Способ получения производных дистамицина А или их гидрохлоридов

НАЦИОНАЛЬНОЕ ПАТЕНТНОЕ ВЕДОМСТВО РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН(73) Фармитапиа Карло Эрбв С.Р.П.(72) Зтторе Лаццари, Федерико Арканоне, Серджо Пенсо, Мария Антвниетта Верини и Ннкола Нонгелли (П)(54) сносов получения пгоизводньш ДИСТАНИЦМНА А ИЛИ И ГИДРОХЛ 0 РИ 1 ДОБ .(57) Изобретение касается гетероциклических веществ, в частности получения производных диетамицииа А и их гццрохлоридов общей ф-лы Цдшгдд-ЩОЪд Кд, даэирщинш или оксиранил А иогда вред СрСд-гапоидадткищ ко- торые обладают противоопухолевой и Тпротивовирусной активностью, что мо-жет быть использовано в медицине. Цель создание новьргактъшньш и маги нетоксичных иеществ указенного клее са. Съпнтез ведут реакцией замещенной иамъшокислоты или еехлорнгццрнда с- леннен целевого продукте либо ъгсвободном видепибо в виде гндрохпорг да. Новые соединения показьлзают зна- .чите.г 1 ьную эффектнвнооть при наложении с репродуктивной активностью патогенчйных вирусов и защиту клеток от внрус-получения новых производных днстани- .А радикал 0 когда один из Н, и Ед - водотд. адругой гьуппа соч-кд, в которойЦелью изобретенияявпяется разработка на основе известным методовспособа получения новым пронзводньшднстамицина А, обладающим ценными фармакологическими свойствами при низкой токсичности. . Прттмер 1 ВЧшпШН. Раствор 0,1 мл тризтиламнна в 1 мл диметилформамида (ДМФ) прибавляют в течение 5 мин к перемешиваемому раст-вору 0,41 г Н-деформндцнстамицина в 2,5.мл ДМФ при комнатной температуре В атмосфере азота. Через 15 мин малыми порциями прибавляют 0,27 г (ЫннтрозоЫметнлуреъщо)бензойной кислоты и 0,16 г дицнклогексилкарбодииида. Реакционную смесь 2 ч переме шнвают Ц прибавляют 25 мл этиловогоэфира. Твердьй продукт, собранный фильтроааннем, очиают колоночной хроматографией на силикагеле смесями этилацетата, метанола и уксусной кис,лоты, получают 0,175 г целевого сое динения т.пп 20520 С (с разложе-наем), из нзопропанола.Аналогично может бытьполучен Р-11-метил-4-/1-метип-д-/-метил-44-Н-/2 хлорэтнлтЫ-нитрозоуреицобензол/-1 карбоксамндо-пиррол 2 карбоксиамидо/пиррол-2-карбоксиамндо/пиррол 2-карбоксамидо/пропионамндн,-гидрохлорид, т.пл. 182 С (разложение).Вводят 4 г холодной окиси этилена В РЗСТОР 0,9 г метил-д-аминотнофеи 2 КаРбоксипата в 12,5 мл д 02 ной водной уксусной кислоты при 5 С при цен Ремешиванин. Смесь выдерживают всюночь при комнатной температуре в за папиной колбе, затем концентрируют до малого объема иразбавлиют 25 мл Воды- Прибавляют Твердыйоикарбонат натрия н смесь экстрагируютэтилдцед татом. При выпаривании органического растворителя получают 1,3 г метил/Ы,Ы-бис 2 оксиэтиламннотиофен-2 карбоксилата в виде светло-коричневого масла, которое затвердевает при стоянии, т.пл.ч 68-69 С (из смеси 6040 этилацетатгексан).РЗСТВОРЯЮТ 1,3 г бис-окснэтиламнНопронзводного в 1,96 мл оксимлорида фосфора и смесь кипятят с обратным холодильником в течение а 5 ниш, после выпаривания в вакууме темный остаток обрабатывают 7,75 мл концентрированной соляной-кислотыпри 10000 в течение 3 ч. Смесь охлаждают, прибавляют 21 мл холодной воды и экстрагируют получениыйраствор этилацетатом. После выпаривания органического растворителя и очистки твердого остатка хроматографией на колонке с силикагелем,элюируя смесью этилацетата и метанола, ПОЛУЧают 0,49 г.4-Н,Ы-бис 12-клорэтип/амимотиофен-2-карбоновой 011 стадия. Целевое соединение. Раствор 0,1 мл тризтиламина в 0,5 мл ДМФ прибавляют к растворурнда в 4,5 мл ДМФ при комнатной температуре в атмосфере азота.