Штамм бактерий dietzia maris 84t, используемый для очистки почвы и воды от нефти и нефтепродуктов

(51) 12 1/20 (2006.01) 09 1/10 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН(57) Изобретение относится к области биотехнологии и экологии и касается получения нового штамма бактерий, который может быть использован для очистки почвы и воды от нефти и нефтепродуктов. Штамм бактерий 84 Т используют для очистки почвы и водной поверхности от нефти и нефтепродуктов. Предлагаемый штамм 84 Т активно утилизирует нефть разных месторождений Прикаспийского региона на минеральной среде,морской воде и в почве. Степень деструкции нефти составляет 72,4-90,6.(72) Саданов Аманкелди Курбанович Айткельдиева Светлана Айткельдиновна Файзулина Эльмира Рамазановна Ауэзова Ольга Николаевна Татаркина Лариса Геннадьевна(73) Республиканское государственное предприятие на праве хозяйственного ведения Институт микробиологии и вирусологии Комитета науки Министерства образования и науки Республики Казахстан(54) ШТАММ БАКТЕРИЙ 84,ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ОЧИСТКИ ПОЧВЫ И ВОДЫ ОТ НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ Изобретение относится к области биотехнологии и экологии и касается получения нового штамма бактерий, который может быть использован для очистки почвы и воды от нефти и нефтепродуктов. Известен штамм бактерий. ,используемый для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов (патент РФ 2133769 , 12 1/20,1999). Недостатком данного штамма является неспособность осуществлять утилизацию нефти при высоком содержании их к объему загрязненного объекта. Наиболее близким является штамм бактерий 2.1, используемый для очистки почвы и воды от нефти и нефтепродуктов (инновационный патент РК 24542, 02 3/34, 2011). Штамм выделен из нефтезагрязненной почвы ЗападноКазахстанской области. Недостатком данного штамма является низкая степень очистки при культивировании в минеральной среде. Задачей изобретения является получение нового штамма бактерий,обеспечивающего высокоэффективную очистку загрязненных водных поверхностей и почвы от нефти и нефтепродуктов. Характеристика штамма Штамм 84 Т 0534 выделен из нефтезагрязненной почвы прибрежной зоны Каспийского моря. Штамм представляет собой неподвижные палочки 0,61,29 мкм с закругленными концами. Грамположительные, спор не образуют. На питательном агаре культура образует круглые,выпуклые, кораллового цвета колонии диаметром 23 мм. Край колоний ровный, пигмент в среду не выделяет. Факультативный аэроб. Штамм не токсичен и не патогенен. Физиолого-биохимические признаки В качестве источника углерода использует глюкозу, сахарозу, арабинозу, ксилозу. Крахмал не гидролизует, желатину не разжижает. Сероводород и индол не образует. Нитраты восстанавливает до нитритов. Дает положительную реакцию на каталазу и отрицательную на оксидазу. Культуру выращивают и хранят на косяках питательного агара. Температура хранения 4 С,пересев через 2 месяца. Штамм характеризуется высокой способностью к утилизации нефти и нефтепродуктов. Штамм бактерий 84 Т депонирован в Республиканской коллекции микроорганизмов МОН РК под номером 0534. Сущность изобретения поясняется следующими конкретными примерами. Пример 1. Для оценки нефтеокисляющей активности культуру выращивают на минеральной среде, искусственной морской воде и воде Каспийского моря. Минеральная среда имела следующий состав, г/л 43 - 1,0 2 НРО 4 - 1,0 КН 2 Р 4 - 1,0- 0,02 43 - 1,0 2 НР 4 - 1,0 3 - следы дистиллированная вода - 1 л,среды 7,0-7,2. Среду разливают по 100 мл в колбы Эрленмейера объемом 750 мл и стерилизуют при 1 атм. 30 минут. Суспензию бактерий получают путем смыва с поверхности скошенной среды (питательный агар) 5 мл стерильной воды и вносят в среду. В качестве единственного источника углерода используют нефть месторождения Тенгиз в количестве 3 по объему. Культивируют на качалке 180 об/мин при 28-30 С 14 суток. Потребление нефти определяют методом газовой хроматографии с массспектрометрическим детектированием, экстрагируя остаточную нефть гексаном. Контролем служит среда с нефтью без бактерий. Данные представлены в таблице 1. Результаты исследований показали,что предлагаемый штамм бактерий активно утилизирует нефть на всех исследуемых средах 87,9-90,6(табл. 1). Максимальная утилизация нефти наблюдалась на минеральной среде. Пример 2. Для оценки нефтеокисляющей активности культуру выращивают на минеральной среде. В качестве единственного источника углерода и энергии используют нефть различных месторождений Прикаспийского региона и их смесь в количестве 3 по объему. Степень деструкции нефти определяют методом газовой хроматографии с масс- спектрометрическим детектированием, экстрагируя остаточную нефть гексаном. Контролем служит среда с нефтью без бактерий. Данные представлены в таблице 2. Результаты исследования показали, что штамм 84 Т утилизировал 72,4-89,2 нефти месторождений Бузачи, Жанажол и смесь нефтей. Наиболее эффективно штамм деградировал нефть месторождения Тенгиз. Пример 3. Проведение модельных испытаний. Объектом служила почва, загрязненная нефтью месторождения Тенгиз. Посевной материал вносили в количестве 108 кл/г почвы. При пересыхании почвы проводили полив и рыхление. Контролем служил вариант без бактерий. Время культивирования 30 суток. Остаточное количество нефти в почве определяли методом газовой хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием, экстрагируя нефть гексаном. Результаты исследования показали, что в опытных образцах содержание нефти снизилось на 75,8(табл. 3). Таким образом, предлагаемый штамм способен утилизировать нефть различных месторождений Прикаспийского региона и их смесь. Данный штамм может быть использован для очистки загрязненной почвы и водной поверхности от нефти и нефтепродуктов. Таблица 1 Потребление нефти штаммом 84 Т на различных средах Штамм Минеральная среда 84 Т Контроль Степень утилизации нефти,Искусственная морская Вода Каспийского моря среда 88,5 87,9 14,9 15,0 Таблица 2 Утилизация нефти различных месторождений Прикаспийского региона штаммом 84 Т Штамм 84 Т контроль Степень деградации нефти в почве под воздействием штамма 84 Т Штамм 84 Т контроль ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Штамм бактерий 84, депонирован в Республиканской коллекции микроорганизмов МОН РК под номером 0534,используемый для очистки почвы и воды от нефти и нефтепродуктов.