Способ получения производных 5-дезокси -5-фторцитидина

Изобретение относится к способу получения новых производных 5-Фторцитндина именно 5 деапкси-5 Фтор цнтнлина общей формулыпан пдпес/ 10 ОН где К, Кг и из независимо друг отС алкенил, бензин, атенфенил. Фенип, воножно замощенный ЗТОМОН ХЛООЗ ИЛИ ФТОПВ, метипьной группой, одной, двуМЯ ИПИ тремя метоксигруппани, нитрггруппой ацетоксигруппой иометильной группой, или Ед-фенилвинип 3-индолилметил пиридил ФУРИЛ, Тненип нафтил,пнперонил нитрофурилР 6 - алкип 61-04, при условии,что один из Н, К и На не является водородомобпадающих противоопухолевыни свойствами.Известен ряд производных 5-фторцитидина (1-5).обладающих например 5-дезокси-5-Фторуоилин, противоопухолевыми свойствами.Цель изобретения - получение новых производных 5-фторцитидина обладающих преимуществами 9 Фармакологинескон отношении псред известными структурными аналогами подобного действия.Цель достигается описываемым способом, заключающимся в тон, что соединение общей-формулы6 где Н 7 и Ед - защитная группа,подвергают взаимодействию С соедИНВ нием общей ФормулыНа Кон, где На - атпм галпгпна, 29 - рлликлп 850 или Е 6 где Н 5.н На имеют указанные значения, с поспспутцимЛ). В 1,5 мл лнмстнпфорнаннда растворяют 2 д 5 мг 5-лезои 6 и-5-фторцнтидина 35 д мг трст-рутипдиметилсилил-хлорида и 28 д мг имидазопа. Смесь поренешипзпт о тспепне 8 ц при комнатной температура р атмосфере азота. Затон реакционную смесь ВЫПИВЕЮТ Б ВОДУ Н 3 КС 7 ОЭГНрУЮТ ЭТНП ацетгтон. Экстракт промывают водой,высушивают над безводным сульфатом натрия н концентрируют при пониженном давлении, попуцая д 3 мг 2,3-бис-О-(трет 6 утиплиметилсипил)-5 дезокси-5-Фторцитидина (масс-спектроскопия 73 (н.). Раствор д 90 нг 5-де 3 окси 5 фторцитидина, ДЗ мг моногидрата паратолуолсульфоновой кислоты н ЭСЦ мкл 2,2-диметоксипропана а 10 нп ацетона перемешивают в течение 1,5 ч при коннатной температуре. К раствору добавляют ЭОП мг гидрокарбоната натрия И смесь перемешивают в Течение д ч при комнатной температуре. выпадающий осадок отфильтроаываот и промывают ацетоном Объединенный фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматогпафисй над снпикпгслью днхппрметпн метанол), чтобы получить 570 мг 5-леэокси-5-фтор-23-О-изопропипидонцитидина, масс-спектроскопия 286 (НН) т, пл.пикрата Б 9-171 С.П р и м е р 1. А. В 150 мл дихлорнетана растворяют 9 д 6 г 23-бис-0(трет-бутнлдинетилсилип-5-дезокси-5-фторцитидина полученного по навестнону примеру (А), 3.д 8 г ангидрида н-масляной кислоты в 2.93 г й-динетиламинолиридина. Смесь перемешивают в течение ночи затеи промывают водой, высушивают над безвол 2472 5ным сульфатом натрия и концентриру ют при пониженном давлении, чтобы получить 9,75 г Н-бутирил-23-бис-О(третбутилдиметилсилил)-5 -деаокси-5-Фторцитидина масс-спектроскопияБ. Продукт реакции по примеру 1(А) 975 г) растворяют в 50 мл тетрагид рофурана содержащего ВО нмоль фтористого тетрабутиламмония. Реакционную смесь перемешивают в течение 1,5 ч при комнатной температуре. После удаления растворителя при пониженном давлении остаток очищают с помощью колоночной хроматографии над сипикагелью (этилацетат метанол), за которой следует перекристаллизация из метанола, чтобы получить д 5 г Н 4-бутирил-5-дезокси-5-фторцитидина,т. пл. 156-157 С, масс-спектроскопия 316 (мн).Спелущцие соединения были получены по способу, аналогичному примеру 1 (табл.1).