Способ получения гипериммунной сыворотки против пастереллеза птиц

(51) 61 35/16 (2006.01) 61 37/04 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ вакциной, получение от них крови и отделение сыворотки,в качестве животных-доноров используют ослов, а их иммунизацию осуществляют антигеном из вакцинного штамма 46576, при этом во время первой иммунизации иммуноген вводят подкожно в дозе 20,0 см 3 в среднюю треть шеи, вторую иммунизацию проводят аналогично первой иммунизации через 7 дней, вводя 40,0 см 3 подкожно, затем через 7 дней проводят третью иммунизацию в дозе 80,0 см 3 подкожно, после чего четвертую иммунизацию проводят через 7 дней в дозе 25,0 см 3 подкожно,пятую иммунизацию осуществляют через 7 дней в дозе 50,0 см 3 подкожно, затем шестую иммунизацию проводят через 7 дней в дозе 70,0 см 3 подкожно,после чего седьмую иммунизацию проводят через 7 дней в дозе 20,0 см 3 подкожно и восьмую иммунизацию проводят через 14 дней в дозе 50,0 см 3 подкожно, через 7 дней после восьмой инъекции проводят девятую иммунизацию в дозе 70,0 см 3,десятую иммунизацию проводят через 14 дней после девятой иммунизации в дозе 70,0 см 3 подкожно, а через 14 дней после десятой иммунизации проводят одиннадцатую иммунизацию в дозе 80,0 см 3, через 7 дней после одиннадцатой иммунизации проводят взятие крови в количестве 2,0 литров и отделяют от не гипериммунную сыворотку.(72) Умитжанов Мынбай Даутпаева Зауреш Жумагановна Сансызбаев Байсал Калабаевич Айдарбекова Лаура Жусипназаровна(56) Таубаев У.Б. Изготовление гипериммунной сыворотки против серологических вариантов А, В и Д пастерелла мультоцида// Вестник сельскохозяйственной науки Казахстана, Алматы ТОО Издательство Бастау 5, с.55(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИПЕРИММУННОЙ СЫВОРОТКИ ПРОТИВ ПАСТЕРЕЛЛЕЗА ПТИЦ(57) Изобретение относится к области ветеринарии,в частности к получению иммунных сывороток и может найти широкое применение в ветеринарной практике для лечения и профилактики пастереллеза птиц. Технический результат,обеспечиваемый изобретением, выражается в повышении активности и специфичности сыворотки. Способ получения гипериммунной сыворотки против пастереллеза птиц, включающий иммунизацию животных-доноров противопастереллезнои 20944 Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к получению иммунных сывороток и может найти широкое применение в ветеринарной практике для лечения и профилактики пастереллеза птиц. Известен способ получения гипериммунной сыворотки против пастереллеза птиц, включающий иммунизацию животных-доноров противопастереллезной вакциной, получение от них крови и отделение сыворотки Таубаев У.Б. Изготовление гипериммунной сыворотки против серологических вариантов А, В и Д пастерелла мультоцида // Вестник сельскохозяйственной науки Казахстана.Алматы ТОО Издательство Бастау. -5. -с.55 Недостатком известного способа является недостаточная активность полученных сывороток и малое количество полученного конечного продукта. Задачей предлагаемого изобретения является с возможностью многократного получения больших объемов высокоактивной иммунной сыворотки. Технический результат,обеспечиваемый изобретением, выражается в повышении активности и специфичности сыворотки. Способ получения гипериммунной сыворотки против пастереллеза птиц,включающий иммунизацию животных-доноров противопастереллезной вакциной, получение от них крови и отделение сыворотки, в качестве животныхдоноров используют ослов, а их иммунизацию осуществляют антигеном из вакцинного штамма 46576, при этом во время первой иммунизации иммуноген вводят подкожно в дозе 20,0 см 3 в среднюю треть шеи, вторую иммунизацию проводят аналогично первой иммунизации через 7 дней, вводя 40,0 см 3 подкожно,затем через 7 дней проводят третью- иммунизацию в