Модифицированное производное сантонина с противоопухолевой активностью

(51) 61 36/282 (2009.01) 61 35/00 (2009.01) 07 337/08 (2009.01) 07 307/12 (2009.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН(76) Арыстанова Танагуль Акимбаевна Серикбаева Айгуль Джумадуллаевна Рахимов Кайролла Дуйсенбаевич Рахимова Айнур Кайроллаевна Темиргалиева Эльмира Маратовна(56) Кейко Н.А., Степанов Л.Г. и др. Синтез, ДНКингибирующая и противоопухолевая активность тиосемикарбазона 2-формил-2,5-диметокси-2,3 дигидро-4 Н-пирана, его этильного аналога и медного комплекса // Хим.-фарм. журнал, т.36,36, 2002, с. 11-13(54) МОДИФИЦИРОВАННОЕ ПРОИЗВОДНОЕ САНТОНИНА С ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТЬЮ(57) Изобретение относится к фармацевтической промышленности и может быть использовано для получения лекарственной субстанции. Задача изобретения является синтез нового химического соединения,обладающий противоопухолевым действием. Технический результат достигается синтезом нового соединения -сантонина тиосемикарбазона,обладающего противоопухолевым действием. Данное изобретение касается нового химического соединения сантонина тиосемикарбазона следующей химической структуры,обладающего противоопухолевой активностью и может найти применение в медицине. Аналогом изобретения по применению является препарат фторурацил Несмотря на существование в клинической практике более 60-ти противоопухолевых препаратов, эффективность большинства из них недостаточна и спектр онкологических заболеваний,чувствительных к химиотерапии, ограничен. Среди наиболее доступных и применяемых в настоящее время цитостатиков известен 5-фторурацил,который используется отдельно или в комплексной терапии рака желудка, толстой кишки, молочной железы, печени (гепатомы), меланомы и др..630). Как и большинство препаратов, используемых для лечения злокачественных заболеваний, 5 фторурацил обладают высокой токсичностью -при его применении, как правило, наблюдаются тошнота, рвота, выраженные нарушения функций почек, нервной системы, угнетение кроветворения,разрушение ДНК и РНК как опухолевых клеток, так и нормальных клеток(М.Д.Машковский. Лекарственные средства. -Новая волна, 2010. с.1216). В отличие от синтетических препаратов,лекарственные средства растительной природы характеризуются низкой токсичностью, лучшей биодоступностью. Среди природных соединений интерес представляет сесквитерпеноид эндемичного лекарственного растения полыни цитварной сантонин, издавна применяющийся в народной медицине как противоопухолевое средство,.,-//. . . -2006. . 281. - 13117-13125). Также из литературных источников известно наличие противоопухолевого эффекта у тиосемикарбозонов,являющихся ингибиторами синтеза ДНК (Кейко Н.А., Степанов Л.Г. и др., Синтез, ДНК-ингибирующая и противоопухолевая активность тиосемикарбазона 2 формил-2,5-диметокси-2,3-дигидро-4 Н-пирана, его этильного аналрга и медного комплекса. Хим.-фарм. журнал. -Т.36, 36. -2002. -с. 11-13). Химическая модификация двух этих веществ между собой может привести к синергизму и потенцированию противоопухолевого действия. Задачей изобретения является синтез нового химического соединения,обладающего противоопухолевым действием. Технический результат достигается синтезом нового соединения - сантонина тиосемикарбазона,обладающего противоопухолевым действием. Пример 1. Сырьем для извлечения сантонина служат нераспустившиеся, похожие на семена,цветочные корзиночки цитварной полыни(местное название - дармина), образующие сплошные заросли в степях Казахстана (в районе г. Шымкента). В них содержится сантонина не менее 2,5. Используют и траву цитварной полыни с содержанием 1,75 сантонина. Технологический процесс получения сантонина протекает по следующей схеме 1.Получение кальциевой соли сантонина. 2.Извлечение кальциевой соли сантонина. 3.Выделение технического сантонина. 4. Получение чистого сантонина. Выход чистого сантонина составляет 83-84. 5.