Способ получения жидких пробиотиков

(51) 61 35/74 (2006.01) 12 1/20 (2006.01) 61 1/00 (2006.01) МИНИСТЕРСТВО ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ Задача изобретения - повышение срока годности жидких пробиотиков. Техническим результатом является способ,включающий добавку 1-2 пшеничных отрубей в жидкие культуры пробиотических микроорганизмов перед расфасовкой, что позволяет увеличить срок их годности при хранении в холодильнике с 3 до 6 месяцев, в комнатных условиях - с 0,5 до 1,5 месяца.(76) Саданов Аманкелди Курбанович Гаврилова Нина Николаевна Ратникова Ирина Александровна(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЖИДКИХ ПРОБИОТИКОВ(57) Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано при производстве жидких пробиотиков. Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано при производстве жидких пробиотиков. Известно, что пробиотики выпускают в сухом и жидком виде. Сухие пробиотики производят с использованием метода лиофильной сушки живых активных бактерий. Препараты выпускаются в виде порошка, таблеток, капсул и свечей. Эти формы имеют длительные сроки хранения (до одного года) и не требовательны к соблюдению температурного режима при хранении. Существенным недостатком сухих пробиотиков является то, что процесс лиофилизации переводит бактерии в состояние анабиоза. Для возвращения в активное физиологическое состояние им требуется 8-10 часов пребывания в кислой среде при температуре тела. За это время большая часть бактерий уже выводится из кишечника человека. При производстве жидких пробиотиков микробные клетки остаются в активном состоянии и способны заселять слизистые сразу после попадания в организм человека,вытесняя патогенную и условно-патогенную микрофлору. Жидкие формы содержат целый ряд дополнительных лечебных факторов. Это продукты жизнедеятельности бактерий. Среди них очень важны низкомолекулярные жирные кислоты, в присутствии которых прекращает размножаться болезнетворная микрофлора. При лиофилизации они улетучиваются. В настоящее время известен ряд жидких пробиотиков. Бифидум 791 БАГ жидкий (ТУ 9224-0074972910.3-024 г. 77-99-23.3.У.1115.2.06 от 10.02.2006) содержит 3 штамма антагонистически активных бифидобактерий видов В.и В. , в том числе новый высокоэффективный кислотоустойчивый штамм В.791 БАГ,автолизат пекарских дрожжей, изолят соевого белка СУПРО-760. Срок годности - 3 месяца при температуре (42)С. Биологически активная добавка Трилакт (ТУ 9224-001-14392386-04 с изменением 1 гос. регистрации 77-99-23.3.У.1115.2.06 от 10.02.2006) содержит три антагонистически активных штамма лактобактерий . , .и . ,выращенных в стерильном обезжиренном молоке. Срок хранения - 3 месяца при температуре (42)С. Флористин(ТУ 9224-015-14392386-10) представляет собой комплекс живых культур бифидобактерий видов В.и В. ,термофильного стрептококка и лактобактерий вида. , молоко обезжиренное. Срок хранения - 3 месяца при температуре (4 2)С. Пробиотик БИОГАРАНТ-плантафермин жидкий (СТ РГП 061040002445-01-2011,гос.регистрации 16.01.78.003.Е.016271.09.11 от 15.09.2011 г) представляет собой микробную массу живых антагонистически активных штаммов бактерий .27 и .2 или 27 , .27, .2,7 вместе с питательной средой. Срок хранения - 3 месяца при температуре 4 10 С. Задачей изобретения является повышение срока годности жидких пробиотиков. Технический результат - повышение срока годности жидких пробиотиков достигается тем, что после выращивания бактерий перед расфасовкой в жидкую культуру добавляют 1-2 стерильных пшеничных отрубей. Способ получения пастообразного препарата заключается в следующем. Культуры пробиотических бактерий выращивают в жидкой питательной среде при оптимальной для них температуре в течение 18-24 часа. Затем в жидкую культуру добавляют простерилизованные при температуре 120 С в течение 30 минут пшеничные отруби, тщательно перемешивают,разливают во флаконы и герметично укупоривают. Сущность изобретения поясняется следующими конкретными примерами. Пример 1 Ассоциацию культур 27 и 2 выращивают в течение 24 ч при 37 С на на гидролизатно-молочной среде,используемой для производства плантафермина(г/л) гидролизованное молоко - 500,0 мл пептон 2,0 лактоза - 10,0 натрия хлорид - 3,5 цистеин солянокислый - 0,15 агар микробиологический 0,75, вода питьевая - до 1 л. Часть жидкой культуры разливают по флаконам и укупоривают (контроль). Остальную культуру делят на 2 части, в одну