Способ диагностики хронической ишемии головного мозга у больных артериальной гипертонией

(51) 01 33/49 (2006.01) 01 33/577 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ Для диагностики хронической ишемии головного мозга у больных артериальной гипертонией определяют уровень нейронспецифической енолазы в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа, при содержании нейрон-специфической енолазы сыворотке крови более 13 мкг/л диагностируют хроническое ишемическое поражения головного мозга. Использование способа позволяет в короткие сроки с высокой специфичностью установить хроническое ишемическое поражение головного мозга на фоне артериальной гипертонии, что дает возможность своевременно выявить группу больных высокого цереброваскулярного риска, нуждающуюся в проведении лечебно-профилактических мероприятий. Табл.(72) Тундыбаева Мейрамгуль Капсиметовна Джусипов Алихан Казахпаевич(73) Республиканское государственное казенное предприятие Научно-исследовательский институт кардиологии и внутренних болезней Министерства здравоохранения Республики Казахстан(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ХРОНИЧЕСКОЙ ИШЕМИИ ГОЛОВНОГО МОЗГА У БОЛЬНЫХ АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТОНИЕЙ(57) Изобретение относится к медицине, а именно к терапии, кардиологии и неврологии и может быть использовано для диагностики хронической ишемии головного мозга при артериальной гипертонии. 21607 Изобретение относится к медицине, а именно к терапии, кардиологии и неврологии, и может быть использовано для диагностики хронической ишемии головного мозга (ХИМ) при артериальной гипертонии (АГ). Известен способ диагностики хронической ишемии головного мозга, заключающийся в выявлении методом ультразвукового исследования брахиоцефальных артерий и транскраниальной допплерографии (ТКД) специфических ТКДпаттернов, к которым относится 1.стенотические и субстенотические поражения магистральных церебральных артерий 2. повышенное циркуляторное сопротивления в сосудах основания мозга 3. гемодинамически значимая (более 15) асимметрия кровотока по средней мозговой артерии(СМА) при отсутствии стенозов 4. гемодинамически значимая (более 30) асимметрия кровотока по позвоночным артериям при отсутствии стенозов 5. высокие скорости кровотока по позвоночным(4 сегменты) и основной артериям 6. низкие скорости кровотока по позвоночным(4 сегменты) и основной артериям 7. нарушенное соотношение скоростей по передней мозговой артерии (ПМА) и СМА в виде ПМА/СМА при отсутствии стенозов 8. нарушенное соотношение скоростей по задней мозговой артерии (ЗМА) и ПМА в виде ЗМА/ПМА при отсутствии стенозов Выявление одного и более ТКД-паттернов позволяет диагностировать хроническую ишемию головного мозга.(Евстигнеев В. В.,Юршевич Е. А. Транскраниальная допплерография в диагностике дисциркуляторной энцефалопатии. Новости лучевой диагностики, 2004,1, стр. 15-19) Однако, данный способ имеет следующие недостатки для выполнения исследования требуется наличие специальной дорогостоящей аппаратуры, обученного специалиста, кроме того,процедура исследования длительная, утомительная для пациента. В качестве прототипа выбран способ диагностики хронической ишемии мозга. Для диагностики ранних - первой и второй - стадий хронической ишемии мозга исследуют субпопуляционный состав форменных элементов крови - эритроцитов и их морфоденситометрические параметры - интегральный показатель локальной кривизны мембраны, индекс спикулярности и площадь поверхности эритроцитов. Первую стадию хронической ишемии мозга диагностируют при показателях процентного содержания дискоцитов от 60 до 66,20,8, сфероцитов - от 0,7 до 11,лептоцитов - от 0,1 до 2,2, эхинодискоцитов - от 0,4 до 4,6, стоматоцитов - от 5,8 до 2,6,интегрального показателя локальной кривизны мембраны свыше 4,01,3 до 12,51,5, индекса спикулярности свыше 0,1 до 0,15, площади поверхности свыше 24,35 до 26,976. Вторую стадию диагностируют при показателях процентного 2 содержания дискоцитов от 48 до 59,эхинодискоцитов - свыше 4,6 до 9,3,дискоспикулоцитов - от 0,3 до 0,4, спикулоцитов от 0,8 до 4,2, интегрального показателя локальной кривизны мембраны от 12,51,5 до 34,0, индекса спикулярности свыше 0,15 до 0,3, площади поверхности эритроцита свыше 26,976 до 30,12.