Антивирусное средство с вирусингибирующей и иммуностимулирующей активностью

(51) 61 36/48 (2011.01) 61 31/16 (2011.01) 61 37/04 (2011.01) 12 1/92 (2011.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ вирусов гриппа различных штаммов и усиления специфического противовирусного иммунитета. Сущность изобретения заключается в получении спиртовых экстрактов из растенийи, содержащих дубильные вещества гидролизуемого и конденсированного типов в соотношении 11, в количестве не менее 6 от сухой массы экстракта и ксантонов в количестве не менее 0,9 от сухой массы экстракта, их лиофильном высушивании и смешивании в соотношении 21. Преимущество предлагаемого изобретения заключается в большей эффективности антивирусного действия против различных штаммов вируса гриппа по сравнению с имеющимися коммерческими антивирусными препаратами,наличии у растительного антивирусного средства на основе экстрактов растенийи иммуностимулирующей активности,отсутствии токсичности в вирусингибирующих дозах,отсутствии резистентности у вирусов гриппа к новому антивирусному средству, доступности сырья для получения препарата. Предлагаемое антивирусное средство выделено из растения флоры Казахстана,позволяет расширить арсенал противогриппозных препаратов и может быть использовано в качестве импортозамещающего противовирусного препарата.(72) Богоявленский Андрей Павлинович Березин Владимир Элеазарович Зайцева Ирина Алексеевна Коротецкий Илья Сергеевич Алексюк Павел Геннадьевич Ембергенова Айжан Акбаевна Соколова Надежда Сергеевна(73) Республиканское государственное предприятие на праве хозяйственного ведения Институт микробиологии и вирусологии Комитета науки Министерства образования и науки Республики Казахстан(56) Предварительный патент РК 9514, кл. 07 307/93, 2000(57) Использование медицина, в частности,вирусология,а именно разработка новых противовирусных препаратов Цель применение в медицинской и ветеринарной практике антивирусного средства с иммуностимулирующей активностью на основе смеси лиофильно высушенных экстрактов растенийив соотношении 21 для подавления размножения Изобретение относится к области медицины, в частности вирусологии, а именно разработке новых противовирусных препаратов. Инфекционные заболевания входят в тройку основных причин гибели людей и животных. Доля вирусных заболеваний в структуре инфекционной патологии в Республике Казахстан составляет более 90, а суммарный экономический ущерб от гриппа и ОРЗ достигает не менее 85,5 от общих потерь вследствие инфекционных заболеваний. Формирование иммуносупрессивного состояния организма при заболеваниях вирусной этиологии требует сочетания противововирусного эффекта терапевтических соединений с повышением иммунологической резистентности организма. В качестве лечебных средств против вируса гриппа используются синтетические химиопрепараты и вещества растительного происхождения. Наиболее известным синтетическим лекарственным средством против вируса гриппа является гидрохлорид -метил 1-адамантилметиламина (ремантадин). Препарат обладает противовирусной активностью в отношении различных штаммов вируса гриппа А(Лекарственные средства,применяемые в медицинской практике в СССР под ред. М.А. Клюева.-М. Медицииа, 1991, с.512). Однако,длительное использование ремантадина в медицинской практике привело к появлению большого количества устойчивых к нему штаммов вируса гриппа, вследствие чего применение данного препарата стало малоэффективным. Известен ингибитор нейраминидазной активности тамифлю,обладающий противовирусной активностью в отношении различных штаммов вируса гриппа (Патент 5763483, фирмапо лицензии, .,353,,94404). Использование тамифлю в медицинской практике,привело к появлению большого количества устойчивых к нему штаммов вируса гриппа,вследствие чего применение данного препарата стало малоэффективным. Известен ингибитор гемагглютинирующей активности - аналог изоникотиновой кислоты амизон, обладающий противовирусной активностью в отношении различных штаммов вируса гриппа(Патент 6752). Однако, данный препарат,обладает относительно низкой активностью в отношении вируса гриппа. Известен этанольный экстракт, содержащий флавоноиды, из растения,который способен активировать иммунный ответ и подавлять репродукцию вирусов (Патент , заявка 99108701/14, Шульц Э.