Штамм Rhizobium nepotum В-61/14, компонент биопрепарата для повышения продуктивности зернобобовых культур

(51) 61 39/40 (2006.01) МИНИСТЕРСТВО ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ ШтаммМ-24-14/ выделен из клубеньков, образованных на корнях клевера( ) в поселке Софиевка Акмолинской области РК 2013 г, культивирован на среде бобовый агар при температуре 28-30 С в течение 24-48 часов. Идентифицирован с использованием молекулярно - генетического анализа нуклеотидной последовательности 16 по методу(72) Нечай Наталья Леонидовна Атабаева Бекзат Сайлаубайкызы Ремеле Валентина Ванифатьевна Ошанова Динара Серикбековна(73) Товарищество с ограниченной ответственностью Казахский научноисследовательский институт переработки сельскохозяйственной продукции(54) ШТАММВ-61/14,КОМПОНЕНТ БИОПРЕПАРАТА ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ ПРОДУКТИВНОСТИ ЗЕРНОБОБОВЫХ КУЛЬТУР(57) Изобретение относится к области микробиологии, биотехнологии, а именно к получению штамма как компонента биопрепарата для повышения продуктивности зернобобовых культур, и в качестве объекта исследований в биотехнологии. Технической задачей изобретения является получение штамма бактерииМ 24-14/, выделенного на территории Казахстана, как компонента биопрепарата для повышения продуктивности зернобобовых культур, и в качестве объекта исследований в биотехнологии. ШтаммВ-61/14 депонирован в Коллекции микроорганизмов Республиканского государственного предприятия Научноисследовательский институт проблем биологической безопасности Комитета науки Министерства образования и науки РК под-2414/. 30762 Изобретение относится к области микробиологии, биотехнологии, а именно к получению штамма как компонента биопрепарата для повышения продуктивности зернобобовых культур, и в качестве объекта исследований в биотехнологии. Известен штамм бактерийдля оценки конкурентоспособности штаммов клубеньковых бактерий люцерны (Патент РФ 1409617). Изобретение относится к области микробиологических средств повышения урожайности бобовых растений и предназначено для оценки конкурентоспособности различных штаммов клубеньковых бактерий люцерны. Штамм депонирован во Всесоюзной коллекции клубеньковых бактерий во ВНИИ сельскохозяйственной микробиологии под номером 4076. Известен штамм бактерий. ВНИИСХМ 3401 для получения удобрения под вязель, который выделен из клубеньков вязеля местной популяции,произраставшей на Гунибском плато, Дагестан. Штамм существенно увеличивает азотфиксирующую способность вязеля и улучшает качество его урожая (Патент 2025471, 121/20,0511/08). Известен штамм,который выделен из клубеньков гороха,депонирован в коллекции ВНИИСХМ под 1078,рекомендуемый для производства удобрения под горох (Патент 1789523, 121/20, 0511/08). Известны штаммы. .( 3.4.1,17.2.2, 0, 39/7, 7/1) обнаружены и выделены впервые в Польше в 2009 г. из корончатых галлов фруктовых растений черешни,черемухи, винограда и малины., ,.,.. .35 (2012) 215- 220///. Эти пять штаммов представляют собой новые виды рода ,для которых было предложено имя. . Переданы (2011 г.) к базам данных////89. Бактерииучаствуют в процессе азотфиксации, биосинтеза глютамина,обладают глутамат-аммиак лигазной активностью. Более близкого технического решения по совокупности признаков и достигаемому положительному эффекту (прототипа) обнаружить не удалось. Технической задачей изобретения является получение штамма бактерииМ 24-14/, выделенного на территории Казахстана, как компонента биопрепарата для повышения продуктивности зернобобовых культур, и в качестве объекта исследований в биотехнологии. Штамм-24-14/ выделен в чистую культуру из клубеньков, образованных на