Способ определения состояния иммунной системы животных

ше, чем у здорового человека, то абсолотное число Т-лимфоцитов в его крови нормально. Метод очень сложен,требует дефицитных препаратов.2. Реакция бласттрансФормациилимфоцитов под влиянием ФГА или в миксткультуре. При некоторых иммунодефицитах угнетение реакции бласттрансформации свидетельствует не о снижении уровня Т-лимфоцитов крови, а обупюютмихфшюшшыжюйаг тивности. Способ очень сложный и требует дефицитных компонентов.3. Постановка кожных реакций гиперчувствительности замедленного типа на широко распространенные анти гены (туберкулин, трихофитин и др.).Негативные реакции не могут служить доказательством неполноценности Тсистемы иммунитета, так как организм может быть не сенсибипизирован к используемым препаратам Наличие положительной реакции отражает наличие в организме специфического антигена. Реакция на туберкулин - наличие туберкулезной инфекции, реакция на меллеин - наличие сапа, реакцияна бруцеллин, бруцеллолизат, бруцеллогидролизат - наличие бруцеллеза. Эти реакции не могут быть использованы для определения состояния иммуннойд, Контактная аллергия к динитрохлорбензолу (ДНХБ). Эта реакция не является строго специфической, до некоторой степени эта реакция может служить методом,оценки способности организма развивать гиперчувствительность замедленного типа, функциональную активность Т-системы иммунитета. Наносить этот препарат нужно два раза. Только при повторном нанесении препарата происходит кожнаяОднако использование известных способов нецелесообразно, т.к. вследствие своей сложности, необходимости использования дорогих, остродефицитных препаратов и оборудования,они не доступны практическим врачам и требуют их дополнительной стажировки. Кроме того, известные способы не обеспечивают требуемой точности, т.к. проводятся 1 п чйсго, акультура клеток, как известно, дает очень ограниченное представление о сложных процессах, происходящих в организме. Ввиду того, что исследо 4вания в области клеточной иммунологии проводятсн повсеместно, получаемые иногда противоречивые результаты довольно скоро получают объяснения. Они возникают вследствие различия между процессами 1 пч 1 то иТак среди известных решений заявителем не обнаружено решение со сходньши признаками, заявляемый способ определения состояния иммунной системы организма животных обладает существенными отличиями.1, Способ определения состояния иммунной системы проводится на самом организме, а не в культуре клеток, что характеризует заявленный способ как наиболее точный.2. Известный способ оценки Т-системы иммунитета на самом организме,кроме приведенных доводов,существенно отличает заявленный способ, вопервых, в том, что определение состояния иммунной системы проводится не на сенсибилизированных животных и, во-вторых, тем, что способ осуществляется введением в организм не антигенов, а антител.Заявленный способ осуществляется в следующей последовательности.1. Получение тимусного антигена,У животных определенного вида-(новорожденных поросят или до двухмесячного возраста) вырезают тимус, отмывают от крови в растворе Хенкса,среда 199, затем гомогенизируют.2, Приготовление гипериммунной сыворотки. Кроликов иммуниэируют приготовленным тимусным антигеном трехкратно, внутривенно, с промежутком в 7 дней. Через 7 дней после последней инъекции у кроликов из сердца берут кровь, получают сыворотку. Консервируют сыворотку следующим обра зом карболовой кислоты 5 г, глице рина 15 мл, физиологического раствора 85 мл, в соотношении 110. Консервированную сыворотку разливают3. Проверка приготовленной гипериммунной сыворотки - тимусного аллергена. Проверку проводят на стерильность и активность. Проверку на стерильность проводят путем посева приготовленной сыворотки на МПА, среду Китт-Тароцци и на агар Сабуро. Среды должны оставаться стерильны 3919 5ми) Йроверку на активность по реак ции преципитации. Для определения активности по реакции преципитации Сыворотку разводят физиологическим раствором 11, 12, 1 д, 18, 16,. 132, 16 Ч и соединяют со специфическим антигеном -тимусным антигеном. Титром сыворотки считается наибольшее разведение сыворотки, которое дает положительную реакцию пре.ципитации.д Учет реакции на тимусный ал лерген. Учет проводят через 3 и 6 чпосле введения аллергена внутрикожно за ухом поросенка. Предварительно, до введения тимусного аллергена иэмерют штангенциркулем толщину кожной складки за ухом. Через 3 и 6 ч после введения аллергена вторично измеряют толщину кожной складки в области введения аллергена. От полученной цифры вычитают первоначальную цифру, указывающую на тогщину кожной складки, и расценивают попученную цифруреакция более 7 мм Положительная от Ц до( 3 7 мм Слабо положитель- от 2.до Ная ( ) 3 мм Сомнительная ( ) от 1 до 2 мм Отрицательная нет разницы. ми,указывающими на толщину кожной складки до и после введения аллергена.Целью изобретения является способ определения состояния иммунной системы организма животных, который не вовлекает в бурную реакцию весь организм, проявляется местной кожной реакцией гиперчувствительности замедленного типа, осуществляемой на самом организме, а не 1 п ч 1 коДЛЯ ОРГЭНИЗМЭ ЯВЛЯеТСЯ безвредным, не требует дорогостоящего оборудования и дефицитных компонентов реакции, является простым, дешевым, доступным каждому практическому детермнарному врачу.