Э., Толстиков Г.А., Петрова Т.Н., Толстикова Т.Г., Покровский А.Г., Ильичева Т.П., Проняева Т.Р.). Недостатками данного препарата является относительно низкая иммуностимулирующая и антивирусная активность. Известно антивирусное средство растительного происхождения биологически активный флавоноидный агликон, выделенный из растения. Данный препарат получают с 2 помощью переэкстракции надземной части растения серным эфиром и последующим разделением на колонке с силикагелем. Флавоноидный агликон обладает антивирусной активностью в отношении вируса гриппа(Адекенов С.М.,Кульмагамбетова Э.А., Прибыткова Л.Н. п-патент РК 9514). Вместе с тем, эффективность данного препарата является относительно невысокой,вирусингибирующее действие проявляется не ко всем исследованным штаммам вируса гриппа. Последний препарат растительного происхождения является наиболее близким аналогом по отношению к заявляемому антивирусному средству. Таким образом, известные антивирусные средства обладают рядом недостатков - они являются недостаточно эффективными, требуют использования дополнительных препаратов для снятия иммунодепрессивного состояния, что ограничивает возможность их применения в медицинской практике. Вследствие этого, имеется необходимость разработки новых, более активных, малотоксичных препаратов,сочетающих антивирусные и иммуностимулирующие свойства, к которым не имеется устойчивости со стороны штаммов вируса гриппа. Целью изобретения является создание нового малотоксичного антивирусного средства растительного происхождения, эффективного в отношении различных штаммов вируса гриппа и обладающего иммуностимулирующими свойствами. Данная цель достигается путем приготовления растительного препарата в виде смеси лиофильно высушенной фракции экстрактов, полученных из растенийи. Сущность изобретения заключается в получении спиртовых экстрактов из растенийи, их лиофильном высушивании и смешивании в соотношении 21. Полученный растительный препарат способен эффективно подавлять размножение различных штаммов вируса гриппа и обладает иммуностимулирующей активностью. Препарат представляет собой аморфный порошок буровато-коричневого цвета с вкраплениями более темных частиц, со слабым специфическим запахом. Гигроскопичен, при хранении комкуется. Растворим в воде очищенной, 50 растворе ацетона, 30 растворе кислоты уксусной и 10 растворе натрия гидроксида, мало растворим в эфире диэтиловом,практически нерастворим в бензоле, хлороформе и спирте этиловом 95 . Подлинность препарата подтверждается с помощью трех реакций а) от действия раствора аммиака и 10 раствора натрия фосфорномолибденовокислого в кислоте хлороводородной 10 появляется синее окрашивание (арбутин) б) от действия раствора аммиака окраска исходного раствора углубляется до желто-коричневой (флавоноиды) в) от действия 1 раствора квасцов железо-аммониевых появляется черно-синее окрашивание Сущность изобретения поясняется на следующих примерах. Пример 1 Для получения препарата из растенийи, корнии травуотдельно размалывают на дробилке до размеров частиц 3-5 мм. Содержание пыли не должно превышать 20. Измельченное сырье подвергают водно-спиртовой экстракции путем обработки 50 водным этанолом при температуре кипения растворителя. Полученные экстракты упаривают на ротационном пленочном испарителе при температуре 60-70 С и остаточном давлении 0,2-0,4 кгс/см 2. Упаренные экстракты высушивают в вакуумвыпарном аппарате при постоянном перемешивании при температуре 50-60 С и разряжении 0,6-0,7 кгс/см 2. Полученные высушенные экстракты смешивают в соотношении 21. Препарат представляет собой смесь экстрактов растенийив соотношении 21. Пример 2 Для качественного и количественного контроля подлинности и стандартизации экстрактовииспользуют стандартные методы по определению содержания основных компонентов - дубильных веществ гидролизуемого и конденсированного типа дляии содержания ксантонов для. Определение дубильных веществ гидролизуемого и конденсированного типа 1,0 г (точная навеска) препарата, помещают в колбу вместимостью 100 мл и экстрагируют 50 мл спирта этилового 50,при интенсивном встряхивании в течение 15 минут. Экстракт фильтруют через ватный тампон в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора спиртом этиловым 50 до метки и перемешивают. 