корнях клевера ( ). Образцы 2 клевера были отобраны на территории поселка Софиевка Акмолинской области РК в 2013 г Культивирование осуществляли на питательной среде Бобовый агар при температуре 28-30 С в течение 24-48 часов. Идентифицирован с использованием молекулярно - генетического анализа нуклеотидной последовательности 16 по методу,. Штамм бактерииВ-61/14 депонирован в Коллекции микроорганизмов Республиканского государственного предприятия Научно-исследовательский институт проблем биологической безопасности Комитета науки Министерства образования и науки РК под-24-14/ Морфолого-культуральные и физиологобиохимические особенности штамма В-61/14. На бобовом агаре колонии округлой формы,слизистые, блестящие, выпуклые, гладкие с кремоватым оттенком, ровными краями, размером 0,5-2,9 мм. На среде Эшби колонии округлой формы,слизистые, блестящие, выпуклые, гладкие с кремоватым оттенком, ровными краями, размером 0,6-3,0 мм. На -среде колонии округлой формы, слизистые,блестящие, выпуклые, гладкие с кремоватым оттенком, ровными краями, размером 0,5-3,2 мм. Грамотрицательные палочки. Палочки 0,6-0,9 х 1,5-2,5 мкм, неспорообразующие. Факультативный аэроб, сапротроф. Отношение к температуре (макс, мин, опт) 37 С, 4 С, 28-30 С. Отношение к(макс, мин, опт) 11,0 4,5 7,0. 30762 Отношение к углероду усваивает сахарозу,глюкозу. Лактозу не усваивает. В качестве источника азота используют сульфат аммония и нитраты. Желатину не разжижает,молоко с лакмусом не пептонизирует. Биологические свойства на лабораторных животных(патогенность). Обладает слабовыраженным местно-раздражающим действием. Аллергенным действием не обладает,относится к 4-му классу опасности. Хранение в лиофильно высушенном состоянии при температуре не выше 4 С на защитной среде следующего состава сахароза - 100 г/л, желатоза 30 г/л, дистиллированная вода до 1 л. Стерилизуют текучим паром в течение 3-х дней по 30 минут. Хранение на коротко скошенной агаризованной среде под минеральным маслом при температуре 4-5 С в течение 1 года. Используется среда бобовый агар при температуре инкубации 28-30 С в течение 2-4 суток. Бобовый агар (бобовый отвар 1000 мл, сахароза - 2,0 г, Н 2 Р 4 - 1,0 г, 4 7 Н 2 - 0,3 г, агар - 15,0 г). Стерилизация при 0,5 атм. 20-30 мин. Бобовый отвар 50 гр. бобов(белой фасоли или гороха) заливают 1 л водопроводной воды и варят до набухания и растрескивания кожуры (необходимо следить,чтобы крахмал не превратился в клейстер). Горячий отвар фильтруют через вату или несколько слоев марли и доводят объем до 1 л. Хранение методом субкультивирования на скошенной агаризованной среде при температуре 4-5 С, пересев не менее 1 раза в 3 месяца. Используется среда Бобовый агар при температуре инкубации 28-30 С в течение 2-4 суток. Способ, условия и состав сред для размножения Используется среда бобовый агар при температуре инкубации 28-30 С в течение 2-4 суток. Бобовый агар (на 1 л гор. отвара сахароза - 2,0 г,Н 2 РО 4 - 1,0 г, 4 и- 0,3 г, агар - 15,0 г. Стерилизация 20-30 мин при 1,0 атм), температура инкубации 28-30 С в течение 2-4 суток. Штамма бактерииМ-24-14/,может быть использован как компонент биопрепарата для повышения продуктивности зернобобовых культур, и в качестве объекта исследований в биотехнологии. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Штамм В-61/14,депонированный в Коллекции микроорганизмов Республиканского государственного предприятия Научно-исследовательский институт проблем биологической безопасности Комитета науки Министерства образования и науки РК под номером-24-14/, компонент биопрепарата для повышения продуктивности зернобобовых культур, и объект биотехнологических исследований.