Антиоксидантное средство

(51) 61 36/43 (2006.01) 09 15/34 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН(57) Изобретение относится к области медицины, а именно к растительным препаратам, обладающим антиоксидантной активностью и используемых в последующем для ингибирования процессов перекисного окисления липидов в организме за счет связывания появляющихся в клетках активных свободных радикалов.(72) Жусупова Айжан Избасаровна Мурзахметова Майра Кабдраушевна 25032 Изобретение относится к медицине, а именно к средству с антиоксидантной активностью, которое можно использовать для лечения заболеваний, в патогенезе которых идет усиление перекисного окисления липидов (ПОЛ), вызывающего изменение функциональной активности биологических мембран с образованием в их липидном слое гидрофильных каналов, резко нарушающих их проницаемость, а также с инактивацией ряда ферментов, приводящей к изменению липидбелковых взаимодействий и к другим необратимым последствиям в организме. Известен лекарственный препарат силибор,обладающий антиоксидантной активностью. В качестве активного компонента содержит сухой экстракт из плодов расторопши пятнистой () в количестве 40 мг Машковский М.Д. Лекарственные средства. - М. ООО Новая волна,2005. - 1200 с. Недостатком этого средства является то, что оно в процессе лечения продуциру.т кожные аллергические реакции. Известен-токоферол витамин Е,распространенный в растениях и широко используемый в медицине в качестве антиоксиданта для лечения и профилактики многих заболеваний. Антиоксидантная функция витамина Е заключается в способности ингибировать процесс ПОЛ связыванием появляющихся в клетках активных свободных радикалов. Недостатком этого средства является то, что необходимо соблюдать осторожность при применении витамина Е больным с тяжелым кардиосклерозом и инфарктом миокарда, а также его нерастворимость в воде и вследствие этого возможность накопления в организме до токсичных концентраций при его передозировке /М.Д. Машковский. Лекарственные средства. Пособие для врачей. М., 2001 с. 90-91 А. Райлс, К. Смит, Р. Уорд. Основы органической химии. М Мир, 1983,с. 294, 300/. Задачей изобретения является расширение ассортимента лекарственных препаратов,обладающих антиоксидантной активностью. Поставленная задача достигается получением растительной субстанции, представляющей собой сухой экстракт, получаемый из. Оптимальными условиями извлечения субстанции из стеблей и цветковпри двукратной повторности исследуемых серий опытов являются 10-ти часовая их экстракция восьмикратным избытком 50 этанола при температуре 20-23 с последующим концентрированием полученного экстракта досуха по простой, экономичной и экологически безвредной технологии,не требующей специального оборудования. Выход 19-22. Методами бумажной и тонкослойной хроматографии с применением аутентичных образцов в субстанции установлено наличие сахарозы и фруктозы, пирокатехина, кверцетина и рутина,кофейной кислоты. Количественное содержание флавоноидов в субстанции в пересчете на кверцетин составило 4.23. Влажность и общая 2 зола исследуемого растительного материала составляют 2.57 и 5.4 соответственно. Высокое процентное содержание золы, нерастворимой в 10 НС (19.4), указывает на высокий уровень минерализации исходного сырья, однако данный показатель не превышает таковой для некоторых фармакопейных объектов. Содержание незаменимых аминокислот - 28.09, ненасыщенных жирных кислот - 80. Содержание тяжелых металлов, и в первую очередь, свинца и кадмия не превышают норм, предъявляемых к их наличию в лекарственной субстанции. Субстанция содержит в достаточных количествах все необходимые микроэлементы,но отличается высоким содержанием , К и . Таким образом, в субстанции,получаемой из растения С.,содержится значительное количество флавоноидов, ненасыщенных кислот жирного ряда,незаменимых аминокислот и разнообразные микроэлементы и их синергичное действие, повидимому,и определяет антиоксидантную активность исследуемой субстанции. Для определения интенсивности ПОЛ навеску(1.0 г) ткани печени крыс (белые лабораторные взрослые) после промывания в охлажденном физиологическом растворе помещали в 10 мл среды,содержащей 0.85 и 50 мМ КН 2 РО 4, (рН 7.4 при 4) и гомогенизировали гомогенизатором типа в течение 90 сек. Гомогенат центрифугировали при 10 000(5 тыс. об/мин) в течение 20 мин. Микросомную фракцию получали,центрифугируя супернатант при 30000 об./мин в течение 60 мин. Надосадочную жидкость осторожно сливали и осадок, представляющий собой фракцию микросом, суспендировали в среде, содержащей 25 глицерин, 0.1 мМ ЭДТА, 0.2 мМ СаС 2, 10 мМ гистидин, (рН 7.2 при 4) и хранили при -4. Полученный этанольный экстракт изинкубировался с микросомами печени в течение 15 минут при 37. Накопление продуктов ПОЛ (малоновый диальдегид, МДА) в гомогенате тканей и субклеточных фракциях оценивали по реакции с 2-тиобарбитуровой кислотой (ТБК) и определяли по интенсивности развивающейся окраски ( .,.,К. 1979, 95, 351). ПОЛ в мембранах индуцировали системой 2(0.02 мМ)аскорбат(0.5 мМ), инкубируя исследуемые образцы при 37 в среде, содержащей 100 мМ , 2.5 мМ имидазола (рН 7.1) и через определенные интервалы времени от 0 до 60 мин отбирали пробы. Оптическую плотность измеряли при 532 нм. Расчет содержания продуктов, реагирующих с ТБК,проводили с учетом коэффициента молярной экстинкции МДА, равного 1,56105-1 см-1. Показано, что с увеличением концентраций препаратов (от 10 до 200 мкг) уменьшается накопление продуктов ПОЛ в микросомах печени крыс. Этанольный экстракт не влиял на накопление соединений, взаимодействующих с ТБК без индукции ПОЛ, в то время как при 60-минутной индукции ПОЛ системой 2 аскорбат,увеличивающаяся концентрация экстракта(20-100 мкг экстракта/мг белка) ингибировала накопление малонового диальдегида в микросомах печени крыс, снижая его содержание с 17.4 нМ в контроле до 2.7 нМ для 50 этанольного экстракта. Сравнительное изучение антиоксидантных свойств этанольного экстракта С. с таковыми токоферола, показало, что их эффективность против ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Применение экстракта из стеблей и цветков