5 мл полученного раствора помещают в пробирку для центрифугирования, прибавляют 5 мл реактива осаждения. Через 30 мин смесь центрифугируют при скорости 3000 об/мин в течение 30 мин. Надосадочную жидкость сливают, к осадку в пробирке прибавляют 10 мл 0,025 раствора аммиака, содержимое перемешивают стеклянной палочкой, которую промывают 5 мл 0,025 раствора аммиака, прибавляя его к основному объему, и центрифугируют в тех же условиях. После центрифугирования надосадочную жидкость сливают, осадок в пробирке растворяют в 3 мл 30 раствора кислоты уксусной, количественно переносят в колбу вместимостью 250 мл с помощью 80-100 мл воды очищенной, нейтрализуют 25 мл 5 раствора натрия гидрокарбоната, прибавляют 0,5 мл индикатора ксиленолового оранжевого и титруют 0,01 М растворомдинатриевой соли этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) до желтого окрашивания. Содержание дубильных веществв препарате,в пересчете на танин, в процентах, вычисляют по формуле где 0,0013 - количество танина, соответствующее 1 мл 0,01 М раствора динатриевой соли ЭДТА, в граммах К - поправочный коэффициент к молярности 0,01 М раствора динатриевой соли ЭДТА- объем раствора динатриевой соли ЭДТА,израсходованного на титрование, в миллилитрах- масса навески препарата, в граммах. Содержание дубильных веществ в экстракте растения должно быть не менее 6. Определение ксантонов Для количественной характеристики сырья на наличие ксантонов аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 2 мм. Около 5 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в колбу вместимостью 250-300 мл, прибавляют 150 мл 60 спирта, содержащего 5 хлористоводородной кислоты, взвешивают, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение трех часов. После охлаждения до комнатной температуры колбу вновь взвешивают и доводят до первоначальной массы тем же спиртом. Содержимое колбы фильтруют через воронку диаметром 70 мм с бумажным фильтром в колбу вместимостью 250 мл, отбрасывая первые 5 мл фильтрата 2 мл фильтрата вносят в колонку с полиамидным сорбентом. Колонку промывают водой(50 мл) со скоростью 3,5-4 мл в минуту, водный элюат отбрасывают. Сумму ксантонов элюируют 50 мл 95 спирта, контролируя их продвижение в видимом и УФ - свете по желтой зоне. При достижении зоной нижней части сорбента элюат этой зоны собирают в мерную колбу вместимостью 50 мл. Объем элюата доводят до метки 95 спиртом и тщательно перемешивают. К 5 мл элюата прибавляют 5 мл спиртового раствора алюминия хлорида (0,05 моль/л) и через 1520 мин измеряют оптическую плотность на спектрофотометре при длине волны 410 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм на фоне контрольного опыта. Параллельно измеряют оптическую плотность раствора Государственного стандартного образца(ГСО) алпизарина в смеси со спиртовым раствором алюминия хлорида (0,05 моль/л). Содержание суммы ксантонов в пересчете на алпизарин в абсолютно сухом сырье в процентахвычисляют по формуле где- оптическая плотность исследуемого раствора 0 - оптическая плотность раствора ГСО алпизарина 0 - масса ГСО алпизарина в граммах- масса сырья в граммах- потеря в массе при высушивании сырья в процентах. Сумма ксантонов в пересчете на алпизарин должна быть не менее 0,9. Примечания. 1. Приготовление сорбента 300 г гранул полиамида помещают в колбу вместимостью 5 л,приливают 1,5 л концентрированной уксусной кислоты и нагревают на электрической плитке с закрытой спиралью до полного растворения гранул. Полученный раствор охлаждают. Выпавший осадок отфильтровывают на воронке Бюхнера под вакуумом и промывают водой до нейтральной реакции. Промытый и отфильтрованный полиамид помещают в круглодонную колбу вместимостью 3 л,прибавляют 1,65 л 80 спирта и кипятят на водяной бане с обратным холодильником в течение 1 ч. Выпавший осадок отфильтровывают на воронке Бюхнера под вакуумом, осадок промывают 1,5 л ацетона. Полученный полиамид сушат в вытяжном шкафу в течение 30-40 мин, после чего протирают щеткой через сито с отверстиями диаметром 1 мм. Полученный продукт рассыпают на пергаментную бумагу и сушат на воздухе в течение 10 ч. Готовый полиамид хранят в стеклянных банках с притертой пробкой. Срок хранения - 3 года. 2.