Штамм Talaromyces purpurogenus F-162 – продуцент красного пигмента

(51) 61 39/40 (2006.01) МИНИСТЕРСТВО ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ М-17-14/, являющегося продуцентом красного пигмента. ШтаммМ-17-14/ выделен из зерна пшеницы, Акмолинской области в 2014 г. Культивирован на плотной питательной среде Чапека при температуре 25-27 С в течение 710 дней. Идентифицирован с помощью молекулярно-генетического метода основанного на определении нуклеотидной последовательности в- и -областях ДНК микромицетов по методу, Штамм-17-14/ депонирован в Коллекции микроорганизмов Республиканского государственного предприятия Научноисследовательский институт проблем биологической безопасности Комитета науки Министерства образования и науки РК под-1714/. ШтаммМ-17-14/ является продуцентом красного пигмента.(72) Нечай Наталья Леонидовна Аубакирова Дина Сериковна Ремеле Валентина Ванифатьевна Махамбетова Рысай Исимгуловна Каримова Лилия Сериковна(73) Товарищество с ограниченной ответственностью Казахский научноисследовательский институт переработки сельскохозяйственной продукции(57) Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано в микробиологической,медицинской,пищевой промышленности и в сельском хозяйстве. Технической задачей изобретения является получение штамма гриба 30763 Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано в микробиологической,медицинской, пищевой промышленности и в сельском хозяйстве. Увеличение спроса на природные красители представляет практический интерес в различных отраслях. Наиболее дефицитными являются соединения, обеспечивающие пищевым продуктам и изделиям красный, розовый и фиолетовый оттенки. Широко распространены различные микробные пигменты, которые, в отличие от высших растений,культивируются в ферментерах в любое время года на недорогих субстратах, часто являющихся отходами отраслей народного хозяйства. По литературным данным, некоторые виды(Т. , Т. , Т., промышленно интересен, так как производит внеклеточные ферменты и красные пигменты. Известен продуцент красного пигмента плесневый гриб, который широко используется в Южном Китае, Японии и Юго-Восточной Азии при производстве красного рисового вина, красного соевого сыра и Анка(красного риса). Однако, некоторые образцы ферментированного риса штаммами , как было установлено,содержали микотоксины цитринин и мевинолин. Выделение этих микотоксинов ограничивает использованиедля промышленных целей. Напротив,цитринин не был обнаружен у видов грибов рода,что может быть хорошей альтернативой для производства красного пигмента. Известны штаммы грибаМ 180 - продуцент красного пигмента- цветового аналога шток розы ( 1708820 МКИ 5 С 09 В 61/00,С 121/14 Б.И.4 1992 г.) и штамм грибаВКМ 2625 - продуцент пигмента. Недостатком штаммов гриба является очень медленный рост культуры(5-6 суток),продуцирование рубрум токсина. Более близкого технического решения по совокупности признаков и достигаемого положительного эффекта (прототипа) обнаружить не удалось. Технической задачей изобретения является получение штамма грибаМ-17-14/, являющегося продуцентом красного пигмента. Штамм-162 выделен с поверхности зерна пшеницы, Актюбинской области в 2014 г. Культивирован на плотной питательной среде Чапека при температуре 25-27 С в течение 7-10 дней. Идентифицирован с помощью молекулярно-генетического метода основанного на определении нуклеотидной последовательности в- и -областях ДНК микромицетов по методу-162 депонирован в Коллекции микроорганизмов Республиканского государственного предприятия Научно-исследовательский институт проблем биологической безопасности Комитета науки Министерства образования и науки РК под-1714/. Биологическая характеристика штамма-17-14/ Морфолого-культуральные и физиологобиохимические особенности штамма На агаризированной среде Чапека образуют бархатистые плотные округлые колонии диаметром 23-25 мм, имеют ярко выраженный сизый цвет. Обратная сторона