Способ диагностики генитального эндометриоза у девочек-подростков

(51) 01 33/48 (2006.01) 01 33/49 (2006.01) 01 33/53 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ тестостерона и иммунного статуса, для чего определяют показатели содержания СД-8, Тсупрессоров, В-лимфоцитов, глобулина Е и уровень циркулирующих иммунных комплексов, при наличии через 3 часа - оптических структур сферолитов и бороздок - 4-5 в поле зрения, через 24 часа - мелких радиально-лучистых кристаллов - 1-2 и слоистых сферолитов 1-2 в поле зрения, при снижении уровней пролактина и кортизола,повышении уровней ФСГ, ЛГ, эстрадиола,прогестерона, тестостерона, снижении СД-8 Тсупрессоров, повышении зрелых В-лимфоцитов,гиперглобулинемии клеток Е и увеличении уровня циркулирующих иммунных комплексов диагностируют генитальный эндометриоз у девочек. Предлагаемый способ повышает точность диагностики, дает возможность раннего начала лечения с учетом особенностей организма,гормонального статуса и состояния иммунитета у больных ювенильного возраста.(76) Дощанова Айгерим Мжаверовна ,Садуакасова Шынар Мураткызы(56) Предварительный патент РК 10231, кл. 01 21/21, 1999(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ГЕНИТАЛЬНОГО ЭНДОМЕТРИОЗА У ДЕВОЧЕКПОДРОСТКОВ(57) Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии и может быть использовано для диагностики генитального эндометриоза (ГЭ) у девочек-подростков. Способ диагностики генитального эндометриоза у девочек-подростков включает структурнооптическое исследование сыворотки крови, при этом дополнительно осуществляют исследование гормонального статуса, для чего в сыворотке крови определяют содержание гормонов кортизола,пролактина, ФСГ, ЛГ, эстрадиола, прогестерона, 21738 Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии и может быть использовано для диагностики генитального эндометриоза (ГЭ) у девочек подростков. Наметившийся рост общей заболеваемости и, в частности, гинекологической волнует как ученых,так и врачей. По данным многих исследователей у девочек подростков нашей Республики отмечается высокая частота нарушений менструальной функции. Так, по данным некоторых авторов,нарушения менструальной функции были ведущей патологией в пубертате и наблюдались у 22,4 школьниц г. Алматы с различной патологией репродуктивной системы. В среднем по республике дисменорея наблюдается у 17,2 менструирующих девочек в возрасте 14-17 лет, среди которых эндометриоз выявлен в 21,1 наблюдений. Именно поэтому при наличии дисменореи первостепенной задачей является необходимость подтвердить или исключить генитальный эндометриоз, поскольку эта патология впоследствии напрямую связана с бесплодием. Следовательно,ранняя и своевременная диагностика эндометриоза уже в пубертате будет способствовать раннему началу лечения и даст возможность увеличить эффективность терапии бесплодия в дальнейшем. Для решения этой проблемы необходима разработка эффективных способов диагностики эндометриоза с учетом особенностей организма в пубертатном периоде с учетом состояния репродуктивной системы больных ювенильного возраста. Известен способ диагностики генитального эндометриоза у девочек подростков, включающий сбор анамнеза и ректо-абдоминальное или влагалищное исследование. При наличии жалоб на дисменорею, меноррагию, нарушение менструального цикла и изменении размеров яичников(увеличение до менструации и уменьшение после менструации),обнаружении опухолевидного образования в области яичников, имеющего тугоэластическую консистенцию,ограниченную подвижность, болезненность, увеличивающегося перед менструацией, располагающегося кзади от матки - диагностируют эндометриоз яичников. При изменении размеров матки, ее увеличении перед менструацией - диагностируют эндометриоз тела матки (аденомиоз). При уплотнении, напряжении и болезненности крестцово-маточных связок перед менструацией и отсутствии этих изменений после менструации -диагностируют ретроцервикальный эндометриоз.