Способ изготовления антигена при диагностике инфекционного эпидимита баранов в РДСК

(51) 61 39/10 (2010.01) 01 33/569 (2010.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН(57) Изобретение относится к ветеринарии, а именно к технологии производства антигенов для выявления инфекционного эпидимита баранов. Эта цель достигается путем ультразвуковой деинтеграции 0,1 растворе, где дополнительно внесен раствор тритона до концентрации с последующим центрифугированием взвеси разрушенных клеток и отделением целевого продукта в форме надосадочной жидкости. Предлагаемый способ позволяет получить активный и специфичный антиген для диагностики инфекционного эпидимита баранов.(56) Иванов Н.П. Применение ультразвука для приготовления диагностических препаратов из бруцелл. Алма-Ата, 1985, с.16-26(54) СПОСОБ ИЗГОТОВЛЕНИЯ АНТИГЕНА ПРИ ДИАГНОСТИКЕ ИНФЕКЦИОННОГО ЭПИДИМИТА БАРАНОВ В РДСК Изобретение относится к ветеринарии, а именно к технологии производства антигенов для выявления инфекционного эпидимита баранов. Известен способ получения антигена для выявления инфекционного эпидимита баранов путем разрушения клеток бруцелл, при этом разрушение осуществляют обработкой взвеси клеток микроорганизмов ультразвуком при частоте 15-22 КГц и интенсивности 70-90 Вт/см 3 в течение 15-30 мин. (Иванов Н.П. Применение ультразвука для приготовления диагностических препаратов из бруцелл./ Меры борьбы с инфекционными,паразитарными и незаразными болезнями сельскохозяйственных животных в Казахстане.Сб.науч. трудов.- Алма-Ата, 1985. - с.16-26.) Получение антигена по данной методике не позволяет осуществить полный выход активных начал из клеток. Целью изобретения является повышение выхода активных начал из клеток. Эта цель достигается путем ультразвуковой дезинтеграции бруцелл в 0,1 растворе тритона с последующим автоклавированием,центрифугированием взвеси разрушенных клеток и отделением целевого продукта в форме надосадочной жидкости. Пример приготовления антигена для выявления инфекционного эпидимита баранов. Пример. Бруцеллы вида овис, например шт.424/2, или другие штаммы бруцелл, выращенные на плотной питательной среде (агар Альбими,Белобаба и др),смывают стерильным физиологическим раствором поваренной соли и дважды отмывают им же от остатков питательной среды. Затем доводят до концентрации 80-100 млрд. микробных тел (по бруцеллезному стандарту мутности) 0,02-ным раствором твис-буфера или 1/15 М раствором двузамещщенного фосфатнокислого натрия. В полученную взвесь вносят 1 раствор тритона до конечной концентрации 0,1. Полученную взвесь подвергают воздействию ультразвуковых волн (с помощью ультразвукового диспергатора УЗДН-1 или УЗДН-2 при частоте 22 кГц, мощности 70-90 Вт/см 2) в течение 15-20 мин,до просветления. По скончании дезинтеграции ультразвуковой лизат центрифугируют при 18-20 тыс.об/мин. Надосадочную часть декантируют,консервируют фенолом(0,5 конечного содержания мертиолатом (15000) или другим консервантом и используют в качестве антигена для РДСК. Срок годности готового антигена не менее 1 года. Активность и специфичность полученного описанным способом антигена была проверена в лабораторных и производственных условиях. Результаты опытов приведены в табл.1 и 2. Таблица 1 Сравнительная оценка активности антигена овисного для РДСК биофабричного с антигеном овисным,испытуемым Компонент силу этого испытуемый антиген более активен по сравнению с прототипом. Далее была проведена проверка сывороток крови животных на эпидимит в РДСК с существующим и предложенным нами антигенами. Таблица 2 Результаты проверки сывороток крови баранов антигенами испытуемым и известным В результате проведенных испытаний было установлено, что титр испытуемого антигена был несколько выше, нежели этот показатель у препарата, полученного по технологии прототипа. В Примечание. В дробных числах числительабсолютное количество, знаменатель- проценты. 2 Результаты положительной реакции в РДСК Испытуемый Коммерческий антиген антиген 15/25,0 12/20,0 Полученные при этом данные указывают на высокую активность и специфичность антигена в РДСК, что позволяет дополнительно выявлять до 5,0 процентов больных инфекционным эпидимитом баранов. Для подтверждения полученных данных проведен убой 3-х баранов, реагировавших только на изготовленный антиген. При этом у 2-х из них выделена овисная культура, что подтверждает высокую чувствительность указанного препарата. Таким образом, полученный антиген позволяет дополнительно выявлять 5,0 и более процентов больных инфекционным эпидимитом баранов. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ изготовления антигена при диагностике инфекционного эпидимита баранов в РДСК, путем разрушения клеток бруцелл, отличающийся тем,что разрушение бруцелл осуществляют путем ультразвуковой дезинтеграции бруцелл в 0,1 растворе тритона с последующим центрифугированием взвеси разрушенных клеток и отделением целевого продукта в форме надосадочной жидкости.