Приготовление колонки 1,5 г полиамидного сорбента помещают в стаканчик вместимостью 50 мл, прибавляют 30 мл воды, перемешивают и переносят взвесь в колонку диаметром 2 см, высотой 28 см, с пористым стеклянным фильтром и помещенным на него ватным тампоном,предварительно смоченным водой. Колонку заполняют при открытом спускном кране, сливают воду, оставив столб воды 1 см над сорбентом. 3.Приготовление раствора Государственного стандартного образца (ГСО) алпизарина около 0,05 г(точная навеска) Государственного стандартного образца алпизарина (в пересчете на 100 вещество) растворяют в смеси ацетон - вода(11) в мерной колбе вместимостью 100 мл 1 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят объем раствора 95 спиртом до метки. Срок хранения - 1 мес. 4.Проведение контрольного опыта колонку с полиамидом, подготовленную как указано выше,промывают 50 мл воды со скоростью 3,5-4 мл в 1 мин. Водный элюат отбрасывают и колонку промывают 50 мл 95 спирта, который собирают в мерную колбу вместимостью 50 мл, затем доводят объем элюата спиртом до метки и перемешивают. 5. Приготовление спиртового раствора алюминия хлорида (0,5 моль/л) 12,5 г алюминия хлорида помещают в мерную колбу вместимостью 1 л, растворяют в 95 спирте и доводят объем раствора тем же спиртом до метки. Пример 3 Для изучения токсичности антивирусного средства, содержащего смесь экстрактов растенийив соотношении 21, испытание проводят на двух видах животных белых мышах обоего пола, массой 1820 г, и крысах обоего пола, массой 250-350 г. В исследованиях должны быть использованы здоровые животные, содержащиеся в соответствии с 4 действующими правилами, на которых ранее не проводили какие-либо испытания. Массу животных определяют в день начала испытания. Испытание на белых мышах. Препарат вводят внутрибрюшинно 5-ти животным в дозе, равной 100 мг на кг веса. Сухой препарат растворяют соответствующим растворителем(стерильный физиологический раствор) в объеме не более 0,5 мл. Испытание на крысах. Препарат вводят подкожно 2 животным в дозе 100 мг на кг веса. Сухой препарат растворяют соответствующим растворителем(стерильный физиологический раствор) в объеме не более 0,5 мл. Препараты вводят стерильным шприцем,погрешность измерения которого не должна превышать 4. Наблюдение за животными осуществляют ежедневно в течение 7 сут. Препарат считают выдержавшим испытание,если-в течение периода наблюдения все животные остались живы и ни у одного из них не были выявлены видимые признаки заболевания-масса каждого животного в день окончания наблюдения не уменьшилась по сравнению с исходной-ни у одной крысы, получившей препарат подкожно, не развился некроз или абсцесс в месте введения. Если в течение периода наблюдения регистрируют гибель, заболевание, уменьшение массы, развитие некроза или абсцесса в месте введения хотя бы у одного животного, испытание должно быть повторено на удвоенном количестве животных того же вида. Повторное испытание считают удовлетворительным, если препарат отвечает вышеперечисленным требованиям. Экспериментально установлено (табл. 1), что в дозе до 100 мг на кг веса антивирусное средство из экстрактов растенийив соотношении 21 не обладает острыми токсическими свойствами. Пример 4 Изучение вирусингибирующей активности антивирусного средства из экстрактовив соотношении 21 проводят на модели вируса гриппа А, штамм///30. Вирус выращивают в аллантоисной полости 9-10 дневных куриных эмбрионов в течение 24-36 часов при 37 градусах Цельсия. Гемагглютинирующую активность вирусов определяют по стандартной методике с использованием 1-ной взвеси куриных эритроцитов. Подавление репродукции вируса определяют при одновременном инокулировании в куриные эмбрионы исследуемого препарата в разных дозах и вируса в количестве 100 ЭИД 50 с последующим определением титра гемагглютинации. Антивирусную активность испытуемого препарата сравнивают с антивирусной активностью коммерческих противовирусных препаратов тамифлю и амизон. Статистическую обработку материала осуществляют с помощью критерия Стьюдента. Экспериментально