Приготовление спиртового раствора тиосемикарбазида ацетата в ступке растирают 1 г тиосемикарбазида гидрохлорида с 1 г натрия ацетата безводного, переносят смесь в колбу,кипятят с 10 мл спирта этилового 95 и фильтруют в горячем виде. 6. Получение сантонина тиосемикарбазона . К фильтрату добавляют около 0,2 г сантонина, 25239 нагревают в течение часа при температуре 100 С,охлаждают 30-60 мин. на водяной бане, добавляют воды до неисчезающего помутнения и дают медленно охладиться,выкристаллизованный тиосемикарбазон отфильтровывают. Выход продукта 84-85 . Ход реакций, однородность полупродуктов и продуктов синтеза контролировали методом тонкослойной хроматографии. В работе использовали комплект приборов для проведения тонкослойной хроматографии(Россия),УФ хроматоскоп (Россия),значения определяли в системе растворителей метанол - раствор аммиака конц. - этилацетат - спирт изопропиловый(1052015) на пластинках Сорбфил 1015(Россия), пятна обнаруживали в УФ-свете при длине волны 254 нм и парах йода. Появление на хроматограмме одного пятна сантонина тиосемикарбазона с 0,492 свидетельствует об образовании целевого продукта. Температура плавления определена на приборе 15/11 (Германия). Препарат плавится с разложением в интервалах температур 192-196 С. УФ-спектры регистрировали на спектрофотометре СФ-2000 с программным обеспечением (Россия) в диапазоне длин волн 200300 нм. ИК-спектры субстанций сняты на спектрофотометре 560 в таблетках с КВ. Спектр ЯМР-Н 1 снят на приборе-567 с рабочей частотой 100 МГц в -5. В качестве внутреннего стандарта использован ТМС, сигнал которого принят за 0 (шкала). Физические и химические характеристики представлены в таблице 1. Пример 2. Изучение противоопухолевой активности сантонина тиосемикарбазона В работе использованы мыши массой 18-25 г линий , С 57 В 1, 2, гибриды первого поколения 1 и белые беспородные крысы массой 180-250 г., линии Вистар. Исследованы на опухолях, вызванные опухолевыми штаммами солидная карцинома Эрлиха, аденокарцинома молочной железы Са 755, меланома В 16, карцинома легких Льюис, лейкемия Р 388, карциносаркома Уокер, лимфосаркома Плисса, саркома 45. Карцинома Эрлиха перевита подкожным введением 106 клеток мышам линиилейкемия Р 388 внутрибрюшинным введением 106 клеток мышам 2 меланома В 16 -подкожным введением 0,2 мл 25 взвеси опухолевых клеток мышам С 57 В 1 Са 755 и опухоль Льюис - подкожным введением такой же взвеси мышам гибридам карциносаркому Уокер, лимфосаркому Плисса и саркому 45 подкожным введением 0,4 мл 25 взвеси крысам. День перевивки опухоли считается нулевым. День перевивки опухоли считается нулевым. Противоопухолевый эффект оценен по задержке роста опухолей и по увеличению продолжительности жизни животных. Результаты оценивали на 14-й день после перевивки. Полученные результаты сравнили с контролем,обрабатывали статистически. Анализ результатов показал, что сантонина тиосемикарбазон в дозе 100 мг/кг тормозит рост опухолей солидная карцинома Эрлиха,аденокарцинома молочной железы (Са 755),меланома В 16, карцинома легких Льюиса ,карциносаркома Уокера, лимфосаркома Плисса(ЛСП), саркома 45 (С-45) до 91 по массе при достоверной разнице средней массы опухолей в данной группе по сравнению с контролем и увеличивает среднюю продолжительность жизни животных-опухоленосителей в 1,3-1,5 раза(табл.2,3). Таким образом, получено новое соединение сантонина тиосемикарбазона на основе химической модификации сесквитерпеноида полыни и тиосемикарбазида, обладающее противоопухолевой активностью. Таблица 1 Физические и химические характеристики сантонина тиосемикарбазона Выход, Т.пл., С Таблица 2 Влияние сантонина тиосемикарбазона, вводимого в дозе 100 мг/кг, на рост перевивных опухолей Группа Объем опухолей в мм 3,торможения Дни после трансплантации опухолей 10 12 3 4 5 Солидная карцинома Эрлиха Контроль 24527 45786 1403273 Сантонина 1-4 163 10514 28467 тиосемикарбазон 81 72,6 73 Контроль 21453 212160 2530241 Сантонина 3-7 263 1463 2303 тиосемикарбазон 81 84,23 85 Карцинома легких Льюис Контроль 387 11127 20734 Сантонина 3-7 72 457 14727 тиосемикарбазон 87 85 60 Меланома 16 Контроль 1038 26926 55754 Сантонина 1-4 163 10514 28467 тиосемикарбазон 81 72,6 73 Карцинома Уокер Контроль 832203 3716569 68411054 Сантонина 1-4 12681 805196 2302490 тиосемикарбазон 72 67 64 Контроль 903146 5428537 6454154 Сантонина 3-7 49635 786154 3158667 тиосемикарбазон 79 77 52 Контроль 124533 4551778 101781454 Сантонина 1,4,7,10 15436 1295248 4289992 тиосемикарбазон 75 59 65 Лимфосаркома Плисса Контроль 42451102 25911369 321981854 Сантонина 1094163 102952448 149892792 тиосемикарбазон 81 63 54 Примечания в каждой группе было от 8 до 12 животных различия достоверны 14 6 Таблица 3 Влияние тиосемикарбазона сантонина, вводимого в дозе 100 мг/кг, на продолжительность жизни мышей Группа Средняя продолжительность жизни, дни 3 4 Солидная карцинома Эрлиха 14,819 Контроль Сантонина тиосемикарбазон Контроль Сантонина тиосемикарбазон ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Сантонина тиосемикарбазон,противоопухолевым действием.