затем к нонцентрату добавляют 1 мл раствора иннгидриновой пробы. После нагревания смеси в течение 30 нин жидкость преооретает фиолетовую окраску.5 мл азотной кислоты добавляют к концентрату полученному проведением Уперивением по известной методике, и смесь кипятят в течение 20 мни. После охлаждения смеси ее нентрализуют 102-ным раствором гидроокиси натрия. Затеи к снеси добавляют 2 мл раствора аммоний-нолиодатнои пробы. Если смесь нагревают, жидкость приобретает желтоватую окраску. Если к жидкости добавляют 102-ный раствор гид гоонччи чатгчч цветной.К 5 мл фильтрата-добавляют 10 мг индола и 2 ил хлористоводородиой нислоты, н смесь встряхивают достаточное время. Когда смесь затем нагревают в течение 10 мин, жидкость становится красной.Остаток после испа рення,2Содержание золы,2 0,1 Содержание санара 2 1,0 Суммарное содержание сухого вещества,1Кислотность по титро нанию, число мл 1 н ше лочн, оттитрованньш дляСодержание азота в фор ме летучих оснований, нг. 1Содержание тяжельт металлов (в виде РЬ) Не выявлено(предел детентировапня 1 ч/мин) Суммарное содержание ртути Не выявлено(предел детектнрова-0,01 ч/Нин) Не выявле но (пределдетектироВВННЯ 0,01 ч/мин) Содержание кальция,мг.2 14,Содержание фосфора, мг.2 9,8 Содержание муравьиной кислоты Не выявле- но (предел детектирования 0,12) Содержание уксусной кислоты Не выявлено (предел детектирования 0,012).Содержание бутировой кислоты Не выявлено (предел детектировании 0,012) Содержание молочнойЧисло дрожжей Содержание пропионовой кислотыСуммарное содержание витамина СНе выявле но предел(предел леТ ЕКТНР ОБЕ ннясодержание фолиевой кислоты .Значение рн Амнокнслотиый состав аминокислоты в 100 г оораэца(цистина метод окисления неднуревьиной кислотой, триптофан анализ с помощью микроорганизмов)Бесклеточнея стерильная недосадоч иен жидкость может быть использована в качестве дерматолотического лекарственного аппарата и без концентрирования, Однако предпочтительно концентрировать бееклеточную стерильную надосадочную жидкость. Кроме того,возможно применение концентрата с высокой степенью концентрирования, превышающей 25, или сухого продук 0,09та. Подобный концентрат, имеющий высокую степень концентрации илив качестве дерматолотичесного лекарственного препзрате Кроме того,Дерматологический препарат может быть получен смешиванием подобного концентрата, сильного концентрата или сухого продукта с креном, маэевой основой или дРУгим носителем. Результаты испытания на токсичность с использованием куриного эмбриона показывают, бескпеточныи стерильный концентрат (степень концентрировання 4) токсичностью не обпадает. Результаты кожной аллергической пробы на теле человека н про бы нанепрерывное раздражение кожичеловека показывают, что концентрат совершенно нетоксичен для кожи человеке. Результаты пробы на раздражение слизистой оболочки глазакролика показывают, что концентрат не является раздражителем совсем. Результаты антибиотическои пробы показывают ято концентрат не содержит антибиотических веществ. Дерматологический препарат оказыувает лечебный эффект в отношении кожньш пятен, потрескавшейся кожи,контактных дерматитов и обожженой кожи.Проба на излечение кожных пятен. Отбирают 621 женщин, ииеюшн кож ные пятне на пице,за исключениемпечени или гинекологические нарушеиия, а также берененнъш женщин, поступивших е Дерматологические госпитали для излечения кожных пятен. После прошваниялице кожные поры открывают вовдеиствием озона и параина область нахождения пятен наносят марлю, пропитанную концентратом степень концентрирования 2)-бесклеточ-. нон надосадочной жидкости. Нанесенную марлю покрывают лентой пленки марки Звгеп-Икар и производят облучеине инфракрасным лучами для улучшения проникновения концентрата в кожу. Зту.обработку проводят раз в неделю и продолжают в течение 3 мес. Обнаружено,что состояние сильно-упучшнлось у 363 женщин С 58,й 2) состояние сравнительно Улучшпось у 122 жен щин (19,82), никакого улучшения у 133 женщин (214 Х), состояние ухудпилось у одной женщмны (о 0 т) и контактный дерматит возник у остальним двун пеищн (О 032). Контактныйдерматит, предположительно вызван причинами, не связанными с данным лечением. ДОЛЯ ПЗЦНЕНТОК, ДЛЯ КОТО рьщ наблюдается значительное илнунеренное улучшение, составляет 802. Кроме того, у 602 из 365 женщин, у которык СОСТОЯННЗ СУЩЕСТВЕННО УПУЧШП лось, пятна на коже исчезли полностью.Проба на излечение трещин кожи и мелких морщинок, Для банной пробы отбирают 962 женшин из числа поступивших я дерматологические госпитали (150 женшйъ в возрасте 25-30 лет, 218 женщин в возрасте 3035,лет,. 2 ч 8 женщн в возрасте 35-дО лет, 172 женщины в возрасте 40-50 лет Н 17 д женщины в возрасте свыше дБ лет). После промывания кожи лица поры-кожи открываются озоном и паром, не кожу лица плотно накладывают марлю, пропитанную концентратом (степень концентрирования 2) бесклеточнои надосвдочнои жидкости и марлю покрывают лентой из пленки Эатап-Икар. Облучение инфракрасным лучами проводят в течение 15-20 мин для улучшения проникания концентрата в кожу. Обнаружено, что после одной обработки потрескавшаяся кожа значительно улучшилась у 698 ненщин(732), сравнительно улучшалась у женщин (162), состояние не изгнилое 1- у 72 женщин (т)и состояние не ухудшилось ни у однон из женщин,-остается 36 женщин,(42). чнтвая тот факт, что растрес кивание кожи развивается в конечном счете в мелкие морщинки, можно считать, что концентрат, являющийся эффективным с точки зрения лечения растрескивания кожи, оказывает профилактический эффект, препятствуя образованию мелких морщинок.Проба на лечебный эффект в отношении контактных дерматитов.Выбрана женщина, 21 год, страдающая сыпью и жжением на веках обоик глаз, возникающими на следующие день после смены теней для век фирме А на тени для век фирмы Б,диагноз - контактный дерматит. дериатологом на пораженные участки нанесена марля, пропитанная концентратом (степень концентрирования 2) бескпеточнои надосадочной жидкости. Не использовалось никаких стероид