Способ получения производного ( 3 Н) – имидазо – / 5 , 1- а / – 1, 2, 3, 5 – тетразин – 4 – она

изобретение относится к способ получения нового производного ЗВимидазо-5,1-а-12,35-тетразиндона общей формулыгде Кй представляет собой метильную,2-хлорэтипьную или 2 бромзтильную группу, а К представляет собой кар 6 амоилъную метилкарбамоильную или Ш диметилкарбамоильную группу, обладающего противоопухолевой активностью.Цель изобретения - получение новым производным тетразииа обладающих новым спектром биологических свойств.темноте при температуре окружающейсреды в течение 21 дня. Затем реакционную смесъ разбавляют безводнмдиэтиловым эфиром и отфильтровывают. Остаток быстро промывают безводнымметанолом, затем безводным диэтиловм эфиром и высушивают на воздухе,в темноте при комнатной температурес получением 8-карбамоил-3-метнл 3 н-мидазо 5,11,2,35 тетразии- Д-она в виде светло-коричневого мнкрокристаллического твердого вещества (198 мг) с т.пл. 210 С (с выделением газа и потемнением в диапазоне температур 160-210 С).4(5)диазоимидазол-5(4)карбоксамид (300 мг) суспенднруют в безводном дихлорметане (10 мл) и добавляют 2-хлорзтнлизоцианат (1,О мл)ъ Затем реакционную смесь перемешивают в темноте при комнатной температуре в течение 30 дн. Полученную таким образом суспензию кремового цвета отфильтровывают, остаток проныаютбезводньм диэтиловьм эфиром н высушивают на воздУХе в емнотес получением В-карбамоил-3-(2-хлорэтил)- . 3 нНННдаэо-5.19-12,3,5-тетразин-4-она (483 мг) в виде порошка кремового цвета с т.пл. 158 С (с сильным разложением). Элементный анализ.повторением указанной методижи получают также 8 карбамоил-3(2 хлорэтил)ЗН-имидазо-51-а 1,2,3,5 тетразин-6-он в другой полиморфной форме с т.пл. 164-65 С (с раз ложением). П р н м е р 3. Соединение А.Суспензип д(5)-диазонмидазол-5(4) карбоксамида (137 г) в этилацетате (20 мл) обрабатывают метилизоциа натом (7,0 г) и перемешивают в закрытом сосуде в темноте при комнатной температуре в течение 3 нед. Получеиное твердое вещество отфильтровы-. вают и промывают диэтиловым эфиром с получением 8-карбамоил-3-метил 3 Нимндазо-51-1235-тетразин-4 она (19 г) в виде твердого вещества- зовыделением). это вещество перекристаллизовывают из растворителей трех систем с полу чением трех различным продуктов, каж дый из которых имеет слабое отличие в ИК-спектрах. Вероятно все три продукта были полиморфными формами Вкарбамоил-3-метил-ЗНимидазо-5,1-81,235-тетразнн-4-она(1) Бесцветные иглы получены из смеси ацетон - вода (31 по объему),чиж, змо, 3205, пзо, 1758 и 1678 см т.пл. 212 С (с газовыделением).(11) Белые микрокристалы получены из снеси ацетон вода (1 З по объе-А му),9 3430, з 2 оо 1740 и 1675 см,т.пл. 210 С (с газовыделением).(111) Гранулированное твердое вещество получено из горячей воды Ч,с 3450, 3380, 3200, 1742, 1688 и 1640 см, т.пл. 215 С (с газовыделением, потемнение при 210 С).(30 мл) обрабатывают 2-хлорэтил-изоцианатом (3,3 мл) и смесъ перемешивают при комнатной температуре.в течение 6 ди. Затем реакционную смесь разбавляют диэтиловым эфиром и получающееся твердое вещество отфильтровывают с получением 8-карбамоил 3(2-хлорэтил) - ЗЪП-гшидазо 5 1-а-. 1,2,35-тетраэин-4-она (1,6 г) в виде бесцветного твердого вещества с т.пл. 164 т 165 С (с разложением).