П р и м е р д. А. В 150 мл сухого пиридина растворяют 1 д 1 Э г 23-бнс-0-(трет-бутилдиметилсилил)-5-дезокси-5-оторцитидина, полученного по известному лримеру(А). К раствору добавляют по каплям при перемешивании 38 д г хлооангидрида н-масляной кислоты. Реакционную смесь перемешивают в течение ночи.Пиридин удаляют при пониженном давлении и остаток разделяют на части между водой изтилацетатом. Этилацетатный слой промывают водой, высушивают над безводным сульфатом натрия И концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают с помощью колоночной хроматографии над сипикагелью н-гексан-этилацетат), чтобы получить Ы-Бутирил-2 ЗЪ-бис-0-(трет-бутилдииетилсилил 3-5-дезокси-5-ФторцитидимБ. Продукт реакции по примеру д(А) обрабатывают по способу аналогично-му примеру 1 (Б), чтобы получить бес цветные кристаллы Н-бутирил-5Следующие соединения получают по способу, аналогичному примеру дП 9 И М в 9 3. В 20 мл 752-ного водного диоксина растворив 735 мг 5 д 030 КСИ 5 Фторцитидинв и Вд г ангидрида масляной кислоты. Смесьперемешивают в течение 18 ч при комнатной температуре. После.упвления растворнтепл остаток очищают вс помощью колоночной хропатограени над силикагелем чтобы получить бес цветные кристаллы д 20 мг Н ьбутмрил-5-деаокси-5-Фторцитидина т. пл. 156-т 57 С, масс-спектроскопияП р и м е р дд. А. В 50 мл сухого пиридина растворяют д 9 г 5-дезокси-5 Фторцитидина и 5,58 мл хлористого тринетилсилила Смесь перемешивают в течение 2 ч. К реакционной снеси добавляют 2,09 мл этилового эфира клортиомурааьиной кислоты. После перемешивания сноси в течение 2,5 ч пнридин выпаривают при пониженном давлении. Остаток разделяют затем на части между водой и этилацетатом, Органический спой промыплют полой, пыиутппдют НцЦ ПР 3 пОд Ным сульфатпм плтрил и концгнтрируют при пониженном давлении. К остатку добавляют 5 г лимонной кислоты и 30 мл метанола. Смесь перемешивают в течение 1 ч. После удаления растворителя при пониженном давлении остаток очищают с помощью колоночной хроматографии над силиклгелью (метанол-дихпормотлн) за который следует перекристаллизация из лихлормстема, чтобы получить 2,66 г 5-дезокси-Ы- (этилтио)-карбоим 3-5-Фторцитидина т. пл. 138-13 ЭС (ра 3 п),масс-спектроскопия 33 д (нН)Б. К перемешиваемому раствору 1 г 5-дезокси-5-Фтор-27,3-О-изопропилиденцитидииа полученного по известному примеру, в В мл пиридина добавляют при 0 С 365 мкл этилового эфира хлортионуравьииой кислоты, а затем смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и остаток разделяют на части между этилацетатом и водой. Органический слой промывают раствором гидрокарбоната натрия и водой И высушивают над безводным сульФатом натрия. После удаления раствоОИТВЛЯ 0 сТаток очищают с помощью коПОНОЧНПЙ хвонатогпфни над силикагельюВ. К раствору продукта реакции по припеву дд (Б) (150 мг) в вот-нон вод 2472 7нон этаноле добавляют Даузкс 50 (Н)при 50-60 С с перемешиванием в тече.е 0 ц, дауэкс 50 отфипьтровывают и Фильтрат концентрируютдосуха при понженном давлении. Остаток очищают с помощью колоночной хроматографии над силикагелью ССНСРЭ - ацетон), за которой следует перекристаллизация из дихлорнетана, чтобы получить 5-дезоксин(этилтио)-карбонил-5-Фторцитидинт. ПЛ. 133139 С (0 азл.3 масс-спектроскопия 330 (НН).