установлено (табл. 2), что в интервале доз 0,5-5 мг на кг веса антивирусное средство из экстрактов растенийив соотношении 21 полностью подавляет репродукцию исследуемого вируса. На модели штамма вируса гриппа ///30 показано, что вирусингибирующая активность антивирусного средства на основе экстрактов растенийив соотношении 21 в дозе 0,5, 5 и 50 мг на кг веса превышает вирусингибирующую активность коммерческого препарата амизон, и сопоставима с вирусингибирующей активностью коммерческого препарата тамифлю. Таким образом антивирусное средство на основе экстрактов растенийи в соотношении 21 проявляет выраженный вирусингибирующий эффект в дозе превышающей 5 мг на кг веса на модели штамма вируса гриппа А, штамм ///30. Пример 5 Изучение вирусингибирующей активности антивирусного средства из экстрактовив соотношении 21 проводят на модели вируса гриппа А, штамм А/малая поганка/Алаколь/791/04. Вирус выращивают в аллантоисной полости 9-10 дневных куриных эмбрионов в течение 24-36 часов при 37 градусах Цельсия. Гемагглютинирующую активность вирусов определяют по стандартной методике с использованием 1-ной взвеси куриных эритроцитов. Подавление репродукции вируса определяют при одновременном инокулировании в куриные эмбрионы исследуемого препарата в разных дозах и вируса в количестве 100 ЭИД 50 с последующим определением титра гемагглютинации. Антивирусную активность испытуемого препарата сравнивают с антивирусной активностью коммерческих противовирусных препаратов тамифлю и амизон. Статистическую обработку материала осуществляют с помощью критерия Стьюдента. Экспериментально установлено (табл. 3), что в интервале доз 0,5-5 мг на кг веса антивирусное средство из экстрактов растенийив соотношении 21 полностью подавляет репродукцию исследуемого вируса. На модели штамма вируса гриппа А/малая поганка/Алаколь/791/04 показано,что вирусингибирующая активность антивирусного средства на основе экстрактов растенийив соотношении 21 в дозе 0,5, 5 и 50 мг на кг веса превышает вирусингибирующую активность коммерческого препарата амизон,и сопоставима с вирусингибирующей активностью коммерческого препарата тамифлю. Таким образом антивирусное средство на основе экстрактов растенийи в соотношении 21 проявляет выраженный вирусингибирующий эффект в дозе превышающей 5 мг на кг веса на модели штамма вируса гриппа А,штамм А/малая поганка/Алаколь/791/04. Пример 6 Изучение вирусингибирующей активности антивирусного средства из экстрактовив соотношении 21 проводят на модели вируса гриппа А, штамм А/крачка/Южная Африка/1/61. Вирус выращивают в аллантоисной полости 9-10 дневных куриных эмбрионов в течение 24-36 часов при 37 градусах Цельсия. Гемагглютинирующую активность вирусов определяют по стандартной методике с использованием 1-ной взвеси куриных эритроцитов. Подавление репродукции вируса определяют при одновременном инокулировании в куриные эмбрионы исследуемого препарата в разных дозах и вируса в количестве 100 ЭИД 50 с последующим определением титра гемагглютинации. Антивирусную активность испытуемого препарата сравнивают с антивирусной активностью коммерческих противовирусных препаратов тамифлю и амизон. Статистическую обработку материала осуществляют с помощью критерия Стьюдента. Экспериментально установлено (табл. 4), что в интервале доз 0,5-5 мг на кг веса антивирусное средство из экстрактов растенийив соотношении 21 полностью подавляет репродукцию исследуемого вируса. На модели штамма вируса гриппа А/крачка/Южная Африка/1/61 показано,что вирусингибирующая активность антивирусного средства на основе экстрактов растенийив соотношении 21 в дозе 0,5, 5 и 50 мг на кг веса превышает вирусингибирующую активность коммерческого препарата амизон,и сопоставима с вирусингибирующей активностью коммерческого препарата тамифлю. Таким образом антивирусное средство на основе экстрактов растенийи в соотношении 21 проявляет выраженный вирусингибирующий эффект в дозе превышающей 5 мг на кг веса на модели штамма вируса гриппа А, штамм А/крачка/Южная Африка/1/61 Пример 7 Иммуностимулирующую активность антивирусного средства определяют на модели инактивированной вакцины вируса гриппа штамм/тн//6.2/2009(51) при использовании белых беспородных мышей. Мышей иммунизируют следующими препаратами 1. Инактивированной вакциной вируса гриппа/тана//6.2/2009(51). 