(Л.В. Адамян, В.И. Кулаков, Е.Н. Андреева,Эндометриозы Руководство для врачей.- М.ОАО Издательство Медицина, 2006.- с. 75.) Недостатком данного способа является его невысокая информативность и субъективность оценки, во многом зависящей от опыта и квалификации врача. Известен способ диагностики генитального эндометриоза у девочек подростков, включающий лапароскопию. При наличии кисты яичникане 2 более 12 см, чаще 7-8 см с мелкими красными или синими пятнами со сморщиванием поверхности,спаянной с боковой поверхностью таза или с задним листком широкой связки, с дегтеподобным густым шоколадного цвета содержимым - диагностируют эндометриоидную кисту. При наличии мраморности поверхности матки - диагностируют эндометриоз матки. При наличии белесоватых узелков с геморрагическими вкраплениями на крестцовоматочных связках, подтянутости прямой кишки к крестцово-маточным связкам и к задней стенке матки диагностируют ретроцервикальный эндометриоз.(Л.В. Адамян, В.И. Кулаков, Е.Н. Андреева,Эндометриозы Руководство для врачей.- М. ОАО Издательство Медицина, 2006.- с. 88) Существенным недостатком способа является его инвазивность. Известен способ диагностики генитального эндометриоза у девочек подростков, включающий магнитно-резонансную терапию. Признаки наличия эндометриоза - удлинение времени релаксации Т 1,снижение интенсивности сигнала, наличие очага,который выглядит более темным, а на Т 2 взвешенных изображениях - увеличение времени релаксации сопровождается повышением интенсивности сигнала, и очаг выглядит более светлым.(Л.В. Адамян, В.И. Кулаков, Е.Н. Андреева,Эндометриозы Руководство для врачей.- М. ОАО Издательство Медицина, 2006.- с. 105). Недостатком данного способа является его дороговизна, а также то, что способ не всегда доступен из-за отсутствия соответствующей аппаратуры в клиниках. Наиболее близким к заявляемому является способ диагностики генитального эндометриоза у девочек-подростков, включающий структурнооптическое исследование сыворотки крови. О наличии генитального эндометриоза судят по нарушению последовательности структурообразования. Картина структурообразования оценивается по показателю оптически определяемых структур,морфологии структур, их размеров и количества в поле зрения.(Предварительный патент Республики Казахстан 10231, МПК А 61 В 10/00, опубликован в 1999 г.) Однако предлагаемый способ не учитывает гормональный статус и состояние иммунной системы, что особенно важно для более точного диагноза и дальнейшей терапии с учетом состояния репродуктивной системы больных ювенильного возраста. Задача изобретения - разработка способа диагностики генитального эндометриоза у девочекподростков. Технический результат - повышение точности диагностики, возможность раннего начала лечения с учетом особенностей организма, гормонального статуса и состояния иммунитета у больных ювенильного возраста. Указанный технический результат достигается тем, что в способе диагностики генитального 21738 эндометриоза у девочек-подростков, включающем структурно-оптическое исследование сыворотки крови, отличительной особенностью, согласно изобретению, является то, что дополнительно осуществляют исследование гормонального статуса,для чего в сыворотке крови определяют содержание гормонов кортизола, пролактина, ФСГ, ЛГ,эстрадиола,прогестерона,тестостерона и иммунного статуса, для чего определяют показатели содержания СД-8, Т-супрессоров, В-лимфоцитов,глобулина Е и уровень циркулирующих иммунных комплексов. При наличии через 3 часа - оптических структур - сферолитов и бороздок - 4-5 в поле зрения, через 24 часа - мелких радиально-лучистых кристаллов - 1-2 и слоистых сферолитов 1-2 в поле зрения, при снижении уровней пролактина и кортизола, повышении уровней ФСГ, ЛГ,эстрадиола, прогестерона, тестостерона, снижении СД-8 Т-супрессоров, повышении зрелых Влимфоцитов, гиперглобулинемии клеток Е и увеличении уровня