из которой добавляют 1 простерилизованных при температуре 120 С в течение 30 минут пшеничных отрубей, в другую - 2. Жидкую культуру с пшеничными отрубями тщательно перемешивают,разливают по флаконам и укупоривают. Флаконы с жидким пробиотиком закладывают на хранение при температуре (232)С и (62)С. Количество бактериальных клеток в исходных препаратов и после хранения определяют путем высева культур из соответствующих разведений в чашки Петри на твердую питательную среду . Чашки выдерживают в термостате в течение 2-3 суток при температуре 37 С, затем подсчитывают число выросших колоний. Результаты по хранению жидкого пробиотика при комнатной температуре (232)С представлены в таблице 1. Таблица 1 Изменение титра бактерий в жидком пробиотике БИОГАРАНТ-плантафермин после хранения при комнатной температуре Варианты опыта Контроль 2 ПО 1 ПО Как видно из представленной таблицы, в жидком препарате без добавки пшеничных отрубей содержание жизнеспособных клеток молочнокислых бактерий не соответствовало стандарту через месяц его хранения при комнатной температуре (в соответствии со стандартом количество клеток в жидком препарате должно быть не менее пх 107 КОЕ/г). В жидком препарате с добавкой пшеничных отрубей через 6 недель хранения в этих же условиях титр бактерий соответствовал стандарту (1,0-1,5108 КОЕ/г). Результаты исследований по хранению жидкого пробиотика в условиях холодильника представлены в таблице 2. Таблица 2 Изменение титра бактерий в жидком пробиотике БИОГАРАНТ-плантафермин после хранения в холодильнике Варианты опыта Контроль 2 ПО 1 ПО Как видно из представленной таблицы, срок годности жидкого пробиотика без добавки пшеничных отрубей при хранении в холодильнике составляет 3 месяца, с добавкой отрубей - 6 месяцев. Пример 2 Ассоциацию А-5, состоящую из культур .Б-3, .2 и-15,выращивают в течение 24 ч при 37 С в питательной средеследующего состава(г/л) дрожжевой экстракт - 5,0 мясной экстракт - 10,0 пептон - 10,0 глюкоза - 20,0 аммоний лимоннокислый - 2,0 натрий уксуснокислый - 5,0 твин-80 - 1,0 КН 2 РО 4 2,0 О 4 х 7 Н 2 - 0,2 О 4 х 4 Н 2 О - 0,05 СоС 2 - 0,01 (4)2 О 4 - 1,0 вода питьевая - до 1 л. Часть жидкой культуры разливают по флаконам и укупоривают (контроль). Остальную культуру делят на 2 части, в одну из которой добавляют 1 простерилизованных при температуре 120 С в течение 30 минут пшеничных отрубей, в другую 2. Жидкую культуру с пшеничными отрубями тщательно перемешивают, разливают по флаконам и укупоривают. Флаконы с жидким пробиотиком закладывают на хранение при температуре (232)С и (62)С. Количество бактериальных клеток в исходных препаратах и после хранения определяют путем высева культур из соответствующих разведений в чашки Петри на твердую питательную среду . Чашки выдерживают в термостате в течение 2-3 суток при температуре 37 С, затем подсчитывают число выросших колоний. Результаты по хранению жидкого пробиотика на основе ассоциации А-5 при комнатной температуре(232)С представлены в таблице 3. Таблица 3 Изменение титра бактерий в жидком пробиотике из ассоциации А-5 после хранения при комнатной температуре Варианты опыта Контроль 2 ПО 1 ПО Как видно из представленной таблицы, в жидком препарате без добавки пшеничных отрубей содержание жизнеспособных клеток пробиотических бактерий соответствует стандарту 4,0107 КОЕ/мл) в течение 2 недель, а с добавкой пшеничных отрубей титр бактерий через 1,5 месяца сохраняется на уровне 1,0-2,0108 КОЕ/мл. Результаты исследований по хранению жидкого пробиотика в условиях холодильника (62 С) представлены в таблице 4. Таблица 4 Изменение титра бактерий в жидком пробиотике из ассоциации А-5 после хранения в холодильнике Варианты опыта Контроль 2 ПО 1 ПО Данные таблицы 4 свидетельствуют о том, что срок годности жидкого пробиотика без добавки пшеничных отрубей при хранении в холодильнике составляет 3 месяца, с добавкой отрубей - 6 месяцев. Таким образом, проведенные исследования показали, что в состав жидких пробиотиков для повышения их срока хранения целесообразно вводить 1-2 пшеничных отрубей. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ получения жидких пробиотиков путем выращивания входящих в их состав пробиотических микроорганизмов в жидкой питательной среде с последующим розливом жидкой культуры во флаконы и их укупорки, отличающийся тем, что после выращивания микроорганизмов в жидкую культуру перед расфасовкой добавляют 1-2 пшеничных отрубей.