- карбоксамида (5,0 г) в смеси дихлор метаиа (158 мл) и Ц-метилпирролид 2 она (8,3 мл) обрабатывают 2-хлорэтилНЗОЦИЗНЗТОЙ (157 МЛ) и смесь перемешивают в темноте при комнатной температуре в течение 14 дн. Затем реакционную смесь разбавляют безводнм диэтиловым эфиром и получающееся твердое вещество отфильтровывают и промывают диэтиловым эфиром с получением 8-карбаМ 0 нл-3-(2 хлорэтил) 3 Н-мидазо 5,1 т 5 т 1,2,35 тетразин 4-она (6,3 г) в виде твердого вешества пурпурного оттенка с т.пл. 164165 С (с разложением). Элементный вналиад(2175 мл) обрабатывают 2 хлорэтилизоцианатом (д 78,5 мл) и перемешивают при 30 С в темноте в те чение 2 дн. Затем смесь отфильтъ ровывают с полученем 8-карбамоил 3ТВЕВДОГО вещества ПСРСНКОВОГО ЦВЕТЕи Нметилпирролид 20 на (3,5 мл) об рабатывают метилизоцнанатом (7,О мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 4 нед. Смесь разбавляют диэтиловым эфиром и получающееся твердое вещество отфильтровывают с получением 8 ткарбамоил-3-метил-3 Нт нмидазо 5 1-1 -1, 23,5 ттетразии-4 оиа (2,38 г) в виде твердого вещества бледнопурпурного цвета с т.пл. 2 О 22 О 3 С (с разложением).Попиморфная форма 8 карбамоилт 3 метил 3 Н 2 иидазо 5,1 аа 1,2,3,5 тетразинт тона получена путем раст уворения его в ацетонтриле, фильтрования, концентрирования фильтратадосуха и растирания полученного ост татка с диэтиловым эфиром. Продукт получают в виде твердого вещества ораневой окраски с т.пл. 2 О 0 ССпектр ЯМР этого соединения в дич метилсульфоксидетпб идентичен спектру указанного бледно-пурпурного твердого вещества, но его иКспектр (квг диск) показал некоторое различие.П р и м е р 8. Соединение В. Перемешиваемый раствор нитрата натрия(064 г) в воде (д,6 мл) охлат ддают до 51 ОС и при этой темпера туре по каплям обрабатывают раствором 5-амино 4 метнлкар 6 амоилимидаэот ла (1,00 г) в водном растворе уксуст ной кислоты (1 Н, 14,3 мл) в течение. 5 мин. Перемешивание продолжают при 510 С в течение 5 мин. Затем темиоткрасый раствор экстрагируют этилацетатом (ЬКЗБ мл) и объединенные экс тракты высушиввют над сульфатом магния. получающийся раствор содержит сырой 4(5)-диазо-5(4)метилкарбамо илиидазол , который нестабилен и сразу же использован на следующей стадии без дополнтелъной очистки. Раствор 4(5)-диазо-5(4)тметилкарт бамоилимидазола в этилацетата, попученный как описано выше, обрабатывают 2 хлорэтилизоцианатом (д,3 мл).и оставляют стоятьв темноте в тече 3,26ние 1 дня. Затем раствор выпаривают при д 0 С/0 мм рт.ст. и остаток ж перетирают с петролейнм эфиром(т.кип. 40-60 С) с получением оранжевой смолы (д,23 г). Эту смолу обрабатывают этилацетатом (50 мл) н отфипьтровывают, фильтрат.вьшаривают при 40 С/10 мм рт.ст. с получением ораневой смолы (2,9 д г). Эту смолу очищают колоночной хроматографией при среднем давлении на силикагеле,элюируя смесью этилацетата и ацето иитрила (д по объему) с получением(О 8 г) в виде твердого вещества пурпурного цвета с т.пл. 120-22 СРаствор 4(5)-диазо-5(д)-дине - тикарбамоилиидазола (59 г) в сухом зтилацетате (57 мл) обраба тывают 2-хлорзтилнзоцнанатом(6,3 б г) н перемешивают при комнатной темпера туре в темноте в течение 24 ч. . Эатем раствор выпаривают в вакууме при 35 С н в коне при 0,1 м рт.