циркулирующих иммунных комплексов диагностируют генитальный эндометриоз у девочек. Способ осуществляется следующим образом. У девочки-подростка с подозрением на эндометриоз осуществляют забор крови для структурно-оптического исследования. Проводят забор крови из вены в количестве 3 мл,центрифугируют ее в течение 10 минут. Из сыворотки крови готовят стекла-препараты,обработанные раствором лецитина для создания гомеотропной ориентации молекул. Каплю сыворотки наносят на предметное стекло и покрывают покровным стеклом. Для исследования используют поляризационный микроскоп. Стекло-препараты осматривают сразу после приготовления, затем помещают в термостат при 37. Повторные просмотры проводят через 15 минут, через 3, 24, 48, 72 часа тепловой экспозиции. Наличие темного фона и отсутствие структур говорит об изофазе. Появление сферолитов и бороздок свидетельствует о жидкокристаллической фазе. Появление доменов, радиально-лучистых кристаллов свидетельствует о прогрессировании жидкокристаллической фазы. Появление крупных радиально-лучистых кристаллов, доменов, слоистых сферолитов и дендритов говорит о твердокристаллической фазе структурообразования. Исследование сыворотки крови на гормоны проводят на 5-ый день и 21 день менструального цикла путем иммуноферментного анализа. Оценку иммунного статуса проводят в процессе исследования клеточного и гуморального групп иммунитета. Количественное определение иммуноглобулинов проводят методом радиальной иммунодиффузии в геле (РИД). Содержание иммуноглобулинов определяют относительно контрольной сыворотки крови человека с известными концентрациями иммуноглобулинов, указанными на этикетке пачки. Изучают клеточный иммунитет иммуноферментным методом. Определяют показатели 8,Т-супрессоров, В-лимфоцитов, иммуноглобулина Е,циркулирующие иммунокомплексы. Учет результатов проводят следующим образом. При наличии через 3 часа - оптических структур- сферолитов и бороздок - 4-5 в поле зрения, через 24 часа - мелких радиально-лучистых кристаллов -12 и слоистых сферолитов 1-2 в поле зрения, при снижении уровня пролактина, повышении уровней ФСГ, ЛГ, эстрадиола, тестостерона, отклонении от нормы уровня кортизола, снижении СД-8 Тсупрессоров, повышении зрелых В-лимфоцитов и гиперглобулинемии клеток Е, увеличении уровня циркулирующих иммунных комплексов диагностируют генитальный эндометриоз у девочек. Предлагаемым способом обследовано 60 девочек с эндометриозом. Проведен сравнительный анализ клинических, инструментальных, лабораторных методов исследования у 60 девочек с эндометриозом(группа сравнения). Структурно-оптическое исследование сыворотки крови для диагностики эндометриоза проведено у всех девочек. Положительные результаты,свидетельствующие о наличии текстур характерных для эндометриоза, были у 55 девочек. Характеристика результатов анализа крови была следующая сферолиты, бороздки, МРЛК, слоистые сферолиты. Во всех 55 случаях присутствовали слоистые сферолиты, наличие которых не характерно для воспалительных процессов придатков матки, следствием которых являются наличие спаек в области придатков матки. Отрицательные результаты были у 4 с наличием эндометриоидной кисты диаметром до 30 мм. и у 1 с очаговым эндометриозом. 21738 Изучение состояния клеточного и гуморального иммунитета свидетельствовало о наличии дефектов в иммунной системе при генитальном эндометриозе. Для данного исследования была выбрана контрольная группа из 50 здоровых девочек. И если концентрация иммуноглобулинов у девочек с ГЭ не отличалась от показателей иммуноглобулинов контрольной группы,то концентрация иммуноглобулина Е была повышена и равнялась соответственно 166,0338,94 г/л против 62,912,8 г/л (р 0,05), что объясняется ослаблением системы местного иммунитета. Показатель СД-8 клеток был достоверно снижен у девочек, больных эндометриозом (22,403,17 против 35,62,12, р 0,05). Таким образом,у девочек,больных эндометриозом отмечено