Способ получения Z- 2-циламино-3-монозамещенных пропеноатов

НАЦИОНАЛЬНОЕ ПАТЕНТНОЕ ВЕДОМСТВО ПРИ КАБИНЕТЕ МИНИСТРОВ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН. (54) (57) спосов получвния .22 Ацил АММН 03-МОНОЗАМЕЩЕНШЫХПРОПЕНОАТОВ общей формулы . 1 взх / И. С . 1 . . ЬСОЫЪ 1 С 00 Ня где К, водород ка - циклопропан, замещенны низ шил алкилом К, низший алкил, К ПАТЕНТУ о т ли ч а ю щ и й с я тем, что хлорангидрид кислоты общей форнуы(32) 24.07.78, 22.06.79 подвергают вэаинодействню со сложны(73) Мерк энд Ко Инк (08)где Кг и К, имеют указанные значения,в присутствии основания с последущими окислительным добавлением метоксида натрия и обработкой образующего ся промежуточногосоединения безвод ной хлористоводородной кислотой.Изобретеие относится к способу полученя новым соединений общейВ - циклопропан, замещении низши алкилом Кв - низший алкил,которые избирательно ингибируют метаболизм дипептидаэы.В 2-норлейцина В 80 мл диоксана по мещенной в 500 мл автоклав, охлаж денной на ледяной бане, медленно (с перемешиванием) добавляют 8 мл концентрированной Н,50. Охлаждая полученную смесь на ледяной бане, добавляют 80 мл жидкого изобутипена. Смеси дают возможность нагреться до коматной температуры и перемешивают ее под автогенным давлением при мерно в течение 23 ч. После того, как основную часть изобутилена выпускают нз автоклава слегка мутный раствор охлаждают на ледяной бане,а затем добавляют к охлажденной смеси 400 мл 1 н. паон н 500 мл Есдр. После встряхивания в отдельной во ронке происходит разделение слоев,.водную фракциюпромывают дополни тельны 100 млЕО . Раствор встряхивают с 150 мл 0,5 н. НС. кислую водную фракцию-обрабатывают2,5 н. Ыа 0 Н до достижения сильно ще лочной реакции, а затем встряхивают с 25 О мл Ес,о, раствор осушают .(Мв 5 Од) отфильтровывают и концентрируют на ротационном испарителе. После продолжительного вакуумрования под высоким вакуумом на паровойбане получают прозрачный бесцветныСтадия Б тет-бутиловый сложный эфир Ы-(2,2 диметилциклопропанкарбонил)тП 2-норлейцина. К раствору 8,98 г (48 ммоль) ТггГ-бутилового сложного эфира 02-норлейцина и 5,05 г (50 ммоль) триэтиламина в 100 мл.СН 2 С перемещиваемому на ледяной бане под осулающей трубкой, по каплям (в течение 75 мн) добавляют раствор 6,39 г (48 ммоль) 22-диетнлциклопропанкарбонилхлорида в 50 мл СН 2 С 22. Осаждение ЕЕЗМНС происходит в процессе добавления реактанта, особенно ближе к концу. По мере плавления льда смесь нагреваютдо комнатной температуры. Через 16 ч смесь встряхивают 200 мл 0,5 и. НС-СН 2 С 2, фракцию проывают дополнительно 20 О мл 0,5 н.НС затем 2-200 мл 0,5 н. Ыа 0 Н и окончательно - 200 мл Н 20-СН 2 Сд. Францию осушают М 3 З 04 обрабатывают активированны углем и отфильтровывают черезДЭЛИТ. ФИЛЬТРЭТ КОНЦЕНТРИРУЮТ на роТЗЦИОННОМ ИСПЗРИТВЛВ (ОКОНЧТеЙЬНОпод высоким вакуумом). Выход конеч ного продукта, представляющего собой .(21 гексан Е 0 Ас) показывает одно-пятно. ямт и ИК-спектры соответствуют соединению заданной структуры. После вызревания втеченме нескольких дней неиспользованную часть этого продукта кристаллиэуютК раствору 6,37 г (22,5 ммоль) чрет-бутилового сложного эфира Ы-(2,2-диметнлциклопропанкарбонил)-В 2-норлейцина в 35 мл.