Комплекс гидрохлорида 1- (2-гидроксиэтил)-2,5-диметил-4-ацетилоксииминопиперидина с в-циклодекстрином, обладающий противотуберкулезной активностью

(51) 61 31/445 (2011.01) 61 31/724 (2011.01) 61 31/06 (2011.01) 07 211/14 (2011.01) 07 211/16 (2011.01) 07 211/68 (2011.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ АЦЕТИЛОКСИИМИНОПИПЕРИДИНА С ВЦИКЛОДЕКСТРИНОМ,ОБЛАДАЮЩИЙ ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНОЙ АКТИВНОСТЬЮ(57) Изобретение относится к области фармакологически активных веществ к комплексу гидрохлорида 1-(2-гидроксиэтил)-2,5-диметил-4 ацетилоксииминопиперидина с р-циклодекстрином,обладающему бактерицидной и бактериостатической активностью в отношении диких чувствительных штаммов микобактерий туберкулеза. Заявленный комплекс не обладает выраженной токсичностью, он в 2,6 раза менее токсичен, чем широко применяемый в медицинской практике противотуберкулезный препарат рифампицин.(72) Пралиев Калдыбай Джайловович Искакова Тыныштык Кадыровна Абдильданова Асель Абаевна Ахматуллина Назира Бадретдиновна Ташенова Айнам Алиппековна Бисмилда Венера Лазаревна(73) Акционерное общество Институт химических наук им. А.Б. Бектурова(56) 1) Инновационный патент РК 20531, кл. 61 31/445, 61 23/02, 07 211/14, 07 211/18,07 211/44, 2008. 2) Машковский М.Д. Лекарственные средства. М., 1988, часть 2, с. 257-258. Изобретение относится к области фармакологически активных веществ, конкретно, к комплексу гидрохлорида 1-(2-гидроксиэтил)-2,5 диметил-4-ацетилоксииминопиперидина с циклодекстрином формулы обладающему противотуберкулезной активностью. Структурным аналогом предлагаемого изобретения является гидрохлорид 1(Инновац. пат.20531 РК, 2008, Бюл. 12) Из используемых в настоящее время в качестве антимикробных и противотуберкулезных средств наиболее близким по применению к заявляемому средству является рифампицин /Машковский М.Д. Лекарственные средства. М., 1988, часть 2, с. 257258/. Недостатком применяемого препарата является его высокая токсичность. Задачей изобретения является синтез комплекса гидрохлорида 1-(2- гидроксиэтил)-2,5-диметил-4 ацетилоксииминопиперидина с -циклодекстрином,обладающего противотуберкулезной активностью. Технический результат изобретения - расширение арсенала средств противотуберкулезного действия и снижение токсичности. Технический результат достигается новым соединением - комплексом гидрохлорида 1-(2 гидроксиэтил)-2,5-диметил-4-ацетилоксииминопиперидина с -циклодекстрином формулы Активность комплекса гидрохлорида 1-(2 гидроксиэтил)-2,5-диметил-4 ацетилоксииминопиперидина с -циклодекстрином предполагает использование его в медицине в качестве противотуберкулезного средства. Комплекс гидрохлорида 1 -(2-гидроксиэтил)-2,5 диметил-4-ацетилокси-иминопиперидина с 2 циклодекстрином получают взаимодействием 1-(2 гидроксиэтил)-2,5-диметил-4-ацетилоксииминопиперидина с эквимолярным количеством циклодекстрина. Комплекс заявляемого соединения с -циклодекстрином представляет собой аморфный порошок, растворимый в воде и этаноле. Индивидуальность и состав заявляемого соединения подтверждена данными элементного анализа. ПРИМЕР 1. Комплекс включения гидрохлорида 1-(2 гидроксиэтил)-2,5-диметил-4-ацетилоксииминопиперидина с -циклодекстрином . Для получения комплекса включения смешивают растворы 0,26 г(0,0014 моль) гидрохлорида 1-(2-гидроксиэтил)-2,5 диметил-4-ацетилоксииминопипериди на в 30 мл этилового спирта и 1,64 г (0,0014 моль) циклодекстрина в 90 мл дистиллированной воды. Смесь помещают в сушильный шкаф, выпаривают этанол и воду при 50-55. Получают 1,13 г комплекса включения гидрохлорида 1-(2 гидроксиэтил)-2,5-диметил-4-ацетилоксииминопипе ридина с -циклодекстриномв виде белого порошка, плавящегося с разложением выше 240 С. Найдено,С 46,95 Н 6,67. 