бежевая. Отмечается окрашивание питательной среды в красный цвет за счет выделения красного пигмента. Обладают высокой интенсивностью роста колоний. Кисточки многоспоровые,не симметричные. Метулы цилиндрические, фиалиды бутылевидные. Споры одноклеточные, гладкие, зеленоватые, диаметром(2,91-3,28) мкм. Биологические свойства на лабораторных животных (патогенность) Согласно существующей классификации штаммов (метод. указ. Постановка исследований для обоснования ПДК производственных штаммов и на основе готовых форм препаратов в воздухе рабочей зоны), культураМ-17-14/ принадлежит к 3-му классу опасности. Область применения биотехнология,микробиология, пищевая промышленность. Продукт синтезируемый штаммом при культивировании на среде Чапека штаммМ-17-14/ выделяет в жидкую питательную среду красный пигмент, на 7 сутки культивирования оптическая плотность 100 мл пигментно - спиртового раствора 10-и суточной культуры гриба равнялась 8,0 ед.о.п Фитотоксичность характеризуется снижением силы роста ростков и корешков на 30,2 и 5,7 соответственно,пораженность- столбик разжижения желатины достигал 60 мм 30763 Амилолитическая активность - зона гидролиза крахмала 7 мм. Целлюлозолитическая активность - зоны деструкции на среде с микрокристаллической целлюлозой (МКЦ) - 9 мм, на среде с натриевой солью карбоксиметилцеллюлозы (КЦ - 8 мм, на среде с фильтровальной бумагой - 6 мм. Антагонистическая активность - проявляет антагонизм по отношению к фитопатогенным грибам,, ,-. Определение пигментной активности - штамма культивировали на жидкой питательной среде Чапека 10 сут, красящее вещество извлекали из 50 мл среды 100 мл 96 спирта и 1 мл пигментноспиртового раствора доводили до 100 мл и измеряли на спектрофотометре- 303 ( ) оптическую плотность при 490 нм, используя элемент 5 мм. Ферментативная активность - по методу экспериментальной микологии (справочник по ред. Полыгалина Г.В., Чередниченко , Римарева Л.В., 2003 справочник под ред. В.И. Билай, 1982). Фитотоксичность - по методу О.А. Берестецкого,1978 г Фитопатогенность по методу экспериментальной микологии (справочник по ред. В.И. Билай, 1982 г., Т.П. Сизова, 1982 г.). Антагонистическая активность - по методу экспериментальной микологии(Методы экспериментальной микологии справочник Текст/Под ред. В.И. Билай. - Киев Наукова думка,1982. - 602 с.). Способ, условия и состав сред для хранения штамма Хранение в лиофильно высушенном состоянии при температуре не выше 0 С. Хранение на коротко скошенной агаризованной среде под минеральным маслом при температуре 4-5 С в течение 1 года. Используется среда Чапека при температуре инкубации 25-27 С в течение 710 дней. Среда Чапека (г/л) 3-3, КН 2 Р 4-1,4-0,5, -0,5, -0,01, сахароза - 30, агарагар - 20, вода дистиллированная - 1 л. Стерилизация среды при 0,5 атм. - 20-30 мин. Хранение на скошенной агаризованной среде при температуре 4-5 С, пересев 1 раз в 3 месяца. Используется среда Чапека при температуре инкубации 25-27 С в течение 7-10 дней. Способ, условия и состав сред для размножения Используется среда Чапека при температуре инкубации 25-27 С в течение 7-10 дней. Среда Чапека (г/л) 3-3, КН 2 Р 4-1, 4-0,5, 0,5, -0,01, сахароза - 30, агар-агар - 20, вода дистиллированная - 1 л. Стерилизация среды при 0,5 атм. - 20-30 мин. Отношение к температуре (макс, мин, опт) 2527 С. Отношение к углероду хорошо усваивает сахарозу, глюкозу, мальтозу, лактозу, крахмал,менее - маннит. Отношение к азоту хорошо усваивает 3,3, менее - 44, (4)24. Информация о штамме включается в каталог коллекции до получения патента. ШтаммМ-17-14/ является продуцентом красного пигмента. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Штамм-162,депонирован в Коллекции микроорганизмов Республиканского государственного предприятия Научно-исследовательский институт проблем биологической безопасности Комитета науки Министерства образования и науки РК под номером-17-14/, являющийся продуцентом красного пигмента.