Есд 0, перемешваемому при комнатной температуре под атмосферой азота при отсутствии света, добавляют 2,69 мл (2,д 5 г,22,5 ммоль) тет-бутилх гипохлорита.Через 15 мин добавляют раствор метоксида натрия, полученный растворе нием 0,52 г (22,6 ммоль) натрия в 35 мл Ме 0 Н. Перемешивание продалают при комнатной температуре под атмосферой азота, при отсутствии света. Через 16,5 ч выавшмй в осадок хлористый натрий отфильтровывают. Фильтратразбавляют Есдо и последовательно промвают 3-50 мл0,5 н.нс, 50 мл насыенного На 2 СО 9и 2 т 5 О Мл воды. Е 2 О-фазу осушают над МЗЗО 4 и отфильтровывают. Фильтрат выпаривают на ротационном испарителе. Бледнее, золотисто-желтое масло (6,45 г) подвергают препаративной жидкостной хроматографии высокого давления, в результате чего отделяют и выделяют два диастереомет ра по 273 и 496 мг - ПМТбУТИл 2(2,2-диметипциклопропанкарбоксаммдо)-2-метоксигексаноата (соответствующие тпл. 114 т 1 в и 124-125,5 с) а также 1,97 г самостоятельного изомера 2 птбутил 2(2,2-диметилциклопропанкарбоксамидоЦ-2-гексаноата (бесцветное масло).-бутил 2-(2,2-диметилциклопропанкарбоксамидо)2-гексеноата в 10 мл-ЕсдО насыщенный безводным НС 1 выдерживают при комнатной температуре под осуштельной трубкой. Через 17 ч раствор выпаривают и оставшуюся массу растворяют в 10 мл насъпцеппого ЦаНС 03. Этот раствор промывают дополнительными 15 мл 0,5 н.НС затем высушивают (М 38 О 4) отфильтровываюти выпаривают, в результате чего получают вязкое масло, которое перекрнсталлизовывают из т 0 ПУола. Выход белых кристаллов составляет 0,32 г(472). Т.пл. 119-122 с, тех (41 толуол - Ас 0 Н) доказывает одно пятно. ЯМтспектр подтверждает образование практически чистого 2 изомера (приобработке аддукта метанола птбутил 2-(2,2-диметилциклопроланкарбоке амидо)-2-метоксигексеноата безводнмНС в среде Ес 20 в аналогичных условиях образуется тот же продукт).Результаты опыта 1 п у 1 сго. Используют 1 мл системы 50 дм МОПС буффера, рН 7,1 К нему добавляют 5 г свиного почечного фермента и такое количество исследуемого соединения что его конечная концентра ция составляет 0,1 мм. После 5 мин Атермостатирования при З 7 С добавляют такое количество ГДФ(глицилдегидро фенилаланин), что конечная концентрация его составляет 0,05 мМ. Систему вновь термостатируют при 32 С в течение 10 мин. Гидролиз ПДФ определяютпо изменению ее оптической плотностиво времени при 275 нм. Ингибированиефермента определяют присравнениис результатами контрольного опыта, про ВОДИМОГО ПРИ ОТСУТСТВИИ ИНГИБИТОРЗ, И ПЫРЗЖЦЮТ 13 ПРОЦЕНТЗХ ИНГИбНрОВаНиЯо К представляет собой величину, показывающую концентрацию ингибитора, необходимую для достижения 502 инги бирования фермента. Это расчетная величина, получаемая в результате нескольких проб, проводимхтак, какП описано выше, при концентрациях, приводящих к ингибнрованию ниже или выше точки 50 ингибирования. Полученные результаты представлены в табли це.