Штамм гриба Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin ВСu5-12 для получения биопрепарата против колорадского жука

(51) 21 1/20 (2006.01) 01 63/00 (2006.01) 12 15/20 (2006.01) МИНИСТЕРСТВО ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ВС 5-12 ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ БИОПРЕПАРАТА ПРОТИВ КОЛОРАДСКОГО ЖУКА(57) Предложенный штамм - Выделен из трупа имаго жука - долгоносика ,найденного в Алматинской области, Сарканского района, Джунгарского Алатау летом 2012 г. Обладает высокой биологической активностью в отношении личинок колорадского жука. Общий процент гибели личинок в вариантах с прототипом(штамм -06) при заражении титром 1107 составляла в среднем на 11 сутки 80,0, при заражении титром 5107 95,0. Гибель жука в контроле (обработка водой) на 11 сутки была 2,5.(72) Сагитов Абай ОразулыЛеднев Георгий РэмовичДуйсембеков Бахытжан Алишерович Успанов Алибек МаратовичМакаров Евгений МихайловичСмагулова Шолпан Берекболовна Левченко Максим ВладимировичСлямова Назира Дусупкановна(73) Товарищество с ограниченной ответственностью Казахский научноисследовательский институт защиты и карантина растений Изобретение относится к сельскохозяйственной микробиологии, в частности, к получению средств защиты от жесткокрылых и представляет собой штамм гриба для получения вышеуказанного средства. Экспериментальные препаративные формы препарата В.производятся в США (под названием биотрол), во Франции (колеопе), в Чехии(боверол, боверосил) и в бывшем СССР (боверин зерновой). Среди коммерческих микоинсектицидных препаратов следует упомянуть, ,-, ,-, -2561,-201,-1200(///.). Недостатком указанных препаратов в условиях Казахстана является несовпадение оптимума развития штаммов с климатическими условиями Республики. Известен штамм гриба-06(Инновационный патент РК 26388). Задачей изобретения является получение нового штамма, обладающего более высокой активностью в условиях Казахстана в отношении насекомыхлистоедов, в частности, колорадского жука. Колорадский картофельный жук () относится к особо опасным видам для картофеля и в меньшей степени - для томатов. Питается также сорняками из семейства пасленовых. Повреждает листья, реже черешки,стебли и цветки. На листах выедает дыры, иногда объедает их полностью. Взрослые жуки буроватожелтые с черными пятнами на переднеспинке и десятью черными продольными полосками на надкрыльях,длиной 7-16 мм. После дополнительного питания на картофеле в июнеиюле самки откладывают на нижнюю сторону листьев по 25-30 ярко-оранжевых яиц. Средняя плодовитость самки до 500 яиц. При температуре воздуха 15-18 эмбриональное развитие продолжается пять-семь дней, стадия личинки около 30 дней. Взрослые личинки горбатые, с грудными ногами, оранжево-красные, длиной до 15 мм. Голова, переднегрудь и два ряда бородавок по бокам тела у них - черные. Окукливаются личинки в почве, на глубине 10-12 см. Молодые жуки появляются через две-три недели. Зимуют жуки на глубине 20-30 см, преимущественно в рыхлых сухих почвах. Весной, когда температура почвы постигает 14-15, они выползают на поверхность и приступают к питанию. Взрослые жуки могут жить 12-14 месяцев. В теплые солнечные дни способны перелетать на расстояние до 10 км. В Прибалтике и Белоруссии преимущественно имеют одно поколение в год. В качестве мер борьбы необходимо строгое соблюдение карантинных правил и опрыскивание инсектицидами в период вегетации. Географическое распространение космополит. Объект, из которого выделен штамм - Выделен из трупа имаго жука-долгоносикаГде собран Алматинская область, Сарканский район, Джунгарский Алатау. Когда собран июль 2012. Кем собран лабораторией биотехнологии НИИЗиКР Кем выделен Леднев Г.Р., Лукина А.В. На какую среду выделен модифицированная среда Сабуро (без добавления агара) следующего состава (г/л) пептон (10 г), глюкоза (10 г), мальтоза(10 г), дрожжевой экстракт (5 г), вода - 1 л ( 5,6 5,8, режим автоклавирования 0,8 атм. 30 мин). Для подавления роста бактерий и грибов порядкав среду добавлялось 0,04 молочной кислоты. Микроморфология Штамм ВС 5-12 относится к виду. Гифы септированные,бесцветные. Конидиеносцы расположены вдоль гиф единолично или парами друг против друга, собраны рыхлые мутовки. Конидии шаровидные 2,0-3,01,9-2,8 мкм. На вершине бутылевидного конидиеносца расположен характерный зигзагообразный вырост. Фиалиды прямые, короткие. Макроморфология на плотных питательных средах Колонии на агаризованной среде Сабуро округлые, окраска колонии светло бежевого цвета очень рельефные, округлые выросты, край колонии нечетки, войлочный, пигмент коричневого цвета,агар не окрашивают, пушистые, синнем не образуют(фиг.1). Фиг.1 - Колонии штамма ВС 5-12 на среде Сабуро Биологическая активность на тест-объектах. Оценивалась на личинках колорадского жука 23 возрастов, 1-2 покаления, активность высокая(таблица 1). Таблица 1 Биологическая активность грибав отношении личинок колорадского жука (титр) Штамм Общий процент гибели личинок в среднем на 11 сутки 1107 5107 87,54,8 100 80,08,16 95,05,0 2,52,5 2,52,5 8,9 14,3 В результате тестирования личинок колорадского жука,штамм ВС 5-12 энтомопатогенного гриба показал высокие проценты смертности. При повышении титра спор 2 до 5107 сп/мл гибель личинок достигла более высоких результатов и не уступает эталону. Таким образом, протестированные штаммы показали высокую биологическую активность на личинках колорадского жука и могут быть рекомендованы для создания на их основе биопрепаратов. Биологические свойства на лабораторных животных (патогенность). Принадлежит к 3-му классу опасности для теплокровных животных. Рекомендации по поддержанию роста и хранению культуры. Хранение на скошенной агаризованной среде, при температуре 4 С. Пересев два раза в год. Используется модифицированная среда Сабуро. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Штамм гриба, депонированный в ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт защиты растений, под регистрационным номером ВС 5 -12,используемый для получения биопрепарата против колорадского жука.