Следующие соединения получают поП В н м е р ЦВ. Раствор 0,02 г пиперонировой кислоты в 5 мл сухого ацетонитрипа, содержащего 0,36 мл триэтиланина, обрабатывают 037 мл диэтилового эфира хлорфосфорной киспоты в течение 1 ц, К реакционной смеси добавляют 2,3-бис-0-1 трет-дутипдиНетиПсИПИЛ)5 дЕ 30 КсИ-Бтфтор цитидина т,0 г), полученного по известному примеру (0), 0,36 мл триэтиламинан 0,05 г д-динетиламнНопиридина. После перемешивания смеси в течение 12 ч при комнатной температуре, ацетонитрил выпаривают при пониженном давлении. Остаток разделяют на части между водой и диэтиловын эфиром. Органический слой промывают водой, высушивают над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Полученный порошок растворяют в 6,3 мл тетрагидрофурана, содержащего 1,65 г фтористого тетрабутипаммония и реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч. После удаления растворители при пониженном давлении остаток очищают с помощью колоночной хроматографии над силикагепен (изопрвпанол-дихлорне ТЗНТ. эакоторой следует перекристаллизация из этилацетата, чтобы получить 0,5 г 5-деаокси-5-Фтор-н 4 Ъпилеронилоилцитидина т.пл. 12 125 С, масс-спектроскопия 39 (МН).СледУЮщее соединение получают поп В И М В О 50. В 5 л сухого пиридина растворяют 0,355 г 3-Фуранкарбоновойкиспотм и 0,96 г 2,д,в-тризопропипбенаопсульфонила хлористого. смесь перемешивают в течене 1 ч, К сноси добавляют 1,0 г 2,3-6 ис-0 8-(трет-бутилдинетилсилил 3-5 дезоксн-5-Фторцитидина, полученного по известному примеру (Д), н 0,80 г д-динетиламинопиридннл. После перемешивания смеси в точение 12 ч при комнатной температуре, пиридин ВЫ ларивают при пониженном давлении. тен остаток обрабатывают, как в примере ЦВ, чтобы попучпть,0,55 г 5-дезокси-5 ФТор 4(3 ФУО 0 ИП)ЦИТИдИ на, т.пл, 173-7 дС (этанол), массспектроскопип 3 д 0 (нн).Следующие соединения получают по способу, аналогичному в примере 50П р и м е р 57. А, К перемешиваемому раствоОУ д,5 г 5-дозокси-5 фторуридиНа в 150 мл сухого пиридина добавляют по капллм 2 д 5 мп хлористого Бензоила в течение 10 мин при 0 С и смесь перемешивают в течение 5 ч при комнатной томпературс. Лосле удаления пиридина при поштнптптпм ЦПВЛСНИИ ОСТВТОК ПЭЗДДДППЮТ ПЛ ЧЗСТИ НСЖ ду водой и этилацетатом. Органический спой промывают насыщенным раСТВОООН ГИДПОКЗРБОНЗГЗ НЗТОИЯ Н ВО дой, внсушивают над Сезеодчым сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток перекристаллизовыпают из этмпцетпта вместе с н-гексанон, чтобы получить 35,9 г 2 З-ди-0-бенэоил-5-двзокси-5-Фторуридина масс-спектроскопия 55 (ннЧ.Б. К смеси 0,2 мл Ыметипинидазола и 0,23 мл-хлористого Фосфорила в 20 мл ацетонитрила добавляют 500 мг 2.3 дН-О-бенаонл-5-диэокси-5-фторуридина, полученного при 0 С. После перемешивания реакционной снеси в течение 1,5 ч при комнатной температуре к снеси добавляют при 0 С 2,5 мл 23 ной гидроокиси аммоНИЯ, а ЗаТеН СМЕСЬ ПЕРЕНСШНЕЗЮТ В ТЕ цение 1 ч при комнатной температуре. Ацетонитрип и аммиак удаляют при пониженном давлении. Остаток подкисляют с помощью 1 нраствора НС 1, а затем экстрагируют этилацетатом. Органический спой промывают водой, высушивают над безводным сульоатом натОНН И концентрируют при пониженном давлении. Остаток лерекристалли 3 овнвар из этилацетата, чтобы получить 155 мг 2,3-ди-О-бенэоип-5-дезокСи-5-Фторцитидинн, т. пл. 1929 дС,Масс-спектроскопии 76 (нннл).