Способ прогнозирования риска генетических последствий облучения малыми дозами у потомков облученных лиц

(51) 01 33/48 (2011.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ лечебных мероприятий у жителей, пострадавших от деятельности СИЯП. Способ применен у 50 доноров, проживающих в Абралинском и Бескарагайском районах ВКО,являющихся потомками лиц, подвергавшихся непосредственному облучению в период испытаний ядерного оружия на СИЯП. У потомков проводят цитогенетический анализ лимфоцитов периферической крови. В случае обнаружения высокой частоты хромосомных аберраций с преобладанием аберраций хроматидного типа, следует проводить полный медицинский осмотр на наличие соматической патологии. Это позволит формировать группы высокого риска распространенности общесоматических заболеваний и планировать профилактические мероприятия.(72) Мадиева Мадина Рашидовна Чайжунусова Найля Жакияновна Жетписбаев Бекболат Адамович Манамбаева Зухра Алпысбаевна(56) Бочков Н.П., Катосова Л.Д. Генетический мониторинг популяций человека при реальных химических и радиационных нагрузках // Вест.РАМН, 1992, 4, с. 10-14(54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РИСКА ГЕНЕТИЧЕСКИХ ПОСЛЕДСТВИЙ ОБЛУЧЕНИЯ МАЛЫМИ ДОЗАМИ У ПОТОМКОВ ОБЛУЧЕННЫХ ЛИЦ(57) Изобретение относится к области медицины, а именно к радиационной цитогенетике и может быть использовано при проведении профилактических и Изобретение относится к области медицины, а именно к радиационной медицине и может быть использовано при проведении профилактических мероприятий у жителей,пострадавших от деятельности СИЯП. Что же считать генетическими последствиями облучения Традиционно для оценки риска генетических эффектов облучения используют один из возможных неблагоприятных исходов беременности. В качестве подобного маркера неблагоприятного эффекта могут бытьврожденные пороки развития(ВПР), менделирующие доминантные летальные мутации,аномалии хромосом,хромосомные аберрации Пилинская М.А. Эффекты ионизирующего излучения //Вестник РАМН. -2008. - 3.- С.31-36. Использование этого подхода в экспериментах на мелких лабораторных животных,позволило определить величину удваивающей дозы, равную 1 Гр. Однако определить подобным образом (прямой метод) достоверное превышение частоты маркера в популяции до и после момента воздействия при определенных (часто не достаточно точно) дозовых нагрузках не определяется возможным. Другой метододический прием - оценить дозу удваивающую вероятность появления таких маркерных последствий (метод удваивающей дозы) также не удается использовать в популяциях человека Шепель Н.Н., Севанькаев А.В. и др. Особенности применения цитогенетического метода для биологической дозиметрии неконтролируемого облучения человека//Вестник российской военно-медицинской академии,С-Пб, 2008, 3.- с. 189. Метод учета хромосомных аберраций в лимфоцитах периферической крови лиц,подвергавшихся радиационному воздействию,является широко используемым, прост в исполнении и зарекомендовал себя как один из наиболее чувствительных методов биологической дозиметрии Бочков Н.П., Катосова Л.Д. Генетический мониторинг популяций человека при реальных химических и радиационных нагрузках //Вест. РАМН.-1992, 4.С.10-14. Было показано, что у облученных лиц хромосомные аберрации могут длительно сохраняться в циркулирующих лимфоцитах периферической крови, и что не только типы аберраций хромосом, но и количество их в культуре лимфоцитов человека практически одинаковы при идентичном облучении культуры лимфоцитов и организма в целом. Это свойство обосновывает использование лимфоцитов в биологической индикации при случайном,неконтролируемом облучении человека. Также было продемонстрировано достоверное превышение частоты аберраций хроматидного типа при облучении клеток в пресинтетической фазе. Однако не обнаружено сведений относительно соотношения хромосомного и хроматидного типов аберраций у потомков облученных лиц и связи этих нарушений с соматической патологией. Поэтому хромосомные аберрации, частота которых превышает спонтанный уровень, в настоящее время рассматриваются как один из возможных эффектов пролонгированного радиационного воздействия в отдаленном периоде, что определяет актуальность применения данного метода для оценки риска генетических последствий у потомков облученных лиц пострадавших от деятельности СИЯП. Задачей изобретения является разработка способа прогнозирования генетических последствий на основании отношения частот хромосомных и хроматидных аберраций в крови потомков лиц,подвергавшихся воздействию ионизирующего излучения в малых дозах. Технический результат применение способа позволит оптимизировать раннюю диагностику и профилактическое лечение общесоматических болезней у потомков облученных лиц. Предлагаемый