ст. для удаления избытка 2-хлорэтнлизоциаиата. Остаточную жидкость очищают колоночной хроматографией при среднем давлении на силикагеле, элюнруя смесью этилацетатацетоинтршх (д по объему) с получением 3(2-хлорзпкл)8 диметнлкарбамоихт- ВН Чшидазо 5 1 д-1,2,3-тетрази -она (0,82 г)Ь виде бесцветным кристаллов с(Д мл) обрабатывают 2-бромэтилнзоцианатом (45 мл) и смесь перемешиваютв темноте при комнатной температуре в течение 2 дн. Реакционную смесьзатем разбавляютбеэводным диэтиловым эфиром и получающееся твердое вещество отфильтровывают н промывают безводным диэтиловьм эфиром с получением 3-(26 ромэтил)-8 карбамоил-ЗН нмидазо-5,1-8-1,2,35-тетразнн-4 она (7 г) в виде бесцветного твердого вещества с т.пл. 156-157 С(1) Однородную смесь 5-ннтроимидазол-д-карбоновой кислоты (2 О г) нпентахлорнда фосфора (267 г) перемешивают и нагревают на масляной бане при 20 С в течение ч. Получающуюся желтую суспензию выпаривают при 60 С/0,1 мм рт.ст. в течение 30 мин с получением 1,6-динтв ро-БН, 0 Н-днимидазо (5-а 1,5-б)пнразнн-5,10-диона (9 О г)в виде желтого твердого вещества с т.пл. 249-251 С (с разложением). 4,.д (КВ диск) 1750 см ш/е(25 мас.1 60 мл) охлаждают до 0-5 С и обрабатывают порциями при перемешивании 1,6-дииитро-БН,-10 Н-днммндаво (5 а 5 -о)пиразин-5, 10-дионом (6,О г) при той же температуре. получающийся пурпурый раствор перемешивают в течение 2 ч. Раствор выпаривают при 50 С/10 мм рт.ст. и затем подкисляют обработкой концентрированной соляной кислотой с полученем оранжевого раствора. Этот раствор экс.трагируют этилацетатом (7 д 2 О 0 мл), объединенные экстракты сушат над сульфатом магния и выпаривают с полученнем твердого вещества желтого цвета(6,6 г). Это твердое вещество перетирают с толуолом (50 мл) и затем перекристаллизовывают из этилацетата с получением 5(4)-нитро-4(5)диметилкар бамоилимидазола (253 г) в виде жел-. тых кристаллов с т.пл. 193-95 С.сухом диметилформамиде (32 мл) обрабатывают окисью платины (0,32 г)и встряхивают в атмосфере водорода при атмосферном давлении и комнатной температуре. После 3 ч поглощение водорода завершено (710 мл). Смесьотфильтровывают через диатомит. Тент нокоричневый фильтрат выпаривают(1,75 г) в виде темнокоричневого кристаллического вещества с т.пль ,1791 в 2 с 4 М, (кв диск) к 595 см,ЯМР в диметилсульфоксидеВ сингле.ты при 3,2 и 7,08, которое еще со-ж держит примесь коллоидальной плати ны и которое используют в следующей стадии дополнительной очистки.(Н) Перемешишаемый раствор нитрата натрия (0,79 5) в воде (5,7 мл) окла ждают до 5-10 С и обрабатывают, по каплям, при этой температуре раствором 5(4)амнно 4(5)-диетипкарбамоилт имидазола (1,75 г) в водной уксусной кислоте (1 М, 17,6 мл) в течение Ь 5 минПолучающийся.раствор экстра . гируют этилацетатом (4340 мл), объег диненние экстракты высушивают над сульфатом магния и выпаривают при 30 С/10 мм рт.ст. с получением 4(5)диазо 5(4)-диметилкарбамоилнмндазола (159 г) в виде ораневых кристаллов с т.пл. 10 т 03 С (с раэт ложением).(А, 1, С, П, Н) против лимфомы типа ТЪХ 5, имплантиррзанной на мшах,иллюстрируется табл.1.Клетки 10 опухоли вида Ь 2 О имплантировали виутрибрпшинно в мышей БОГ, в 0 день. Нъшей обрабатывали в первый день внутрибрюшмннын введе нием соединения С, растворенного в 02 ном днметилсулъфоксиде в арахисовом масле (0, мл), а затем как указано в табл.2.Клетки 10 опухоли вида Р 388 имплантировали внутрибрюшмншо в мышей ВОР. в О день. Затем мышейобрабатывали соединением С по указанной методике.Способ получения производного 3 Нимидаэо 5 а 2,35 ттетра энн-4-она общей формуыЫ 4 д (43 Т 2 Ч 2 где К, имеет указание значения,подвергают взамодействию при темпе ратуре от комнатной до 30 С и вотсутствии света с изоцианатом общей