Штамм бактерий arthrobacter luteus 43-a, используемый для очистки почвы и воды от нефти и нефтепродуктов

(51) 12 1/20 (2006.01) 12 1/06 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН(57) Изобретение относится к области биотехнологии и экологии и касается получения нового штамма бактерий, который может быть использован для очистки почвы и воды от нефти и нефтепродуктов. Штамм бактерий 43-А используют для очистки почвы и водной поверхности от нефти и нефтепродуктов. Предлагаемый штамм 43-А активно утилизирует нефть разных месторождений Прикаспийского региона на минеральной среде,морской воде и в почве. Степень деструкции нефти составляет 56,4-80,1.(72) Саданов Аманкелди Курбанович Айткельдиева Светлана Айткельдиновна Файзулина Эльмира Рамазановна Ауэзова Ольга Николаевна Татаркина Лариса Геннадьевна(73) Республиканское государственное предприятие на праве хозяйственного ведения Институт микробиологии и вирусологии Комитета науки Министерства образования и науки Республики Казахстан 43-,ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ОЧИСТКИ ПОЧВЫ И ВОДЫ ОТ НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ Изобретение относится к области биотехнологии и экологии и касается получения нового штамма бактерий, который может быть использован для очистки почвы и воды от нефти и нефтепродуктов. Известен штамм бактерий ВКМ Ас-1339 Д, используемый для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов(А.с. 1805097, 02 3/34, 1993). Недостатками данного штамма являются недостаточная скорость утилизации нефти и неспособность осуществлять утилизацию нефти и нефтепродуктов при высоком содержании их к объему загрязненного объекта. Наиболее близким является штамм., используемый для разложения нефти и нефтепродуктов (Патент РФ 2128221, С 12 1/20,1999). Недостатком данного штамма является длительность процесса деструкции нефти (30 дней). Задачей изобретения является получение нового штамма бактерий,обеспечивающего высокоэффективную очистку загрязненных водных поверхностей и почвы от нефти и нефтепродуктов. Характеристика штамма Штамм 43-А 0533 выделен из нефтезагрязненной почвы прибрежной зоны Каспийского моря. Штамм представляет собой неподвижные палочки 0,771,05 мкм с закругленными концами. Характерен цикл палочка-кокк. Грамположительные, спор не образуют. На МПА и РПА культура образует круглые, выпуклые, желтого цвета, не прозрачные колонии диаметром 2-3 мм. Край колоний ровный, пигментов в среду не выделяет. Аэроб. Штамм не токсичен и не патогенен. Физиолого-биохимические признаки В качестве источника углерода использует глюкозу, сахарозу, арабинозу, ксилозу. Крахмал гидролизует, желатину разжижает. Сероводород и индол не образует. Нитраты восстанавливает до нитритов. Дает положительную реакцию на каталазу и оксидазу. Культуру выращивают и хранят на косяках питательного агара. Температура хранения 4 С,пересев через 2 месяца. Штамм характеризуется высокой способностью к утилизации нефти и нефтепродуктов. Штамм бактерий 43-А депонирован в Республиканской коллекции микроорганизмов МОН РК под номером -0533. Сущность изобретения поясняется следующими конкретными примерами. Пример 1. Для оценки нефтеокисляющей активности культуру выращивают на минеральной среде, искусственной морской воде и воде Каспийского моря. Минеральная среда имела следующий состав, г/л 43 - 1,0 2 НРО 4 - 1,0 Н 2 Р 4 - 1,0 472 - 0,2 СаС 2 - 0,02 3 - следы,10,0 дистиллированная вода - 1 л,среды 7,0-7,2. Искусственная морская вода, г/л 2 - 1,8 472 - 0,7 СаС 2 - 0,2 КС - 0,4- 10,0 СаСО 3 - 0,02 43 - 1,0 2 НР 4 - 1,0 3 следы дистиллированная вода - 1 л,среды 7,07,2. Среду разливают по 100 мл в колбы Эрленмейера объемом 750 мл и стерилизуют при 1 атм. 30 минут. Суспензию бактерий получают путем смыва с поверхности скошенной среды (питательный агар) 5 мл стерильной воды и вносят в среду. В качестве единственного источника углерода используют нефть месторождения Тенгиз в количестве 3 по объему. Культивируют на качалке 180 об/мин при 28-30 С 10 суток. Потребление нефти определяют методом газовой хроматографии с массспектрометрическим детектированием, экстрагируя остаточную нефть гексаном. Контролем служит среда с нефтью без бактерий. Данные представлены в таблице 1. Результаты исследований показали,что предлагаемый штамм бактерий активно утилизирует нефть на всех исследуемых средах 78,8-80,1(табл.1). Максимальная утилизация нефти наблюдалась на минеральной среде. Пример 2. Для оценки нефтеокисляющей активности культуру выращивают на минеральной среде. В качестве единственного источника углерода и энергии используют нефть различных месторождений Прикаспийского региона и их смесь в количестве 3 по объему. Степень деструкции нефти определяют методом газовой хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием, экстрагируя остаточную нефть гексаном. Контролем служит среда с нефтью без бактерий. Данные представлены в таблице 2. Результаты исследования показали, что штамм 43-А утилизировал 56,4-65,6 нефти месторождений Бузачи, Жанажол и смесь нефтей. Наиболее эффективно штамм деградировал нефть месторождения Тенгиз. Пример 3. Проведение модельных испытаний. Объектом служила почва, загрязненная нефтью месторождения Тенгиз. Посевной материал вносили в количестве 108 кл/г почвы. При пересыхании почвы проводили полив и рыхление. Контролем служил вариант без бактерий. Время культивирования 30 суток. Остаточное количество нефти в почве определяли методом газовой хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием, экстрагируя нефть гексаном. Результаты исследования показали, что в опытных образцах содержание нефти снизилось на 70,7(табл. 3). Таким образом, предлагаемый штамм способен утилизировать нефть различных месторождений Прикаспийского региона и их смесь. Данный штамм может быть использован для очистки загрязненной почвы и водной поверхности от нефти и нефтепродуктов. Таблица 1 Потребление нефти штаммом 43-А на различных средах Штамм Минеральная среда 43-А Контроль Степень утилизации нефти,Искусственная морская Вода Каспийского моря среда 78,8 79,3 14,9 15,0 Таблица 2 Утилизация нефти различных месторождений Прикаспийского региона штаммом 43-А Штамм 43-А контроль Степень деградации нефти в почве под воздействием штамма 43-А Штамм 43-А контроль ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Штамм бактерий 43-,депонирован в Республиканской коллекции микроорганизмов МОН РК под номером -0533, используемый для очистки почвы и воды от нефти и нефтепродуктов.