Способ повышения антимикробной активности у пробиотических микроорганизмов

(51) 61 35/66 (2006.01) 61 35/74 (2006.01) 12 1/20 (2006.01) 61 1/00 (2006.01) МИНИСТЕРСТВО ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН(57) Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано при производстве пробиотиков для медицины и ветеринарии. Способ повышения антимикробной активности у пробиотических микроорганизмов, включающий выращивание антагонистически активных штаммов с использованием стимуляторов их роста, например,пищевых волокон. Задача изобретения - расширение спектра действия и повышения антимикробной активности прибиотических микроорганизмов. Сущность изобретения. В состав питательной среды для выращивания прибиотических бактерий вводят 10-20 г/л виноградных выжимок. Техническим результатом является использование в составе питательной среды виноградных выжимок, являющихся отходом соковой и винодельческой промышленности, в количестве 10-20 г/л позволяет расширить спектр антимикробного действия и повысить величину антагонистической активности у пробиотических микроорганизмов.(76) Саданов Аманкелди Курбанович Гаврилова Нина Николаевна Ратникова Ирина Александровна Шорабаев Ерик Жарылкасынович(56) Гаврилова Н.Н. и др. Влияние пищевых волокон на рост и биологическую активность молочнокислых, пропионовокислых, патогенных и условно-патогенных микроорганизмов// Биотехнология. Теория и практика, 2008. 4. С.127130 Каширская Н.Ю. Значение пробиотиков и пребиотиков в регуляции кишечной микрофлоры // Русский Медицинский журнал, 2000. 13-14. С.1217.,//, 1998. 4..477-48069631 , 15.09.2004(54) СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ АНТИМИКРОБНОЙ АКТИВНОСТИ У ПРОБИОТИЧЕСКИХ МИКРООРГАНИЗМОВ Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано при производстве пробиотиков для медицины и ветеринарии. В качестве стимуляторов роста пробиотических бактерий могут служить пребиотики неперевариваемые ингредиенты пищи, которые способствуют улучшению здоровья за счет избирательной стимуляции роста и/или метаболической активности одной или нескольких групп бактерий, обитающих в толстой кишке. Свойства пребиотиков наиболее выражены во фруктозоолигосахаридах. (ФОС), инулине, галактоолигосахаридах (ГОС), лактулозе, лактитоле( ,//. - 1998. - 4. - . 477-480). В качестве пребиотиков используются также пищевые волокнасумма полисахаридов и лигнина, которые не перевариваются эндогенными секретами желудочно-кишечного тракта человека. Пищевые волокна делятся на три группы ферментируемые бактериями пектин, камеди водорастворимые клейкие полисахариды, состоящие из глюкозы, галактозы, маннозы, арабинозы,рамнозы и их уроновых кислот слизи(полисахариды из семян льна и морских водорослей) гемицеллюлоза частично ферментируемые целлюлоза гемицеллюлоза неферментируемые лигнин. Пищевые волокна обладают многочисленными физиологическими эффектами, что определяет их значение для нормального функционирования организма(Каширская Н.Ю. Значение пробиотиков и пребиотиков в регуляции кишечной микрофлоры // Русский мед. Журнал. - 2000. - 13-14. С. 12-17). Хороший результат получен при использования в качестве стимулятора роста и биологической активности молочнокислых бактерий ферментированных выжимок из столовой свеклы отхода производства диетического свекольного сока(Гаврилова Н.Н.,Ратникова И.А.,Треножникова Л.П., Баякышова К., Хасенова А.Х. Влияние пищевых волокон на рост и биологическую активность молочнокислых, пропионовокислых,патогенных и условнопатогенных микроорганизмов // Биотехнология. Теория и практика.- 2008, - 4- 127-130). Установлено, что при росте на питательной среде с ферментированной свекольной выжимкой у бактерий повышалась устойчивость ко всем испытанным антибиотикам, в то время как на контрольной среде они были чувствительны к гентамицину, левомицетину, линкомицину и ципрофлоксацину. При этом антагонистическая активность установлена практически ко всем тесткультурам. Не выявлена активность лишь кАТСС 6633 у 27. Если в контрольной среде ни одна из культур молочнокислых бактерий не проявляла антагонистическую активность к, то при росте на ферментированной свекольной выжимке активность установлена у двух культур 8 и .27. Недостатком описанного способа культивирования бактерий является отсутствие антимикробной активности у ряда штаммов пробиотических бактерий к С.и В.АТСС 6633, а также дефицитность сырья сброженных выжимок из столовой свеклы. Задачей изобретения является расширение спектра действия и повышение антимикробной активности пробиотических микроорганизмов. Задача изобретения достигается тем, что в состав питательной среды для выращивания пробиотических бактерий вводят виноградные выжимки, являющиеся отходом соковой и винодельческой промышленности. Использование виноградных выжимок в количестве 10-20 г/л в составе питательной среды позволяет расширить спектр антимикробного действия и повысить величину антагонистической активности у пробиотических микроорганизмов. Эффективность способа подтверждена следующим конкретным примером. Пример. Штаммы пробиотических бактерий молочнокислые бактерии 2 В,22,127,27,8,20,пропионовокислые бактерии-15, 2 ассоциации (А и П) из молочнокислых и пропионовокислых бактерий,отличающиеся по составу молочнокислых бактерий,выращивают на питательной средес добавкой в ее состав 15 г/л виноградных выжимок. Контролем служат те же культуры микроорганизмов,выращенные на питательной средес использованием в качестве единственного источника углерода ферментированных выжимок из столовой свеклы. Культивирование проводят при температуре 28-30 С в течение 24 часов. В выращенных культурах определяют антимикробную активность диффузионным методом в отношении тест-культур,,209,,444,, 5,,,6633, вакцины Ценковского и Мечникова. Изучают также резистентность к бисептолу,левомицетину,гентамицину, линкомицину, ципрофлоксацину в концентрациях 100 и 50 мкг/мл методом стандартных дисков. Результаты исследований представлены в таблицах 1 и 2. Таблица 1 Антагонистичекская активность пробиотических бактерий при росте в питательной среде с ферментированными выжимками из столовой свеклы Как видно из представленных таблиц,антимикробная активность пробиотических культур,выращенных в питательной средес добавкой виноградных выжимок обладает более широким спектром действия. При этом они подавляют рост всех испытанных тест-культур, в то время как при выращивании в питательной среде с ферментированными выжимками из столовой свеклы активность в отношении С.выявлена у двух из 10 испытанных пробиотических культур. Кроме того, в прототипе отсутствовует активность в отношении В.АТСС 6633 у.127. В предлагаемом варианте выявлена у всех пробиотических культур повышенная активность в отношении .и . . (зоны Таблица 2 Антагонистичекская активность пробиотических бактерий при росте в питательной среде с виноградными выжимками подавления роста 38-43 мм по сравнению с 10-24 мм в противопоставляемом способе). Установлено также значительное повышение антагонистической активности у .Б-3 и ассоциаций А и П,выращенных в среде с добавкой виноградных выжимок, в отношенииВ 5. Устойчивость к исследованным антибиотикам выявлена у всех пробиотических культур,выращенных как в питательной среде с ферментированными выжимками из столовой свеклы, так и с виноградными выжимками. Таким образом, добавка в питательную среду виноградных выжимок способствует повышению у выращенных в ней пробиотических микроорганизмов антагонистической активности и спектра действия. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ повышения антимикробной активности у пробиотических микроорганизмов, включающий выращивание антагонистически активных штаммов с использованием стимуляторов роста,отличающийся тем, что в питательную среду для выращивания бактерий добавляют 10-20 г/л виноградных выжимок.