5390238. Вычислено,С 46,70 Н 6,61. Пример 2. Комплекс гидрохлорида 1 -(2-гидроксиэтил)-2,5 диметил-4-ацетилокси-иминопиперидина с циклодекстрином под лабораторным шифром ПВТ 42 изучен на противотуберкулезную активность и острую токсичность. Бактериостатическое и бактерицидное действие в отношении диких чувствительных штаммов микобактерий туберкулезаи острую токсичность. Данные сопоставлялись с показателями рифампицина. Результаты исследования представлены в таблицах 1,2. В качестве экспериментальных животных использованы белые беспородные мыши. Высокая восприимчивость к туберкулезу этих животных позволяет создать эффективную модель туберкулезной инфекции для изучения химиотерапевтического эффекта исследуемого соединения. Установлено, что резистентность к туберкулезу у мышей повышается с возрастом и весом, поэтому группа подопытных животных должна быть стандартизована по этим параметрам в опыт включают половозрелые самцы и самки весом 18-25 г. Токсичность препарата определяли путем внутрибрюшинного введения мышам их различных доз. Длительность наблюдения составляла 2 недели. О степени токсичности препарата судили по величине 50 в опытной и контрольной группах животных. Проведено исследование острой токсичности 4 доз препарата ПВТ-42. В таблице 2 приведены токсическая доза для мышей,вызывающая гибель 50 животных. Таблица 1 - Токсичность ПВТ-42 для белых беспородных мышей ЛД 50 мг/кг ПВТ-42 726,0 Рифампицин 268,0 Ниже приведены группы токсичности,установленные на основании 50 при внутрибрюшинном введении антибиотиков мышам 1. Нетоксичные антибиотики 5050-100 мг/кг 2. Слабо токсичные антибиотики 505-50 мг/кг 3. Сильно токсичные антибиотики 501-5 мг/кг 4. Очень сильно токсичные антибиотики 501 мг/кг Как следует из данных таблицы 2, 50 ПВТ-42 для белых беспородных мышей составляла 726 мг/кг, т.е. в 2,6 раза меньшей токсичности рифампицина. Таким образом, указанный препарат не обладает выраженной токсичностью. Бактерицидную и бактериостатическую активность препарата ПВТ-42 определяли на диких чувствительных штаммах микобактерий туберкулеза (10 штаммов, выделенных от больных,находящихся на лечении вНЦПТРК). Готовили взвесь исследуемых культур соответствующую 5108 (500 млн. микробных тел) микробных клеток по оптическому стандарту мутности Мак-Фарланда 1. Затем производили посев приготовленной взвеси музейной культуры (по 0,2 мл) в пробирки с жидкой питательной средой Школьниковой, содержащей препарат ПВТ-42 в концентрациях 100, 50, 20, 10, 5, 2, 1, 0,1, 0,01 мг/мл и в контрольные (2 пробирки) без препарата. Посевы инкубировали в термостате при температуре 37 в течение 10 дней. По истечении указанного времени производили пересев отмытых осадков культур опытных и контрольных образцов на плотные питательные среды Левенштейна-Йенсена. Из оставшейся части осадка обоих образцов (опытных и контрольных) готовили препараты, окрашивали по ЦильНильсену. Микроскопия окрашенных препаратов показала, что во всех препаратах, приготовленных из опытных образцов присутствуют МБТ, в каждом препарате от 10 и более палочек в поле зрения. В контрольных препаратах - от 10 и более в поле зрения, в каждом препарате. Пересеянные образцы (опытные и контрольные) инкубировали в термостате при температуре 37 в течение 28 дней. Опыты проводили в трех повторностях, в двух сериях. Результаты бактерицидного и бактериостатического действия препарата ПВТ-42 в отношении диких чувствительных штаммов микобактерий туберкулеза представлены в таблице 2. Данные таблицы 2 свидетельствуют о бактерицидной активности ПВТ-42 в концентрации 10 мкг/мл и бактериостатической активностью в концентрации 5 мкг/мл. В контрольных пробирках(без препарата) наблюдался обильный рост колоний. Таблица 2 Бактерицидная и бактериостатическая активность препарата ПВТ-42 в отношении диких чувствительных штаммов микобактерий туберкулеза Испытуемый препарат единичные колонииот 20 до 100 колонийболее 100 колоний. Заключение исследуемый препарат ПВТ-42 обладает бактерицидной и бактериостатической активностью в отношении диких чувствительных штаммов микобактерий туберкулеза. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Комплекс гидрохлорида 1-(2- гидроксиэтил)-2,5 диметил-4- ацетилоксииминопиперидина сциклодекстрином формулы