Способ получения антигена для рдск/рск при диагностике инфекционного эпидидимита баранов

(51) 61 К 39/10 (2006.01) 01 33/569 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН(57) Изобретение относится к ветеринарии, а именно к технологии производства антигенов для выявления инфекционного эпидидимита баранов. Эта цель достигается путем ультразвуковой дезинтеграции бруцелл с последующим автоклавированием,центрифугированием взвеси разрушенных клеток и отделением целевого продукта из осадка. Предлагаемый способ позволяет получить активный и специфичный антиген для диагностики инфекционного эпидидимита баранов.(72) Иванов Николай Петрович Хусаинов Дамир Микдатович(56) Н.П. Иванов. Применение ультразвука для приготовления диагностических препаратов из бруцелл. Сборник научных трудов. Алма-Ата, 1985,с.16-26.(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИГЕНА ДЛЯ РДСК/РСК ПРИ ДИАГНОСТИКЕ ИНФЕКЦИОННОГО ЭПИДИДИМИТА БАРАНОВ 20490 Изобретение относится к ветеринарии, а именно к технологии производства антигенов при выявлении инфекционного эпидидимита баранов. Известен способ получения антигена для выявления инфекционного эпидидимита баранов путем обработки взвеси клеток микроорганизмов ультразвуком при частоте 0,5-1,5 МГц и интенсивности 5-7 Вт/см 3 в течение 5-10 мин.(Иванов Н.П. Применение ультразвука для приготовления диагностических препаратов из бруцелл. / Меры борьбы с инфекционными,паразитарными и незаразными болезнями сельскохозяйственных животных в Казахстане. - Сб. научн. трудов. - Алма-Ата, 1985. - С. 16-26.) Полученный таким образом антиген содержит большое количество белков, снижающих его специфичность, а сам способ не обеспечивает высокой серологической активности антигена. Задачей изобретения является повышение активности и специфичности целевого продукта. Достигается путем ультразвуковой дезинтеграции бруцелл с последующим автоклавированием, центрифугированием взвеси разрушенных клеток и отделением целевого продукта из осадка. Пример приготовления антигена для выявления инфекционного эпидидимита баранов. Пример Бруцеллы вида , например шт. 424/2, или другие виды бруцелл, выращенные на плотном аминопептидном или печеночносывороточном агар-агаре, смывают стерильным физиологическим раствором поваренной соли и дважды отмывают им же от остатков питательной среды. Затем доводят до концентрации 80 - 100 млрд. микробных тел (по бруцеллезному стандарту мутности) 0,02-ным раствором трис-буфера или 1/15 М раствором двузамещенного фосфорнокислого натрия. Полученную взвесь подвергают воздействию ультразвуковых волн (с помощью ультразвукового диспергатора УЗДН-1 или УЗДН-2 при частоте 22 кГц, мощности 60 Вт/см ) в течение 15-20 мин до просветления. По окончании дезинтеграции в микробную суспензию добавляют 20-ный раствор трихлоруксусной кислоты или соляной кислоты до рН 5,8-6,2 и подвергают автоклавированию при 1 атм. 30 мин. Выпавший после автоклавирования осадок отделяют центрифугированием при 5-6 тыс. об/мин в течение 30-40 минут, доводят до половины (1/2) первоначального объема указанными буферными растворами и используют в качестве антигена для РСК, РДСК. Срок годности готового антигена не менее 1 года. Активность и специфичность полученного описанным способом антигена была проверена в лабораторных и производственных условиях. Результаты опытов приведены в табл. 1 и 2. Таблица 1 Сравнительная оценка активности антигена овисного для РДСК биофабричного с антигеном овисным,испытуемым Комонент В результате проведенных испытаний было установлено, что титры испытуемого антигена выше на одно разведение, чем у препарата, полученного по технологии прототипа. В силу этого, 100 испытуемый антиген более активен по сравнению с прототипом. Далее была проведена проверка сывороток крови животных на эпидидимит антигенами в РДСК биофабричным и новым Таблица 2 Результаты проверки сывороток крови баранов антигенами испытуемым и известным Вид животных,пол бараны 30 Полученные при этом данные указывают на высокую активность и специфичность антигена в 2 Результаты положительной реакции в РДСК испытуемый антиген биофабричный антиген 9 4 20490 серологических реакциях,что позволяет дополнительно выявлять до 20 и более процентов больных инфекционным эпидидимитом баранов. Для подтверждения полученных данных проведен убой баранов, реагировавших на изготовленный антиген. При этом выделена овисная культура у всех 3-х баранов, что подтверждает высокую чувствительность указанного препарата. Таким образом, полученный антиген позволяет дополнительно выявлять до 20 и более процентов больных инфекционным эпидидимитом баранов. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ получения антигена для диагностики инфекционного эпидидимита баранов путем ультразвуковой дезинтеграции бруцелл,отличающийся тем, что дополнительно проводят снижение рН до 5,8-6,2, автоклавирование при 1,01,5 атмосфере в течение 20-30 минут,центрифугированием взвеси разрушенных клеток при 5-6 тыс. об/мин в течение 30-40 минут и отделением целевого продукта из полученного осадка