(Патент РФ,2258933, МПК 0133/49,опубликовано 20. 08.2005) Этот способ диагностики имеет существенный недостаток изменение морфоденситометрических характеристик эритроцитов не является специфической характеристикой повреждения ГМ и может трансформироваться при различных соматических состояниях, что существенно снижает точность метода-относится к дорогостоящим способам,требующим специального оборудования и реактивов. Задача изобретения - разработка способа диагностики хронической ишемии головного мозга у больных артериальной гипертонией,повышающего точность и быстроту выявления ХИМ у больных артериальной гипертонией, с целью выявления группы пациентов высокого цереброваскулярного риска, нуждающуюся в проведении лечебно-профилактических мероприятий. Технический результат заявляемого способа состоит в обеспечении высокой точности,экономичности и быстроты постановки диагноза. Кроме того, предлагаемый способ несложен и может служить методом -экспресс диагностики в терапии,кардиологии и неврологии. Сущность предложенного способа диагностики хронической ишемии мозга у больных артериальной гипертонией состоит в исследовании крови,согласно изобретению проводят определение уровня нейрон-специфической енолазы в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа и при содержании нейрон-специфической енолазы более 13 мкг/л диагностируют хроническую ишемию головного мозга. Поскольку нейрон-специфическая енолаза (НСЕ) это гликолитический нейроспецифический изофермент присутствующий в нейронах головного мозга, повышенное содержание изофермента в сыворотке крови свидетельствует о гибели нейронов, что может служить для точной диагностики хронической ишемии ГМ при АГ. Способ осуществляют следующим образом. Для исследования производят забор венозной крови из локтевой вены в количестве 5 мл натощак. Свежая сыворотка крови является рекомендованным образцом для определения НСЕ. Набор для количественного определения белка НСЕ иммуноферментным методом,(Великобритания) является твердофазным,неконкурентным методом, основанным на двух моноклональных антителах (полученных из мыши),направленных против двух различных антигенных детерминант в молекуле. Стандарты и сыворотки пациентов инкубируют вместе с биотинилированными анти-НСЕ антителами Е 21 и 21607 пероксидазой хрена, меченой моноклональными антителами Е 17 в покрытых стрептавидином ячейках микропланшета. После промывки в каждую ячейку добавляют буферный субстрат/хромогенный реагент(перекись водорода и 3,3,5,5 тетраметилбензидин), в результате происходит ферментативная реакция. В процессе реакции развивается голубая окраска, если присутствует антиген. Интенсивность окраски пропорциональна количеству НСЕ, присутствующей в образце. Интенсивность окраски измеряют на микропланшетном ридере при 620 нм (или, что необязательно, при 405 нм после добавления стопраствора). При уровне НСЕ свыше 13 мкг/л диагностируют хроническую ишемию головного мозга у больных с артериальной гипертонией. Предлагаемый способ диагностики хронической ишемии головного мозга при артериальной гипертонии прошел клиническое испытание при обследовании 18 практически здоровых добровольцев(контрольная группа) и 75 нелеченных больных АГ П-Ш степени, среднего и нелеченных больных АГ - степени, среднего высокого риска (по классификации ВОЗ/МОАГ,1999 г.). Всем обследованным проводился забор крови и определение уровня белка НСЕ, указанным выше способом. В ходе комплексного клинического,нейропсихологического,ангиологического и нейровизуализационного обследования больные АГ разделены на 1 группа - 44 больных, без клиникоинструментальных признаков цереброваскулярного заболевания 2 группа- 31 больной с хроническим ишемическим повреждением головного мозга. Для проведения статистического анализа