Гидрохлорид 2,5-диметил-4-(2-оксиэтил)аминотетрагидротиопирана в качестве радиопротектора

НАЦИОНАЛЬНОЕ ПАТЕНТНОЕ ВЕДОМСТВО ПРИ КАБИНЕТЕ МИНИСТРОВ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН(73) Институт химических Наук им.А.Б.Бектурова Национальной академии наук Республики Казахстан(57) Изобретение относится к применению устойчивого при хранении производного тетрагидротиопирана- С 7 Н 13 ЫНС 2 Н 4 ОННС 1 в качестве радиопротектора. В результате достигнуто снижение токсичности при сохранениивыраженной радиопротекторной активности . Вещество получают конденсацией 2,5 диметилтетрагидротиопиранона- 4 с моноэтаноламином с последующими восстановлением образующегося оксалидина ЫаВН 4 в этаноле при 60 С в течение 2 ч и обработкой ацетонового раствора продукта восстановления эфирным раствором НС 1. Выход 61,0,т.пл.130-132 С,бруттоформула 225,61(С 9 Н 11 ОС 1)(Ю.Г. Босяков, Г.Т.Майщинова,Н.Ю.КузЬмина. Синтез азометинов и вторичных аминов тетрагидротиопиранового ряда . Изв.АН РК,сер.хим.,1992,36, с.77-83). Из применяемых в настоящее время радиопротекторов наиболее близкими к использованному в изобретении является цистамин дигидрохлорид - дигидрохлорид бис-(2-аминоэтил)- дисульфида , и цистиамин-гидрохлорид 2-меркаптоэтилПри внутрибрюшинном введении мышам СДЮ цистамина равна 233 мг/кг,СД 50 цистеамина -244,2 мг/кг(Н.Н.Суворов, В.С.Шашков.- Химия И фармакология средств профилактики радиационных поражений.-М.,1975,с.60,62).Недостатками применяемых препаратов являются противопоказания к их применению при острых заболеваниях желудочно-кишечного тракта, острой недостаточности сердечно-сосудистой системы и нарушениях функции печени вследствие их токсического действия. Кроме того,следует отметить неустойчивость препарата при хранении на свету.Задачей изобретения является расширение арсенала биологически активных веществ, обладающих радиопротекторной активностью.Поставленная задача решается применением известного соединения с лабораторным шифром РП-3 формулы(1)в качестве радиопротектора , которое МОЖСТ бЫТЬ ИСПОЛЬЗОВЗНО ДЛЯ ЗЗЩИТЫ организма от радиоактивного облучения.Применяемое соединение устройчиво при хранении , обладает пониженнойтоксичностью при сохранении выраженной радиопротекторной активности.образующегося оксазолидина ЫаВН 4 в этаноле при 60 С в течение 2 ч, затем обработкой ацетонового раствора 2,5 диметил-4-(2-оксиэтил) аминотетрагидротиопирана эфирным раствором НС 1 получают соединение(1) с выходом 61 и т.пл. 174-176 С.РП-3 представляет собой белый кристаллический порошок , хорошо растворимый в воде , устойчивый при хранении как в порошке , так и в растворах.Гидрохлорид 2,5-диметил-4-(2 оксиэтил)амино-тетрагидротиопирана,синтезированный в лаборатории органического синтеза Института химических наук им. А.Б.Бектурова НАН РК под лабораторным шифром РП-3,изучен на радиопротекторную активность по принципам первичного отбора.Исследования проведены согласно методическим указаниям по экспериментальному и клиническому изучению радиопротекторов , одобренным фармакомитетом МЗ СССР от 10.02.78 г.(прототип М 95), основным требованием которых является использование доз облучения , обуславливающих высокую поражаемость, и нетоксичных доз препарата.1 Опыты проводились на белых беспородных мышах кондиционного возраста и веса. Изучалась острая токсичность, для чего в начале на небольших группах животных испытывалась серия предположительно токсичных доз соединения РП-3, а затем ,после выяснения диапазона величины смертных доз, опыты повторялись на небольшом количестве мышей для определения зависимости процента гибели от дозы соединения. Материал подвергал ся пробит анализу , высчитывались СДЮ , СДЩ СД 84 (СД- смертельная доза).Исследуемое соединение (1) вводилось внутрибрюшинно из концентрационного расчета 0,5 мл на мышь в виде водного раствора или 2 крахмального геля в случае нерастворения в воде. Наблюдения5 за общим состоянием И регистрацию продолжительности жизни и смертности подопытных животных вели в течение 30 дней.