Питательная среда StemGC для культивирования гематопоэтических стволовых клеток пуповинной крови

(51) 61 35/48 (2010.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ биологии,медицины и ветеринарии для культивирования стволовых клеток. Сущность изобретения к основной среде Игла МЕМ добавляют сыворотку пуповинной крови,инсулин, лейкемия - ингибирующий фактор , в следующем соотношении Основная среда Иглаальфа -80 Сыворотка пуповинной крови - 20- 500 ед/- 10 / Эффективность способа заключается в возможности получения питательной среды для культивирования гематопоэтических стволовых клеток, имеющую меньшую стоимость по сравнению с зарубежным аналогом, сходные ростовые характеристики и не содержащая сыворотки крупного рогатого скота.(72) Кауламбаева Маржан Закановна Ахметсадыков Нурлан Нуролдинович(54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДАДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ГЕМАТОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ПУПОВИННОЙ КРОВИ(57) Изобретение относится к области биотехнологии, касается культивирования клеток и может быть использовано в экспериментальной 23372 Изобретение относится к области биотехнологии, касается культивирования клеток и может быть использовано в экспериментальной биологии,медицины и ветеринарии для культивирования стволовых клеток. Известна питательная среда для культивирования гематопоэтических стволовых клеток пуповинной крови 3000(2006.172) следующего состава Основная среда 1 -10/ -200/-10-4 -50 / -50 / -10 / -1-3 Недостатком этой среды является ее очень высокая цена и то, что в состав этой среды входит продукты переработки сыворотки крови крупного рогатого скота. Это является недопустимым условием для получения культур гемопоэтических клеток, используемых в клеточной терапии, так как сыворотка крови крупного рогатого скота может быть источником зоонозных инфекций. Целью изобретения является разработка питательной среды для получения культур гемопоэтических стволовых клеток с характерными фенотипическими признаками не содержащая сыворотку крови крупного рогатого скота. Технический результат,обеспечиваемый изобретением, выражается в получение менее дорогой питательной среды для культивирования стволовых клеток и не содержащей сыворотку крови крупного рогатого скота. Цель достигается путем добавления к основной среде Иглаальфа сыворотки пуповинной крови, инсулина, лейкемия - ингибирующего фактора , в следующем соотношении Основная среда Иглаальфа -80 Сыворотка пуповинной крови - 20- 500 ед/- 10 / Способ осуществляется следующим образом Питательную среду Игла Е альфа,содержащую 25 сыворотки пуповинной крови(ПК), оставшуюся после сепарации ПК, разводят до концентрации сыворотки 20, добавляя 1 объему среды с 25 сыворотки 0,12 объема среды без сыворотки. Затем к полученной среде добавляют инсулин, лейкемия - ингибирующий фактор , в следующем соотношении-500 д./- 10 / Среду фильтруют через специальные капсулы имеющие размер но 0,1 м и разливают по флаконам объемом 50 мл, высевают на бактериальные среды для контроля контаминации и замораживают при минус 20 С. Хранение при минус 20 С в течение 12 месяцев. Для культивирования гемопоэтических клеток среду размораживают при 4-8 С и используют в течение 2 недель. Добавление к среде 20 сыворотки ПК позволяет полностью удовлетворить потребность гематопоэтических стволовых клеток (ГСК) в компонентах крови и ростовых факторах. Лиффактор поддерживает культуру стволовых клеток в недифференцированном состоянии. Инсулин усиливают метаболизм клетки и пролиферативную активность. Таблица 1 Сравнительная эффективность культивирования гематопоэтических стволовых клеток пуповинной крови на различных питательных средах Наименование питательной среды Питательная средаН 3000 Индекс экспансии культивируемых ГСК Всех клеток 34 клеток культуры культуре 18025 6015 16328 Эффективность способа заключается в возможности получения питательной среды для культивирования гематопоэтических стволовых клеток, имеющую меньшую стоимость по сравнению с зарубежным аналогом, сходные ростовые характеристики и не содержащая сыворотки крупного рогатого скота. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Питательная среда для культивирования гематопоэтических стволовых клеток пуповинной кровина основе среды Иглаальфа,отличающаяся тем, что дополнительно содержит сыворотку пуповинной крови, инсулин, лейкемияингибирующий фактор , при следующем соотношении Основная среда Иглаальфа -80 23372 Сыворотка пуповинной крови - 20 500 ед/10 /.