в исследованных группах использована программа статистической обработки информации 6,0 (, , 2006). Вычисляли среднюю и ошибку средней (М). Сравнение осуществлялось с помощью критериев Стьюдента(сравнение средних). Уровень достоверности оценивался значением р. Различия при сравнении считались достоверными с вероятностью более 95 при р 0,05. Содержание НСЕ у больных АГ и в контрольной группе представлено в табл. Таблица Уровень нейрон-специфической енолазы у здоровых и больных артериальной гипертонией с хронической ишемией мозга Здоровые лица, (18) Больные АГ без ЦВЗ (44) Больные АГ с ХИМ (31) 7,51,2 8,62,1 14,52,3(13,5-18,66) Примечание - Различия с показателями группы здоровых лиц. Достоверность различий -р 0,05 -р 0,01 В ходе комплексного клиникоинструментального обследования у больных АГ с хронической ишемией ГМ уровень НСЕ был достоверно выше по сравнению с показателями здоровых лиц и больных АГ без ишемического поражения мозга и превышал значение 13 мкг/л. Полученный диагностический критерий по уровню НСЕ в сыворотке крови можно считать достаточно специфичным маркером хронической ишемии головного мозга у больных АГ. Приводим примеры. Пример 1. Пациент С, 1953 года рождения. Около 12-ти лет страдает артериальной гипертонией с максимальными цифрами АД 180/110 мы рт.ст. Из анамнеза отсутствуют указания на перенесенный инсульт,травмы головного мозга, нейродегенеративные заболевания, эпилепсию. Основные жалобы головная боль, снижение памяти, нарушение сна,шум в голове, нечеткость зрения, общая слабость,повышенная утомляемость,снижение работоспособности, эмоциональная лабильность. Отмечаются умеренные когнитивные расстройства по шкале- 27 баллов, Висконсинский тест неправильные ответы - 28, количество категорий- 7,персеверации-8, концептуализация-86. По данным МРТ исследования-визуализирован перивентрикулярный лейкоареоз. Неврологический статус легкие изменения походки и неуверенность при выполнении координаторных проб. Согласно данным клинико-инструментального обследования у пациента артериальная гипертония, осложненная хронической ишемией головного мозга. Уровень НСЕ в сыворотке крови составил 16,8 мкг/л. Пример 2. Пациент В., 1956 года рождения. Около 10-ти лет страдает артериальной гипертонией с максимальными цифрами АД 160-170/110 мм рт.ст. Из анамнеза отсутствуют указания на перенесенный инсульт, травмы головного мозга,нейродегенеративные заболевания, эпилепсию. Основные жалобы головная боль, нарушение сна, шум в голове, общая слабость, повышенная утомляемость,снижение работоспособности,эмоциональная лабильность. По данным нейропсихологического обследования по шкале- 28 баллов, Висконсинский тест неправильные ответы - 25, количество категорий- 8,персеверации-8,концептуализация-90,что соответствует нормальным значениям. Неврологический статус без особенностей. По данным МРТ исследования - без патологии. Согласно данным клинико-инструментального обследования хроническое ишемическое повреждение головного мозга на фоне артериальной гипертонии отсутствует, уровень ПСЕ в сыворотке крови составил 7,6 мкг/л. Таким образом, у больных АГ формирование хронической ишемии головного мозга сопровождается повышением нейронспецифической енолазы,что позволяет рассматривать данный фермент,как 3 21607 диагностический маркер развития ишемического поражения мозга. Использование предложенного метода имеет следующие преимущества 1) высокая специфичность в диагностике ишемического поражения ГМ 2) быстрая диагностика 3) экономичность 4) обеспечивает возможность своевременного и рационального проведения комплекса терапевтических мероприятий. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ диагностики хронической ишемии головного мозга у больных артериальной гипертонией,путем исследования крови,отличающийся тем, что проводят определение уровня нейрон-специфической енолазы в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа и при содержании нейрон-специфической енолазы более 13 мкг/л диагностируют хроническую ишемию головного мозга.