Способ получения пастообразного препарата для силосования кормов

(51) 12 1/20 (2010.01) 12 1/02 (2010.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ Способ производства бактериальной закваски для силосования кормов путем выращивания посевного материала на питательной среде в колбах,инокуляторах, культивирование в ферментерах,концентрирование биомассы в виде пасты центрифугированием, отличающийся тем, что перед центрифугированием биомассу осаждают бентонитом в сочетании с хлористым кальцием, а в готовую пасту добавляют стабилизатор уксуснокислый натрий. Технический результат. Предлагаемый способ позволяет получить пастообразный препарат с содержанием бактериальный клеток не менее 20109 КОЕ/мл и сроком хранения 6 месяцев.(76) Саданов Аманкелди Курбанович Айткельдиева Светлана Айткельдиновна Гаврилова Нина Николаевна Ратникова Ирина Александровна(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПАСТООБРАЗНОГО ПРЕПАРАТА ДЛЯ СИЛОСОВАНИЯ КОРМОВ(57) Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности - к способам получения бактериальных препаратов для силосования кормов. 23491 Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности - к способам получения бактериальных препаратов для силосования кормов. В настоящее время бактериальные закваски для силосования кормов выпускаются в жидком(Закваска Биотроф ТУ 46-12-82 закваска Биосиб, номер госрегистрации ПВР- 1-4.6/01797) и сухом виде (сухая закваска Лактобифадол патент РФ 2239331 от 10.11. 2004. 12 1/20,1/02). В последнем случае, особенно при сублимационном способе высушивания, производят концентрирование биомассы с помощью центрифугирования или сепарирования перед высушиванием. Недостатком жидкой закваски является непродолжительный срок хранения и большие объемы при транспортировке. Недостатком сухой закваски является гибель части клеток при высушивании и дорогостоящий процесс сушки. Концентрированная биомасса в виде пасты может быть одним из видов силосных заквасок., так как она при соответствующей стабилизации имеет более длительный срок хранения по сравнением с жидким препаратом,высокое содержание бактериальных клеток, удобна при перевозке и хранении. Наиболее близким по техническому решению является способ концентрирования бактериальных клеток путем осаждения раствором бентонита в сочетании с хлористым кальцием. При этом осадок биомассы через 3,5 ч занимает около 30-50 от всего объема культуральной жидкости. Полученные осадки нейтрализуют,добавляют защитные компоненты и сушат распылительным способом(А.с. СССР 1091549. Способ получения бактериальной закваски для силосования кормов,1997. Кл.С 12 1/20, 1/02). Задачей изобретения является получение пастообразного бактериального препарата с повышенным сроком хранения в качестве конечного продукта для силосования кормов. Технический результат получение пастообразного препарата с содержанием бактериальный клеток не менее 20109 КОЕ/мл и сроком хранения 6 месяцев достигается тем, что перед центрифугированием биомассу осаждают бентонитом в сочетании с хлористым кальцием, а в готовую пасту добавляют стабилизатор уксуснокислый натрий. Поставленная задача достигается культивированием молочнокислых и пропионовокислых бактерий в питательной среде,осаждением биомассы бентонитом и хлористым кальцием,центрифугированием полученного осадка,введением в пасту протектора,гомогенизацией препарата,фасовкой и герметической запайкой пакетов. Полученный препарат имеет титр не менее 20109 КОЕ/мл. Срок хранения препарата при температуре 4-8 С 6 месяцев со дня изготовления. Способ получения пастообразного препарата заключается в следующем. 2 При наработке посевного материала используют штаммы молочнокислых(АМС) и пропионовокислых бактерий(ПКБ). Состав питательной среды для маточной расплодки амилолитического молочнокислого стрептококка (АМС),Кукурузный экстракт - 1,5 (по сухому веществу) Крахмал растворимый - 1,0 Мел - 1,0 Дрожжевой автолизат- 1,0 мл Вода питьевая - остальное рН среды - 6,8-6,9 Состав питательной среды для маточной расплодки пропионовокислых бактерий (ПКБ),Кукурузный экстракт - 1,5 ( по сухому веществу) Глюкоза - 2,0 Аммоний сернокислый - 0,3 Кобальт хлористый - 1,0 мг Мел - 1,0 Вода питьевая - остальное рН среды - 6,8-7,0 Состав посевной и ферментационной сред для молочнокислых бактерий,Кукурузный экстракт - 1,5 (по сухому веществу) Сахар-песок - 1,0 Вода питьевая - остальное Примечание вместо кукурузного экстракта можно использовать настой из солодовых ростков,вместо сахарамелассу, гидролизаты крахмала или кукурузной муки. Состав посевной и ферментационной сред для пропионовокислых бактерий,Кукурузный экстракт - 1,5 ( по сухому веществу) Глюкоза - 1,0 Аммоний сернокислый - 0,3 Кобальт хлористый - 1,0 мг Вода питьевая - остальное Примечание вместо глюкозы можно гидролизаты крахмала или кукурузной муки. Выращивают посевной материал в колбах в термостате при температуре 28-30 С ( ПКБ) и при 35-37 С (АМС) в течение 18-24 ч. Титр клеток в конце ферментации составляет не менее 0,5 млрд КОЕ/мл . Посевной материал, полученный в колбах,используют