Набор буферов для выделения и очистки днк на силикатном сорбенте

МИНИСТЕРСТВО ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ использовано при молекулярно-генетических исследованиях для получения высокоочищенной ДНК для проведения полимеразной цепной реакции. Технический результат,обеспечиваемый изобретением,выражается в использовании эффективных буферов при выделении и очистке ДНК на силикатном сорбенте. Набор буферов для выделения и очистки ДНК на силикатном сорбенте, включающий связывающий буфер, буфер отмывающий белки и промывочный буфер, связывающий буфер содержит 2 М ацетат натрия, 10 уксусную кислоту,6,0 и 50 этиловый спирт, при этом буфер отмывающий белки состоит из 300 мл связывающего буфера,100 мл 50 этилового спирта и 200 мл 100 изопропилового спирта,причем буфер промывочный содержит 70 этиловый спирт,10 мМ хлористый калий и 10 мМ Трис- буфер с 7,0.(72) Сарбаканова Шолпан ТаупиковнаВолков Александр АнатольевичШалгимбаева Гульмира Мухаметкалиевна(73) Товарищество с ограниченной ответственностью Казахский научноисследовательский ветеринарный институт(54) НАБОР БУФЕРОВ ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ И ОЧИСТКИ ДНК НА СИЛИКАТНОМ СОРБЕНТЕ Изобретение относится к области молекулярной биологии, в частности к способам выделения и очистки ДНК, и может быть использовано при молекулярно-генетических исследованиях для получения высокоочищенной ДНК для дальнейшего анализа с помощью полимеразной цепной реакции. Известен набор буферов для очистки и выделения ДНК на силикатном сорбенте,включающий связывающий буфер,буфер отмывающий белки и промывочный буфер. .10. 1111/ .1471-58286.2006.01428. (2006), Р.1-5. Недостатком указанного набора буферов являются затраты большого количества времени при очистке и выделении ДНК на силикатном сорбенте. Задачей изобретения является сокращение времени при выделении и очистке ДНК на силикатном сорбенте. Технический результат,обеспечиваемый изобретением,выражается в использовании эффективных буферов при выделении и очистке ДНК на силикатном сорбенте. Набор буферов для выделения и очистки ДНК на силикатном сорбенте, включающий связывающий буфер, буфер отмывающий белки и промывочный буфер, связывающий буфер содержит 2 М ацетат натрия, 10 уксусную кислоту,6,0 и 50 этиловый спирт, при этом буфер отмывающий белки состоит из 300 мл связывающего буфера, 100 мл 50 этилового спирта и 200 мл 100 изопропилового спирта,причем буфер промывочный содержит 70 этиловый спирт,10 мМ хлористый калий и 10 мМ Трис- буфер с 7,0. Изобретение осуществляется следующим образом. К 0,2 мл лизата добавляют 0,6 мл связывающего буфера, вносят в пробирки-колонки с силикатным сорбентом. Не связавшуюся с сорбентом ДНК удаляют на водоструйном насосе или центрифугированием при 4000 об/мин, 60 сек при 4 С. Затем промывают 2 раза по 0,6 мл буфером отмывающим белки и 2 раза по 0,6 мл промывочным буфером на водоструйном насосе. В конце проводят центрифугирование при 4000 об/мин, 60 сек при 4 С, подсушивают при комнатной температуре перевернутые на салфетки пробирки-колонки. Затем проводят элюирование ДНК подогретой до 60-80 С деионизованной водой по 0,1 мл. Таким образом, предложенный для выделения и очистки ДНК на силикатном сорбенте набор буферов обеспечивает ускорение, удешевление и упрощение процесса получения высокоочищенной ДНК. Использование набора буферов для выделения ДНК позволит сократить время при выделении и очистке ДНК на силикатных сорбентах для дальнейшего е анализа в ПЦР. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Набор буферов для выделения и очистки ДНК на силикатном сорбенте, включающий связывающий буфер, буфер отмывающий белки и промывочный буфер, отличающийся тем, что связывающий буфер содержит 2 М ацетат натрия, 10 уксусную кислоту рН 6,0 и 50 этиловый спирт, при этом буфер отмывающий белки состоит из 300 мл связывающего буфера, 100 мл 50 этилового спирта и 200 мл 100 изопропилового спирта,причем буфер промывочный содержит 70 этиловый спирт, 10 мМ хлористый калий и 10 мм Трис-НС с рН 7,0.