дозе 80,0 см 3 подкожно, после чего четвертую иммунизацию проводят через 7 дней в дозе 25,0 см 3 подкожно, пятую иммунизацию осуществляют через 7 дней в дозе 50,0 см 3 подкожно, затем шестую иммунизацию проводят через 7 дней в дозе 70,0 см 3 подкожно, после чего седьмую иммунизацию проводят через 7 дней в дозе 20,0 см 3 подкожно и восьмую иммунизацию проводят через 14 дней в дозе 50,0 см 3 подкожно, через 7 дней после восьмой инъекции проводят девятую иммунизацию в дозе 70,0 см 3, десятую иммунизацию проводят через 14 дней после девятой иммунизации в дозе 70,0 см 3 подкожно, а через 14 дней после десятой иммунизации проводят одиннадцатую иммунизацию в дозе 80,0 см 3, через 7 дней после одиннадцатой иммунизации проводят взятие крови в количестве 2,0 литров и отделяют от не гипериммунную сыворотку. Способ получения гипериммунной сыворотки против пастереллеза птиц осуществляется следующим образом. Предварительно готовят инактивированную вакцину против пастереллеза птиц, для чего используют штамм бактерийА 46 576. Пример. Для иммунизации ослов-продуцентов используют антиген из местного производственного 2 вакцинного штамма бактерий А 46576, на основе которого изготовлена инактивированная вакцина против пастереллеза птиц. В качестве доноров используют трех ословпродуцентов. Иммунизация ослов-продуцентов состоит из одиннадцати инъекции. Первую иммунизацию ослов-продуцентов проводят в дозе 20,0 см 3 в среднюю треть шеи подкожно, затем через 7 дней берут кровь с последующим отделением от них сыворотки и постановки, серологических исследовании в РНГА. Титр антител при этом составило 1600. Вторую иммунизацию проводят аналогично первой сразу после взятия крови, вводя 40,0 см 3 подкожно, затем через 7 дней после второй иммунизации берут кровь, отделяют от нее сыворотку и исследуют титр антител в РНГА. Титр антител на 14-ый день составляет 12400. Третью иммунизацию осуществляют аналогично ко второй,вводя вакцину в дозе 80,0 см 3 подкожно, затем через 7 дней после третьей иммунизации берут кровь,отделяют от нее сыворотку и исследуют титр антител в РНГА. Титр антител на 21-ый день составляет 14800. Четвертую иммунизацию проводят аналогично к третьей в дозе 25,0 см 3 подкожно, затем через 7 дней после четвертой иммунизации берут кровь, отделяют от нее сыворотку и исследуют титр антител в РНГА. Титр антител на 28-ой день составляет 15120. Пятую иммунизацию проводят аналогично к четвертой в дозе 50,0 см 3 подкожно, затем через 7 дней после пятой иммунизации берут кровь, отделяют от нее сыворотку и исследуют титр антител в РНГА. Титр антител на 35-ой день составляет 15300. Шестую иммунизацию проводят аналогично в пятой иммунизации в дозе 70,0 см 3 подкожно, затем через 7 дней после шестой иммунизации берут кровь,отделяют от нее сыворотку и исследуют титр антител в РНГА. Титр антител на 42-ой день составляет 15500. Седьмую иммунизацию проводят аналогично в шестой иммунизации в дозе 20,0 см 3 подкожно, затем через 7 дней после седьмой иммунизации берут кровь, отделяют от нее сыворотку и исследуют титр антител в РНГА. Титр антител на 49-ой день составляет 15500. На 56-ой день берут кровь и отделяют от нее сыворотку и исследуют титр антител в РНГА. Титр антител при этом составляет 15600. Восьмую иммунизацию проводят через 14-ый день после седьмой иммунизации в дозе 50,0 см 3 подкожно, затем через 7 дней после восьмой иммунизации берут кровь,отделяют от нее сыворотку и исследуют титр антител в РНГА. Титр антител на 63-й день составляет 15800. Девятую иммунизацию проводят в дозе 70,0 см 3 подкожно, затем через 7 дней после девятой иммунизации берут кровь, отделяют от нее сыворотку и исследуют титр антител в РНГА. Титр антител на 70-й день составляет 16000. На 77-ой день берут кровь и отделяют от нее