Штамм А/скворец/Костанай/236/07 (H5N1) М-2-09/Д вируса гриппа птиц, семейства Orthomyxoviridae рода Influenzavirus типа А подтипа H5N1 предназначенный для научно-исследовательских работ, разработок диагностических и профилактических средств

(51) 61 39/145 (2011.01) 12 7/00 (2011.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ новый штамм ВГП, репродуцированный в 12 суточных РКЭ и культуре клеток ФЭК при температуре(370,5)С,соответственно. Проведена адаптация штамма к 12 суточным РКЭ и культуре клеток ФЭК путем проведения четырех последовательных пассажей. Биологическая и гемагглютинирующая активности вируса в РКЭ составили 6,820,25 ЭИД 50/см 3 и 1256, соответственно, а в культуре клеток ФЭК эти показатели соответствовали 6,41 0,08 ЦД 50/см 3 и 1128. При интраназальном введении штамма в дозе 104,7 ЭИД 50 уткам и гусям, никаких характерных клинических признаков болезни не обнаружено. Штамм относится к апатогенному варианту. Интравенозный индекс патогенности штамма на 42-суточных цыплятах равен нулю. У инфицированных птиц низкопатогенным штаммом А/скворец/Костанай/236/07 (51) ВГП через 14 дней после заражения титры антигемагглютининов в сыворотках крови составили в РТГА 140-160 и вИФА 1128. Выделенный штамм А/скворец/Костанай/236/07(51) ВГП депонирован в Депозитарии особо опасных инфекции Научно-исследовательского института проблем биологической безопасности(НИИПББ) Комитета науки Министерства образования и науки Республики Казахстан под регистрационным номером М-2-09/Д и хранится при температуре минус 40-70 С. Жизнеспособность штамма в стабильном состоянии поддерживается путем освежения в 12-суточных РКЭ и культуре клеток ФЭК через каждые 3 года.(72) Кыдырбаев Жайлаубай Кыдырбаевич Азанбекова Молдир Абдилдаевна Сандыбаев Нурлан Тамамбаевич Мамбеталиев Муратбай Табынов Кайрат Казыбаевич Табынов Кайсар Казыбаевич Абсатова Жаркинай Сериковна(73) Республиканское государственное предприятие на праве хозяйственного ведения Научноисследовательский институт проблем биологической безопасности Комитета науки Министерства образования и науки Республики Казахстан(57) Получен высокорепродуктивный штамм А/скворец/Костанай/236/07 (51) М-2-09/Д вируса гриппа птиц (ВГП), семействародатипа А подтипа 51,предназначенный для научно-исследовательских работ, а также для разработки диагностических и профилактических средств против гриппа птиц с антигенной структурой 51. Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и биотехнологии и представляет собой Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и биотехнологии и представляет собой новый штамм вируса гриппа птиц типа А подтипа 51, используемый для научно-исследовательских работ, а также для разработки диагностических и профилактических средств против вируса гриппа птиц с антигенной структурой 51.Известен штамм ///184/1986 (51) вируса гриппа птиц (ВГП), выделенный в Северной Америке,репродуцируемый в 12-суточных развивающихся куриных эмбрионах(РКЭ). Биологическая активность вируса при температуре культивирования (370,5)С и относительной влажности воздуха 65-70 достигает до 4,70 ЭИД 50/см 3. Путем секвенирования гена гемагглютинина штамма ///184/1986(51) ВГП, подтвержден низкопатогенный генотип вируса. При интраназальном введении штамма /// 84/1986 (51) ВГП в дозе 104,7 ЭИД 50 домашним видам птиц, таким как куры, гуси, утки и индюки никаких характерных клинических признаков болезни не отмечено. Заболевание проходило в легкой форме и после инфицирования у всех испытанных видов птиц обнаружен антиген в титре 1,90-6,70 ЭИД 50/см 3. Интравенозный индекс патогенности (ИВИП) штамма /// 184/1986 (51) ВГП на цыплятах был равен 0,00 ( Е.., 2008). Приведенный выше аналог является наиболее близким предлагаемому изобретению по совокупности существенных признаков и признан в качестве прототипа. Недостаток штамма ///184/1986(51) выделенного в Северной Америке состоит в низкой биологической и гемагглютинирующей активностей, которые составляют 4,70 ЭИД 50/см 3 и 164, соответственно. Задачей настоящего изобретения являлось получение штамма ВГП, обладающего высокой репродуктивной активностью в системе культивирования и низкой патогенностью для птиц,пригодного для научно-исследовательских работ,разработки диагностических и профилактических средств. Предлагаемое изобретение включает штамм,совокупность существенных признаков которого обеспечивает получение следующих технических результатов. Штамм А/скворец/Костанай/236/07 (51) ВГП выделен в 2007 г. в 12-суточных РКЭ из пробы клоачного смыва скворца, доставленной с побережья озера Тактас Мендыкаринского района Костанайской области Республики Казахстан. Штамм принадлежит к семейству ,роду , типу А, подтипу 51. Штамм А/скворец/Костанай/236/07 (51) активно репродуцируется в РКЭ и культуре клеток фибробластов эмбриона кур (ФЭК) при температуре 350,5 С и 370,5 С, соответственно. Проведена адаптация штамма к 12-суточным РКЭ и культуре клеток ФЭК путем последовательных пассажей. Биологическая и гемагглютинирующая активности вируса на четвертом пассаже в РКЭ составили 6,820,25 ЭИД 50/см 3 и 1256, соответственно, а в культуре клеток ФЭК эти показатели соответствовали 6,41 0,08 ТЦД 50/см 3 и 1128. Штамм А/скворец/Костанай/236/07 (51) относится к апатогенному варианту, так как его интравенозный индекс патогенности на 42-суточных цыплятах составил 0,00 и при интраназальном введении домашним птицам, таким как утки и гуси, в дозе 104,7 ЭИД 50 не вызывал характерных клинических признаков болезни. При секвенировании установлена нуклеотидная последовательность гена гемагглютинина штамма, которая подтверждает низкопатогенный генотип вируса. У инфицированных птиц низкопатогенным штаммом А/скворец/Костанай/236/07 (51) ВГП через 14 дней после заражения титры антигемагглютининов в сыворотках крови в серологических реакциях составили в РТГА 140-160 и ИФА 1128. Выделенный штамм А/скворец/Костанай/236/07(51) ВГП депонирован в Депозитарии особо опасных инфекции Научно-исследовательского института проблем биологической безопасности(НИИПББ) Комитета науки Министерства образования и науки Республики Казахстан под регистрационным номером М-2-09/Д и хранится при температуре минус 40-70 С. Жизнеспособность штамма в стабильном состоянии поддерживается путем освежения в 12-суточных РКЭ и культуре клеток ФЭК через каждые 3 года. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Штамм А/скворец/Костанай/236/07 (51) вируса гриппа птиц семействародатипа А подтипа 51, депонированный в Коллекции микроорганизмов Научноисследовательского института проблем биологической безопасности КН МОН РК, под регистрационным номером М-2-09/Д, предназначенный для научноисследовательских работ, разработок диагностических и профилактических средств.