Общее облучение мышей проводили через 15-20 мин, после инъекции препарата на рентгеновской установке РУМ-17 при следующих физико-технических условиях напряжение -220 кВ, сила тока - 10 мА,фильтр 1 мм Си, кожно-фокусное расстояние - 40 см, мощность- 45,7 рад/ мин, поле облучения 10 см на 15 см. Мышей помещали в 6-ти камерную плексигласовую коробку с вентиляционными отверстиями, в которой они находились во время облучения 10-15 мин. Затем наблюдая за животными в течение месяца,регистрировали смертность и продолжительность жизни.До начала исследования возможных радиопротекторных свойств испытуемых препаратов была изучена дозовая зависимость выживаемости при общем облучении. Это вызвано тем, что по имеющимся в литературе данным величина смертных доз колеблется в широких пределах. Так,ЛД 50 для разных линий мь 1 шеи с различными условиями жизни, с учетом времен года и других неучтенных факторов составляет от 7 до 15 гр. В настоящем эксперименте мышей облучали в дозах 5,6,7,8,10,12,14,15,20 Гр, по 10 особей в группе, позднее- еще в дозах 5,6,и 7 Гр при удвоенном количестве наблюдений. Материал по смерьности подвергнут пробит анализу. Подсчитаны ЛД 50/30 и ЛД 84/30, они составили 6,7 и 8 Гр. Средняя продолжительность жизни павших соответственно дозе облучения животных оказалась равной при 5 Гр - 9 6 Гр - 6,8 7 Гр- 8,7 8 Гр- 7,3 10 Гр - 4,2 12 Гр 4,1 14 Гр- 4,3 15 Гр- 3,4 20 Гр-2,1 дня. Облучение под 0 опытных животных дозой от 5 до 8 Гр вызывает поражение костного мозга, дозой от 10 до 15 Гр - поражение кишечника и дозой 20 Гр- поражение центральной нервной системы.Острая токсичность РП-3 изучена при введении его в дозах 100, 200, 500, 550, 6 600,650, 800, 1000, 2000 мгкг весаживотного. Через 5-15 мин. после однократного введения РП-3 в дозе 200 мгкг наблюдались первые признаки токсичности - некоторое возбуждение,озноб, которые вскоре прошли. При дозе 500 мгкг препарат проявил выраженную токсичность - перечисленные выше симптомы резко усилились и наблюдались в течение 30-60 мин. Некоторые животные после озноба впали в состояние шока, но через 1-2 часа все эти явления прошли, и при последующем наблюдении никаких проявлениий токсичности не было. На 30 ь 1 й день наблюдения все животные были живы. При введении препарата в дозе 550 мгкг началась гибель мышей, при дозе 800 и выше смертность наступила в первые 515 мин. в 100 случаев. На осоновании пробит анализа рассчитаны дозы СД 16450 мгкг, СД 50-530 мгкг,СД 84-600 мгкг, а для изучения радиопротекторных своиств рассчитаны дозы 12 СД 16-225 мгкг,18 СД 16-56 мгкг.Во всех опытах по изучению радиозащитных свойств препарата во избежание ошибок от влияния неучтенных факторов группы животных с предварительным введением препарата сопровождались контролем - группой чистого облучения.Наблюдения показали, что при облучении в дозе 6 Гр после предварительного введения РП-3 в дозах 12 и 18 от СДМ процент гибели мышей составил 12 и 11 соответственно, при средней продолжительности жизни в группах - 18,5 и 16,5 дней, в то время как при контрольном облучении эти показатели составили 58 и 6,8 дней(таблица 1). Соотношение выживших в опыте и контроле животных составило 2,1,т.е. изученное соединение обладает выраженным радиопротекторным действием. Увеличение продолжительности жизни погибших в опыте говорит о способности препарата защищать те процессы, которые ответственны за первую фазуПоказатели радиозащитной эффективности соединенийпроизводство может быть осуществлено на типовом оборудовании, имеющемся на заводах фармацевтической про мышленности. Таблица 1.Таким образом, выяснены интервалы дозовой зависимости гибели беспородных мышей при общем облучении. Гибель начинается при дозе облучения 5 Гр, и при 8 Гр наступает смерть в 100 случаев. Судя по срокам гибели, через неделю костномозговая форма лучевой болезни возникает при облучении 5,6,7,8 Гр. Обнаружена высокая радиопротекторная активность РП-3 при невысокой токсичности.Гидрохлорид 2,5- диметил-4-(2 оксиэтил ) аминотетрагидротиопирана (1) весьма перспективен с точки зрения создания на его основе эффективного радиопротектора. РП-3 получают из доступного химического сырья и егоОтветственный за выпуск Э.З. Фаизова