сыворотку и исследуют титр антител в РНГА. Титр антител при этом составляет 16100. Десятую иммунизацию проводят аналогично седьмой иммунизации в дозе 70,0 см 3 подкожно, затем через 7 дней после десятой иммунизации берут кровь, отделяют от нее 20944 сыворотку и исследуют титр антител в РНГА. Титр антител на 84-ый день составляет 16300. На 91-ый день берут кровь и отделяют от нее сыворотку и исследуют титр антител в РНГА. Титр антител при этом составляет 16300. Одиннадцатую иммунизацию проводят аналогично к десятой (на 14-ый день) иммунизации в дозе 80,0 см 3 подкожно,затем через 7 дней после одиннадцатой иммунизации берут кровь, отделяют от нее сыворотку и исследуют титр антител в РНГА. Титр антител на 98-ой день составляет 16500. Через 7 дней после одиннадцатой иммунизации (на 105 день) проводят взятие крови в количестве 2,0 литров и отделяют от не гипериммунную сыворотку. Антигенность полученной сыворотки определяют в реакции непрямой гемагглютинации(РНГА) с диагностикумом эритроцитарным пастереллезным антигенным, специфичность с антигенным пастереллезным диагностикумом. На фиг. приведены динамика роста уровня специфических антител при иммунизации ословпродуцентов инактивированной вакциной против пастереллеза птиц. Как видно из фиг., на 7 день сывороточная активность ослов-продуцентов составляет 11600. В процессе проведения цикла иммунизации инактивированной вакциной против пастереллеза птиц, активность сыворотки неизменно поднимается и к 30 дню стабильно держится на высоком уровне(15120). Следует отметить,что трехкратное кровопускание после седьмой, 9-ой и десятой инъекцией резко (в 2-3 раза) повышается активность полученной сыворотки. После 11-ой инъекции ослов-продуцентов инактивированной вакциной против пастереллеза птиц в дозе 80,0 см 3 и через 7 дней (на 105 день) после последней иммунизации сопровождается более интенсивным иммунным ответом организма, который продолжается в течение 1 месяца. Спустя через 1 месяц проводятся реиммунизация ослов-продуцентов инактивированной вакциной против пастереллеза птиц в дозе 80,0 см 3, и через 7 дней в организме ослов-продуцентов отмечается повышение уровня антител до 16500 и выше. Реиммунизация индуцирует более значительно, чем после первого антигенного воздействия Таким образом, предложенный оптимальный способ получения иммунной сыворотки позволяет получить активный и специфичный препарат против пастереллеза птиц. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ получения гипериммунной сыворотки против пастереллеза птиц,включающий иммунизацию животных доноров противопастереллезной вакциной, получение от них крови и отделение сыворотки, отличающийся тем,что в качестве животных - доноров используют ослов, а их иммунизацию осуществляют антигеном из вакцинного штамма 46576, при этом во время первой иммунизации иммуноген вводят подкожно в дозе 20,0 см 3 в среднюю треть шеи, вторую иммунизацию проводят аналогично первой иммунизации через 7 дней,вводя 40,0 см 3 подкожно, затем через 7 дней проводят третью иммунизацию в дозе 80,0 см 3 подкожно, после чего четвертую иммунизацию проводят через 7 дней в дозе 25,0 см 3 подкожно,пятую иммунизацию осуществляют через 7 дней в дозе 50,0 см 3 подкожно, затем шестую иммунизацию проводят через 7 дней в дозе 70,0 см подкожно,после чего седьмую иммунизацию проводят через 7 дней в дозе 20,0 см 3 подкожно и восьмую иммунизацию проводят через 14 дней в дозе 50,0 см подкожно, через 7 дней после восьмой инъекции проводят девятую иммунизацию в дозе 70,0 см 3,десятую иммунизацию проводят через 14 дней после десятой иммунизации проводят одиннадцатую иммунизацию в дозе 80,0 см 3, через 7 дней после одиннадцатой иммунизации проводят взятие крови в количестве 2,0 литров и отделяют от нее гипериммунную сыворотку.