п р и м е р 58. А, К охлаждаемот ну льдом уксуснону ангидриду (0,57 мл) добавляют по каплям 286 мкл 99-ной муравьиной кислоты. Раствоэ перемет шивают в течение 15 мин при ПС и в течение 50 мин при 50 С, а затем охлаждают до 0 С. К раствору добавляют д 73 мг 1,3-бис-0-(трет-Еутипдиметилсилип)-5 дезокси 5-Фтооцитидит на, полученного по известному примеру (А), в 5 мл сухого пиридина при 0 С. Реакционную смесь перемешивают в течение 10 мим при 0 С и в течение 26 ч при комнатной температуре. После удаления растворителя при пониженном давлении остаток разделяют на части между водой и этилацетатом. Пргапичоский спой промывают насыщенным раствором гидрокарбоната натрия и водой, а затем высушивают над безводным сульфатон натрия. этилацетат выпаривают при пониЖЕННОН ДЗВПЕНИИ И ОСТЗТОК ОЧИЩВЮТ С помощью колоночной хроматографии над силикагелью (нгексан-этилацетат),за которой-следует перекристаллизация из снеси н-гексана и этилацетата,чтобы получить 1 дд мг 23-бис-0-(третбутилдиметилсилил)-5-дезокси-5 фтор-НФориилцитидина, т, пл. 1 В 8 С (разп.), масс-спектроскопия 502 (нн).Б. Продукт реакции по примеру 58(А) обрабатывают по способу, аналогичному в примере 1 (Б), чтобы по пучить аморфный порошок 5-дезокси 5-фтор-Н-Формилцитидина, массспектроскопия 27 д (НН), П р и н е р 59. В 5 мл сухого пиридина растворяют 2 д 5 мг 5 дезокСИ 5 ФТоРЦнтидина. К раствору добавляют 130 мкл хлористого бенаоила с леремешиванием при 0 С. Реакционную сесь перемешивают в точение 1 ч при О С. После удаления растворителя при пониженном давлении остаток очищают с помощью колоночной хроматографии Над сипикагелью (дихпорметан-метанол),за которой следует перекристалпиза цил из этилацетата, чтобы получить 51 мг бесцветных кристаллов 3-0 бенвоин-5-леэокси-5-фторцитидина т.пл.П 0 И М е р 60, В 0,5 мл сухого Пиоидинв растворяют 35 мг продуктаРеакции по примеру 59. К раствору добавляют 13,8 мкл хлористого триме 10тилсилила. После перемешивания в течение 2 ч при комнатной температуре добавляют 2,Б мкл хлористого бензот ила. Реакциочную смесь перемешивают в течение 1 ч. После удаления пастворителя при пониженном давлении остаток растворяют в 0,5 мл сухого метанола. К раствору добавляют 15 мг карбоната калия и реакционную смесь перемешивают в течение 30 мин при 0 С. После удаления растворителя при пониженном давлении остаток разделяют на части между водой и этилацетатом. Органический слой высушивают над бе 3 аоднымсупьфатон магния И КОНЦЕНТВИВУЮТ при ПОНИМСННОН лав пении. Остаток очищают с помощью колоночной хроматографии пал снпит каголью (дцклормстпиметдинп) чтобы Получить 15 мг аморфного порошка Ы 4 У -О-дисензоил-5-дозокси-5 тфторцитиднна, масс-спектроскопия два (нн).П р и м е п 61. В 5 мл сухого пиридина растворяют 2 д 5 мг 5-леаомси-5-фторцитидина, ЧОП мкл хлорис того Бензоила и 122 мг д-диметиламинопиридина. После перемешивания в течение 3 ч при комнатной темПераТуре удаляют пиридин при пониженном давлении. Остаток разделяют на части между этилацетатом и водой. Этилацетатный слой высушивают над сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Остаток перекристалпмзовывают из метанола,чтобы получить 280 мг П,203-ОтПротивоопухолевые активности предлагаемых соединений представляются следующим образом.Противоопухолевое испытание против Саркомы 180.Клетки Саркомы 180 2 106 клеток) имплантируются подкожно мышам (20 32 Г) В Нулевой день. Соединения изобретения вводятся ежедневно.орально от первого дня по 7-й день включительно. Пилотные приносится в жертву на 1-й день и опухоли пырезаются и взвешиваются. Процент ингибирования роста опухоли, представленный в табл. 6, вычисляется по формуле