для засева вышеописанной питательной среды в инокуляторе или ферментере в количестве 5. Питательную среду готовят в инокуляторе и ферментере , стерилизуют при 121 С в течение 30 минут. Режим культивирования в инокуляторе и ферментере Температура культивирования 28-30 С (ПКБ) 35-37 С (АМС) Избыточное давление в аппарате 0,3-0,5 атм. Время культивирования 18-24 час. Титр клеток в конце ферментации не ниже 0,5 млрд КОЕ/мл. В культуральную жидкость, полученную после ферментации, добавляют растворенные в питьевой воде бентонит и хлористый кальций, смесь хорошо 23491 перемешивают и оставляют в прохладном месте на 3,5 ч. За это время биомасса адсорбируется на бентоните и осаждается. Объем плотного осадка составляет 40-50 от общего объема культуральной жидкости. Надосадочную жидкость декантируют, а оставшийся осадок центрифугируют при 3000 об/мин в течение 30 мин. При этом получают биомассу бактерий в количестве 40-50 г/л с титром не менее 20109 КОЕ/мл. В биомассу добавляют 1 уксуснокислого натрия и перемешивают на механической мешалке. Препарат фасуют по 1-3 кг в полиэтиленовые мешки, удаляют воздух и запаивают. Срок хранения препарата при температуре 4-8 С 6 месяцев со дня изготовления. Пример 1. Выращивают культуры(АМС) и(ПКБ) на питательных средах следующего состава, АМС ПКБ Кукурузный экстракт - 1,5 Глюкоза 1,0 Крахмал растворимый - 1,0 Мел- 1,0 1,0 Дрожжевой автолизат - 1,0 мл Аммоний сернокислый - 0,3 Кобальт хлористый - 1,0 мг Вода питьевая- 6,8-6,9 6,8-7,0 Засев колб с 300 мл питательной среды культурами молочнокислых и пропионовокислых бактерий производят со скошенной агаризованной среды. Выращивают маточную расплодку в колбах в термостате при температуре 28-30 С (ПКБ) и при 35-37 С (АМС) в течение 18-20 ч. В конце ферментации культуральную жидкость микроскопируют. Посевной материал молочнокислых и пропионовокислых бактерий выращивают в колбах в количестве 1,5 л в течение 20 ч на питательных средах следующего состава,АМС ПКБ Кукурузный экстракт - 1,5 1,5 Глюкоза 1,0 Сахар-песок- остальное. В конце ферментации культуральную жидкость микроскопируют. Наработку культуральной жидкости молочнокислых и пропионовокислых бактерий производят в ферментере вместимостью 30 л без аэрации при избыточном давлении 0,3-0,5 атм. Питательную среду выше указанного состава готовят в ферментере и стерилизуют при 121 С в течение 30 минут. После охлаждения питательной среды до 28 С ее засевают пятью процентами посевного материала. Культивирование производят при следующем режиме Температура культивирования 28-30 С (ПКБ) 35-37 С (АМС) Избыточное давление в аппарате 0,3-0,5 ат. Время культивирования 18-24 час. В культуральную жидкость, полученную после ферментации, добавляют растворенный в питьевой воде бентонит (3) и хлористый кальций (0,1),смесь хорошо перемешивают и оставляют в прохладном месте на 3 ч. За это время биомасса адсорбируется на бентоните и осаждается. Объем плотного осадка ПКБ составил 45 от общего объема культуральной жидкости, АМС - 50. Надосадочную жидкость декантировали, а оставшийся осадок центрифугировали при 3000 об/мин в течение 30 мин. При этом получена биомасса бактерий, адсорбированная на бентоните, в количестве ПКБ - 1300 г 1,5 с титром 30 х 109 КОЕ/мл,АМС - 1500 г г с титром 50109 КОЕ/мл. Результаты представлены в таблице 1. Пример 2. Выращивают и концентрируют биомассу молочнокислых и пропионовокислых бактерий 0,3 поводят аналогично примеру 1. Отцентрифугированную биомассу бактерий разделили на 2 части - контрольную и опытную, в которую добавили 1 уксуснокислого натрия и перемешали на механической мешалке. Препараты расфасовали по 0,5 кг в полиэтиленовые мешки,удалили воздух, запаяли и заложили на хранение при температуре 4-8 С. Результаты представлены в таблице 2. Как видно из представленной таблицы,предлагаемый способ позволяет получить пастообразный препарат с высоким содержанием бактериальных клеток,сохраняющий жизнеспособность в течение 6 месяцев. Получение пастообразного препарата предложенным способом имеет следующие преимущества по сравнению с прототипом. Во-первых, использование протектора в составе бактериальной пасты позволяет продлить срок ее хранения до 6 месяцев. Во-вторых, пастообразный препарат значительно дешевле сухого препарата за счет исключения дорогостоящего процесса сушки, при этом имеет высокий титр (не менее 20109 КОЕ/мл). Для сравнения, бактериальный концентрат Казахсил содержит в своем составе не менее 10 млрд. КОЕ/мл,распылительно высушенный препарат - не менее 1 млрд. КОЕ/мл. Это позволяет заменить более дорогие сухие препараты на более дешевые, не уступающие по качеству. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ получения пастообразного препарата для силосования кормов, включающий выращивание посевного материала на питательной среде в колбах,инокуляторах, культивирование в ферментерах, концентрирование биомассы, центрифугирование,отличающийся тем,что перед центрифугированием биомассу осаждают бентонитом в сочетании с хлористым кальцием, а в готовую пасту добавляют стабилизаторуксуснокислый натрий.