нами способ прогнозирования риска генетических последствий облучения малыми дозами у потомков заключается в проведении цитогенетического анализа лимфоцитов периферической крови с обязательным изучением соотношения частоты выявленных хроматидных и хромосомных аберраций. Считаем, что обнаружение повышенного уровня аберраций хроматидного типа у потомков облученных лиц является результатом опосредованного воздействия радиационного фактора и имеет прогностическое значение. Был проведен цитогенетический анализ лимфоцитов периферической крови потомков жителей Абралинского и Бескарагайского районов ВКО(основная группа) и контрольного Кокпектинского района ВКО (таблица 1). Всего проанализировано 20056 метафазных клеток из культуры лимфоцитов периферической крови, из них 9950 метафаз у жителей Бескарагайского района и 10106 - Абралинского. Таблица 1 Частота хромосомных аберраций нестабильного типа у потомков лиц Семипалатинского региона Показатели на 500 клеток Всего аберраций 93 4,670,21 хромосомного типа Сравнение собственных результатов с данными других авторов показало существование различий по соотношению частоты выявленных хромосомных и хроматидных аберраций у облученных лиц и у потомков жителей ВКО, пострадавших от деятельности СИЯП, где превалирует доля аберраций хроматидного над хромосомным типом,при приблизительно равной общей частоте хромосомных аберраций в сравниваемых группах Таблица 2 Сравнительные данные по частоте аберраций хромосомного и хроматидного типа у различных контингентов из районов радиоэкологического неблагополучия Показатели ВКО Абильдин ова Г.Ж. 2006 г. 2,5 хромосомно го типа Хроматид ного типа Всего ХА На основании полученных результатов сделали заключение, что повышенный уровень аберраций у потомков жителей Семипалатинского региона является отражением двух параллельно идущих процессов повышения над контрольным уровнем частоты хроматидных аберраций за счет их возникновения под действием радиационного и других вредных факторов и ее снижения вследствие элиминации нестабильных аберраций хромосомного типа (дицентрики, кольца) в ряду клеточных поколений. У потомков также был рассчитан относительный риск распространенности соматической патологии наиболее радиопоражаемых систем организма и проведен корреляционный анализ с целью определения связи с цитогенетическими нарушениями (таблица 3 рисунок). Таблица 3 Относительный рискобщесоматических болезней и частота хромосомных аберраций (ХА) у потомков жителей ВКО Классы болезней (по МКБ-10)(класс ) Болезни органов дыхания (класс Частота хромосомных аберраций 1,10,2 Из фигуры видно, что хроматидные аберрации и относительные риски распространенности соматических болезней находятся в линейной зависимости, положительно коррелируют 0,45(р 0,1). Частота аберраций хромосомного типа также положительно коррелирует с относительным риском соматических заболеваний 0,33 (р 0,1). Из вышеизложенного сделали заключение, что повышенные показатели распространенности рассмотренных классов болезней и высокая частота хромосомных аберраций, в наибольшей степени,хроматидного типа, взаимообусловлены. Пример 1. Пациентка Т., 52 года, диагноз клинически здорова на момент обследования. В анамнезе частые ОРЗ, хронический обструктивный бронхит, железодефицитная анемия, 2 ст. Радиационный маршрут с 1958 года постоянно проживает в с. Мостик Бескарагайского района ВКО. Отец - 1928 г.р. проживал в с. Мостик с 1951 по 1998 гг. Мать-1932 г.р., уроженка Бескарагайского района. Реконструированная доза внешнего облучения в данной местности составляет 200,0-2017 мЗв Кошпесова Г.К., Организация радиационно-гигиенического мониторинга состояния здоровья населения Восточноказахстанской области,подвергавшегося радиационному воздействию. Автореф. канд.мед.наук.- Семей, 2009.- 18 с Цитогенетический анализ Общее количество клеток - 100, кариотип - 46 , кол-во аберрантных клеток -13, хромосомных аберраций -17, парные фрагменты - 8, дицентрики - 1, кольцо - 1,хроматидные обмены - 2, одиночные фрагменты - 3. Заключение в лимфоцитах периферической крови обнаружены хромосомные аберрации хромосомного(41,2) и хроматидного типа (58,8). Данная пациентка была включена в группу риска распространения общесоматической патологии и ей было назначено профилактическое лечение и наблюдение у терапевта по месту жительства. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ прогнозирования риска генетических последствий облучения малыми дозами у потомков облученных лиц, включающий цитогенетическое исследование крови, отличающийся тем, что определяют соотношение частоты хромосомных и хроматидных аберраций у потомков облученных лиц, и при превышении уровня аберраций хроматидного типа в соотношении 11,2 прогнозируют наличие риска генетических последствий.