ЦСмесь обрабатывают 0,23 г д-Н,Нбис-/2-хлорэтиламииотиофен 2-карбо-5 новой кислоты и 0,77 г дицилогекснлкарбодиимида мальми порциями. Подученную в результате смесь перемешивают всю ночь, затем фильтруют и вьпа ривают досухав вакууме. Твердыйос таток очиают хроматографией на сипи5 кагеле, ИСПОЛЬЗУЯ в КЗЧЕСТВЕ ЭЛЮЕНТН смесь тэтилацетата и этанола (91 н 82 по объему). Получают 022 г цвлед вого соединения, т.пп. 199 ч 2 О 4 СшАналогично могут быть получены следующие соединениябоксамидо/пиррол 2 карбоксанидопропиоиамидингидрохлорид. Раствор 0,195 г бикарбоната натн рия в 3 мл воды прибавляют к охлажденному раствору 0,4 г деформилднстаыицина в 2 мл этанола. К этой смеси прибавляют по каплям раствор 0,32 г 4-Ы,Н-бнс 12-хлорэтил/аиинот бнзоипклорида в З мл бензолгь. Смесь перейешивают 3 3 при 5 С, а затем 12 ч при комнатной температуре.После выпаривания в вакууме получают твердый остаток, который хрома.тографируют на колонке с силиагелем элюирул смесями хлороформа и метана ла 9 и 73 по объему), получают 022 г целевого продукта, т.пл.295 САналогично получают следующие сосдинения .В таблице приедены данные п о 1 сд го по противоопухолевой актиъности относящиеся к соедниенийм 31-метил 4-11 ъметиптд-/1-метилд-4 Н,Н-бис/2 хлорэтипаминобензол 1 карбоксами допиррол 2 карбоксайцдопнррол 2 д карбоксамидо/пиррол 2-карбоксамидо/Н пропноианидиигидрохлорид (код РСЕ 24517) и В-/1 метил-д-/1-нетил-4/1 метил-44 Ниабисо/2 клорэтил/аиноцу 1 сго была оценена спомощью цитотокдимого на кпеткехфцр 1 пе 2 20 лей-д камни, 2-РАН устоййивык к лейкемии клетках иклетках Р 388 лейкемии а такие на клетках Нега. Клетки проис-1 ходили из опухолей путоиадаптит ровапись В культуре клеток. Клетки были использованы до десятого пасса ЖЯЦИТОТОКСНЧНОСТЬ ОПРЕДЕЛЕНВ ПУЙЪН н.подсчета выжитьш клеток через 4.4 после обработки н 48 ч роста на не содержащей лекарства среде. Для клег ток Нега-использован тест по ингибированн йолони.Процент роста клеток на обработанным культурах орааливаетсн с таковым для контроля Величины ЬВБО (доаыиноибирующне 501 диетойного роста по отношению к контролю) рассчитаны ПО РНВЪЩ ДОЗВ ОТВЕТ. поедлагаемые соеднщения такжепоч казали значительнуюэффективность-ноотью патогейныщвирусов и защиту клеток тканей от вирусньш инфекций. Так онипоказышаютактиность проти ДНКвирусов таким, как, напримергерпе-(например, герпес снмплек и герпес-зостер)РНКвирусов такнх как Ьиновирусы н аденовирусы ипрото Ьетровирусов Таких, как сРК 0 МаВНТ русы. - . т Вирусы герпес,-коксаки (сохзасойе) и респнраторнодсенцнтиальные бьши иопытаныв жидкой среде по СЛЕДУЮЩЕЙпения соединений от 200 до 1,5 мкг/мл распределены В дубликатак 0,мп/лунку в 96 лунках микроплат для культуры ткани. Сразу же добавляются клеточные суспензии (2-109 клеток/МП)3 аР 3 Ж 9 Н ные пршерна Бчодтсъввд вирус/клетку в 0, мл/лунку. После 3-5 дней ИН тсубациитцри 37 С в 52 ном СО КУЛЬТ вы клеток оценивают при наблюдении под.нкроскопом н определяют мини малную нмгнбирующую концентрацию, которая ОПРВДЕЛЙЕТ УЫЕНЬШЗННЗ ЦНТО патнческого эффекта по СРЗВНЕНИ С зараженными контролямиСпособ получения производньшдис тамицина А общей ФОРМУЛЫ. дгн СО то ынтнснгснд-сеынъ т СНд ПВ-5 ССалкил незамещенный или замощенный атомом галоида или группа -С 0 СН 1)гКдд где ш О, а К 4 н азирнднннп или оксиранил,С-Сд-алкил, замещен ный гало илом ,или и гидрохлоридов, о тл и ч а юдЩ н й с п тем, что соединение общей формулы нды д а - мн С 0 тЧЧН. СЪ 1-С 1 С индп, где п Н нмеетуказанные значения,подвергают взаимодействию с соединеч ниен общей формулыгде Хд гцдроксилнлн галоген К Ед-и А имеют указанные.эна ценил, спосЛедующнн вьщелениен.целевого продукта в свободном виде или в виде гидрохлорида