2. Инактивированной вакциной вируса гриппа/тн//6.2/2009(51) в смеси с адъювантом гидроокись алюминия. 3. Инактивированной вакциной вируса гриппа/стана//6.2/2009(51) в сочетании с антивирусным средством на основе экстрактов из растенийив соотношении 21 в дозе 15 мкг/животное. 4. Плацебо (стерильный физиологический раствор). Оценку иммуностимулирующей активности осуществляют при подкожной иммунизации мышей инактивированной гриппозной вакциной в дозе 7,5 мкг гемагглютинина на животное с растительным препаратом. Титр специфических антител в сыворотках мышей определяют методом ИФА через две недели после 2-ой иммунизации. При сравнительном изучении индукции специфическихантител при иммунизации животных инактивированной вирусной вакциной в сочетании с растительным антивирусным средством в дозе 15 мкг на животное установлено, что препарат на основе экстрактов растенийив соотношении 21 обладает(фиг. 1). Титры антител в сыворотках мышей после иммунизации инактивированной вакциной вируса гриппа /стана//6.2/2009(5) в сочетании с растительным антивирусным средством в 8 раз превышают тигры антител после иммунизации этой же инактивированной вакциной без адъюванта и в 4 раза превышают уровень антител после иммунизации вакциной в сочетании с адъювантом - гидроокись алюминия. Преимущество предлагаемого изобретения заключается в большей эффективности антивирусного действия против различных штаммов вируса гриппа по сравнению с имеющимися коммерческими антивирусными препаратами,наличии у растительного антивирусного средства на основе экстрактов растенийи иммуностимулирующей активности,отсутствии токсичности в вирусингибирующих дозах,отсутствии резистентности у вирусов гриппа к новому антивирусному средству, доступности сырья для получения препарата. Предлагаемое антивирусное средство позволяет расширить арсенал противогриппозных препаратов. Таблица 1 Изучение токсичности антивирусного средства на основе экстрактов растенийиисследование Токсичность на мышах Токсичность на крысах(подкожное введение) 50 100 50 100 Гибель животных 0/5 0/5 0/2 0/2 Некроз или абсцесс 0/5 0/5 0/2 0/2 Контроль - стерильный 0/5 0/2 фосфатный буфер (рН 7,2) ПримечаниеВ числителе дано количество погибших животных или имеющих некроз, в знаменателе - количество животных, получивших препарат. Летальность учитывалась в течение 7 суток после введения препаратов.Доза препарата в мг/ кг животное Таблица 2 Подавление репродукции вируса гриппа штамм / //30 под действием антивирусного средства на основе экстрактов растенийиколичество препарата Подавление репродукции вируса(мг на кг веса) тамифлю амизон антивирусное средство изив соотношении 21 0,5 20,0 1,2 0,0 0,0 100,00,0 5 100,00,0 0,0 0,0 100,0 0,0 50 100,00,0 60,05,8 100,0 0,0 Таблица 3 Подавление репродукции вируса гриппа штамм А/малая поганка/Алаколь/791/04 под действием антивирусного средства на основе экстрактов растенийиколичество препарата Подавление репродукции вируса(мг на кг веса) тамифлю амизон антивирусное средство изив соотношении 21 0,5 20 1,2 0,0 0,0 100,00,0 5 40,02,4 0,0 0,0 100,00,0 50 80,05,8 20 1,2 100,0 0,0 Таблица 4 6 Подавление репродукции вируса гриппа штамм А/крачка/Южная Африка/1/61 под действием антивирусного средства на основе экстрактов растенийиколичество препарата Подавление репродукции вируса(мг на кг веса) тамифлю амизон антивирусное средство изив соотношении 21 0,5 20 1,2 0,0 0,0 100,0 0,0 5 40,02,4 0,0 0,0 100,00,0 50 80,05,8 20 1,2 100,0 0,0 иммуностимулирующими свойствами используется ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ смесь лиофильно высушенных экстрактов растений Антивирусное средство растительногоив происхождения с иммуностимулирующей соотношении 21, содержащая дубильные вещества активностью, обладающее вирусингибирующей гидролизуемого и конденсированного типов в активностью в отношении различных штаммов соотношении 11, в количестве не менее 6 от вируса гриппа и способностью стимулировать сухой массы экстракта и ксантоны в количестве не гуморальный иммунитет, отличающееся тем, что в менее 0,9 от сухой массы экстракта. качестве антивирусного средства с