нормальное содержание зрелых Т-лимфоцитов, СД- 4 Т-хелперов,естественных киллерных клеток, снижение СД-8 Тсупрессоров. Иммунорегуляторный индекс был в пределах нормы, что указывает на сохранение количественного баланса между СД-4 Т-хелперной и СД-8 Т-супрессорной популяции лимфоцитов. Гуморальное звено иммунитета характеризовалось повышением содержания зрелых В-лимфоцитов и гиперглобулинемией клеток Е. Уровень циркулирующих иммунных комплексов был достоверно повышенным, средний показатель составил 55,72,65 относительных единиц при показателях в контрольной группе - 21,41,90 относительных единиц, р 0,05. С целью подтверждения диагностической ценности показателей гормонального статуса нами изучено содержание гонадотропных и половых гормонов на 5 день менструального цикла у девочек-подростков больных ГЭ. Гормональное исследование было произведено у девочек с овуляторным менструальным циклом, что было подтверждено путем измерения ими ректальной температуры в течение трех менструальных циклов. Все девочки с эндометриозом и девочки из контрольной группы имели регулярный менструальный цикл продолжительностью 27-30 дней. Данные гормонального профиля представлены в таблице 2. Как видно из представленных данных гормональный профиль девочек,больных эндометриозом отличался от такового у девочек контрольной группы по показателям кортизола,тестостерона, ФСГ, ЛГ, пролактина, эстрадиола,прогестерона. Таблица 2 Так, показатель кортизола у девочек основной группы был достоверно ниже (201,0921,78 нмоль/л),чем у девочек контрольной группы (354,225,6 нмоль/л),р 0,05. Показатель тестостерона у девочек основной группы наоборот был достоверно выше, чем у девочек контрольной группы 3,120,69 нмоль/л и 1,70,03 нмоль/л,0,05. Анализ индивидуальных показателей позволил выявить довольно высокие показатели тестостерона у девочек с эндометриозом. У каждой четвертой девочки показатель тестостерона превышал показатель контрольной группы в 4 раза, у каждой четвертой - в 2 раза. На фоне высоких показателей тестостерона была повышена концентрация ФСГ у девочек с эндометриозом. Средний показатель ФСГ у девочек основной группы превышал показатель контрольной группы в 2,9 раз и составил соответственно группам 7,100,75 мМЕмл и 2,450,15 мМЕмл. Изучение индивидуальных показателей ФСГ позволило нам выявить широкие колебания показателя этого гормона от 1,7 до 15,1 мМЕмл. Необходимо 4 отметить, что у каждой четвертой девочки основной группы показатель ФСГ превышал показатель контрольной группы в 5 раз, у каждой третьей - в 3 раза. Показатели ЛГ у девочек основной группы колебались в пределах от 1,0 до 8,6 мМЕмл и средний показатель у них отличался от показателя группы контроля 4,030,70 мМЕмл и 2,95 0,33 мМЕмл соответственно группам, р 0,05. У каждой четвертой девочки с эндометриозом показатель ЛГ превышал средний показатель в 2 раза. Показатель пролактина у девочек основной группы оказался достоверно ниже, чем у девочек контрольной группы и составил 261,9138,30 мМЕмл при показателях контрольной группы 437,1 81,2 мМЕмл.,р 0,05. Индивидуальные показатели пролактина у девочек основной группы колебались от 160 до 520 мМЕмл. и у каждой второй он оказался в 2 раза меньше показателя здоровых девочек. Средний показатель эстрадиола был достоверно выше у девочек основной группы, чем показатель 21738 контрольной группы. У девочек основной группы он составил 127,0410,24 пг/мл при показателях группы контроля 73,53,23 пг/мл., р 0,05. Индивидуальные показатели эстрадиола колебались в пределах 33,2 -380 пг/мл. У каждой третьей девочки с эндометриозом показатель эстрадиола превышал показатель здоровых девочек в 3,7 раз. Средний показатель прогестерона также оказался достоверно высоким у девочек с эндометриозом и был равен 6,450,53 нмоль/л при показателе группы контроля 3,90,13 нмоль/л.,р 0,05. Индивидуальные показатели колебались в пределах 3,0-12,8 нмоль/л. У каждой шестой этот