Поставленная цель достигается тем, что у поросят (в возрасте 160 дней) вырезается тимус, отмывается от крови, гомогенизируется Полуценный тимусный антиген вводится кроликам внутривенно с промежуткомв 7 дней, трехкратно и после последней инъекции через 7 дней у кроликов из сердца берется кровь. Полученная гилериммунная сыворотка (содержащая антитела против тимуса) консервируется, проверяется на стерильностьи активность и используется в качестве аллергена на стерильность и активность гиперчувствительности замедленного типа, которая будет отражать состояние иммунной системы организма животных. Учет реакции про водится через 3 и 6 ч после введе НИЯ ЭЛЛЕРГЕНЭ ПУТМ ИЗМЕРЕНИЯ КОЖной складки за ухом поросенка до/йпосле введенияаллергена. Разница между цифрами, указывающими на толщину кожной складки после й до введения аллергена, указывает на интенсивность реакции и обозначаетсяв крестах. Большая интенсивность местной кожной реакции указывает на лучшее состояние иммунной системы организма животного.По сравнению с прототипом заявент ное изобретение характеризуется новыми признаками.1. Новое решение способа определения состояния иммунной системы ор ГЭНИЗМЗ ЖИВОТНЫХ, ПОИНЦИПИЗЛЬНО ОТличающееся от известных тем, что. способ осуществляется на самом органиэме.2. Новый способ приготовления тимусного антигена.3. Новый способ приготовления аллергена (гипериммунная сыворотка кролика), Новая схема гипериммунизации,консервирования испытанияЦ. Новый способ постановки реакции гиперчувствительности замедлен- ного.типа Реакция проводится На несенсибилизированном животном. В качестве аллергена используется не.антиген, а антитела.5 ь Новый способ учета реакции на аллерген по разнице в цифрах, указывающи на толщину кожной складки до и после введения аллергена.Новые признаки отличают заявлент ное решение от известных и обусловливают соответствие его критерию новизна.П р и м е р 1. Оценивали состояние иммунной системы организма поросят спомощью тимусного аллергена в совхозе КаскеленскийТимусный аллерген вводили внутрикожно в дозе 0,1 мл. Перед введением аллергена и после штанген-циркулем измеряли толщину кожной складки за ухом поросенка. Учет реакции проводили через 3 и 6 ч. Реакция оасценивалась по разнице в цифрах измерения толщины кожной складки, полученной после 6 ч и до введения-аллергена. Результат приведен в табл.1.П р и м ер 2. Оценивали состояние иммунной системы поросят-отъемышей в совхозе Ефремовский до введения тимусного аллергена измеряли штанген-циркулем толщину кожной складки за ухом у поросят. После чего тимусный аллерген вводили внутрикожно в дозе 0,1 мл. Реакцию оценивали путем определения разницы цифры измерения кожной складки до И через 6 ч после введения аллергена. Результат представлен в табл.2.Способ определения состояния иммунной системы организма животных с помощью тинусного аллергена оес-Т печивает возможность определения состояния иммунной системы организма даже у новорожденных животных. По сравнению с другими существующими СП 0 собами определения состояния иммун-ной системы организма, которые используются в настоящее время бласттрансформация спонтанных розеток,которые осуществляются йп ч 1 сго, он отличается большей точностью, просто той исполнения, не требует дорого стоящего оборудования, дефицитных реактивов И вообще условий лаборатории, он может быть использован вусловиях любого комплекса или хозяй ства с помощью предложенного нами.алергена гюбым ветеринарным врачом хозяйства, не прошедшего для этого специальной подготовки.По сравнению с известными аллергическими способами (постановка кожных реакций гиперчувствительности замедленного типа на широко распрост.раненные аллергены, контактная ал-. пергия к динитрохлорбензолу - РНХ),способ отличается большей специфичностью, негативные реакции, в отличие от известных способов, служат доказательством неполноценности 1системы организма. Предложенный способ, в отличие от известных, может быть использован для определения состояния иммунной системы у новорожденных животных.По сравнению с прототипом заявленный способ имеет существенные отличия2. Реакция между антигеном и антителом проводится на самом орга низме что делает ее более точной.3. Реакция проводится на несенсибилизированнон организме од для воспроизведения реакции гиперчувссвительности замедленного типа используется не антиген, а анб титела к нему, что создает большую стандартность проводимой реакции. По сравненю с прототипом заяв ленное изобретение характеризуется1. Новый способ приготовления тимусного антигена. П П2 Новый способ приготовления тмусного аллергена.3. Новый способ учета реакции на препарат, обеспечивающий опредегение состояния иммунной системы организма, разработанный авторами настоящей заявкид, Новыйспособ, позволяющий определить состояние иммунной системы организма у новорожденных животных с применением реакции гиперчувствительности замедленного типа.Положительный эффект заявленного М изобретения составляет возможность использования способа определения состояния иммунной системы организма.животных1. для определения и оценки состояния животноводства в хозяйствах или комплексах.2. При ремонте стада и браковке животных.3. При характеристике новых пород животных.5. При прогнозировании продуктивности и устойчивости животных.6. Способ может быть использован практическими врачами для прогноза заболевания и эффективности ветеринарных мероприятий.7. Способ будет полезен исследователям, изучающим действие на орга 3919 9и содержания животных. Д Использование изобретения принесет достаточной экономический эффект, так как позволит создать стадо животных с хорошей резистентностьюНОЙ системы ЖИВОТНЫХ ПО ИММУНОЛОГИЧЗСКО мутыпуотличающийся 1 ем что, с целью повышения точности, в качестве ммунологического теста используют реакциюгиперчувствителье ности замедленного-типа, которую вызывают у животного путем внутрикожного введения ему антител против тимуса.- -ц Возраст Толщина кожной складки, ММ Разница Оценка поросят, 7 - в циФ- реакции день до введения после рах авлертенаТ а б л и ц а 2 ЕР Возраст, Толщина кожной складки, мн Разница Оценка поро день в циФ- реакции сят до после рах