показатель превышал показатель здоровых девочек в 3 раза. Таким образом,изучение показателей гормонограммы позволило выявить, что для девочек с эндометриозом характерно повышение гонадотропных гормонов и стероидных гормонов,кроме кортизола, который оказался сниженным. Необходимо отметить, что наиболее высоким был показатель ФСГ, содержание которого было в 2,9 раз выше показателя группы контроля. Показатель ЛГ превышал показатель контрольной группы в 1,4 раза, показатель эстрадиола и прогестерона в 1,7 раз, тестостерона в 1,8 раз, при снижении кортизола в 1,8 раз и пролактина в 1,7 раз. Таким образом, если эндометриоз в 14 летнем возрасте диагностирован почти у каждой восьмой, в 15 летнем возрасте у каждой шестой, то в 16 и 17 лет почти у каждой пятой. Если брать во внимание,что средний возраст наступления менархе был 13 лет и в момент обследования все девочки 14 лет имели менструации более чем один год, то полученные данные свидетельствуют о том, что с возрастом увеличивается частота эндометриоза. Поэтому раннее обследование девочек с дисменореей, меноррагией и нерегулярными менструациями способствует ранней диагностике эндометриоза, ранней терапии, снизит частоту запущенных форм эндометриоза. Клинический пример. Больная Р., 17 лет, обратилась с жалобами на болезненные менструации, мажущие кровянистые выделения из половых путей в течение 4-5 дней после менструации. Проведено ректоабдоминальное исследование перед менструацией,при котором определялось увеличение размеров матки. Направлена на структурно-оптическое исследование сыворотки крови на эндометриоз и исследование гормонального и иммунного статуса. По результатам структурно-оптического исследования сыворотки крови - сразу после центрифугирования крови и через 15 минут - структур нет (изофаза), через 3 часа - сферолиты и бороздки 4-5 в поле зрения. Через 24 часа - мелкие радиальнолучистые кристаллы 1-2 и слоистые сферолиты 1-2 в поле зрения. Через 48 часов и 72 часа - изменений нет(изофаза). Результат соответствует эндометриозу легкой степени. Гормональный статус - кортизол - 201,09 нмоль/л,тестостерон - 3,12 нмоль/л, ФСГ - 7,20 мМЕмл, ЛГ 7,6 мМЕмл, пролактин - 246,91 мМЕмл, эстрадиол 124,04 пг/мл, прогестерон - 6,32 нмоль/л. Отмечено явно выраженное нарушение гормонального статуса, говорящее в пользу диагноза ГЭ. Иммунный статус - концентрациябыла повышена и равнялась 157,03 г/л. Показатель СД-8 клеток был достоверно снижен и равнялся - 23,30. Гуморальное звено иммунитета характеризовалось повышением содержания зрелых Влимфоцитов и гиперглобулинемией клеток Е. Уровень циркулирующих иммунных комплексов был повышенным -54,8 относительных единиц. Изменения, согласно предлагаемому способу расценены, как подтверждающие диагноз ГЭ. Девочка взята на диспансерный учет, ей назначено соответствующее лечение, откорректированное с учетом гормонального и иммунного статуса. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ диагностики генитального эндометриоза у девочек-подростков, включающий структурнооптическое исследование сыворотки крови,отличающийся тем,что дополнительно осуществляют исследование гормонального статуса,для чего в сыворотке крови определяют содержание гормонов кортизола, пролактина, ФСГ, ЛГ,эстрадиола,прогестерона,тестостерона и иммунного статуса, для чего определяют показатели содержания СД-8, Т-супрессоров, В-лимфоцитов,глобулина Е и уровень циркулирующих иммунных комплексов, при наличии через 3 часа - оптических структур - сферолитов и бороздок - 4-5 в поле зрения, через 24 часа - мелких радиально-лучистых кристаллов - 1-2 и слоистых сферолитов 1-2 в поле зрения, при снижении уровней пролактина и кортизола, повышении уровней ФСГ, ЛГ,эстрадиола, прогестерона, тестостерона, снижении СД-8 Т-супрессоров, повышении зрелых Влимфоцитов, гиперглобулинемии клеток Е и увеличении уровня циркулирующих иммунных комплексов диагностируют генитальный эндометриоз у девочек.