Штамм бактерий lactobacillus plantarum 14д/а-17, предназначенный для включения в состав микробных препаратов против гнойных инфекций и желудочно-кишечных заболеваний
Номер патента: 30603
Опубликовано: 16.11.2015
Авторы: Шорабаев Ерик Жарылкасынович, Ратникова Ирина Александровна, Саданов Аманкелди Курбанович, Гаврилова Нина Николаевна
Формула / Реферат
Изобретение относится к микробиологической промышленности и представляет собой новый штамм молочнокислых бактерий, который может быть использован в составе лечебно-профилактических препаратов против гнойной инфекции и желудочно-кишечных заболеваний.
Задача изобретения - получение штамма молочнокислых бактерий, устойчивого к желчи и низкому значению рН, обладающего высокой антимикробной активностью по отношению к возбудителям гнойной инфекции и желудочно-кишечных заболеваний.
Техническим результатом является получение нового штамма молочнокислых бактерий Lactobacillus plantarum 14д/А-7, устойчивого к желчи и низкому значению рН, обладающего высокой антагонистической активностью широкого спектра действия, в том числе по отношению к синегнойной палочке Pseudomonas aeruginosa, золотистому стафилококку Staphilococcus aureus, а также к возбудителям желудочно-кишечной инфекции, включение которого в состав пробиотика позволит повысить его эффективность за счет сохранения жизнеспособности при прохождении через желудочно-кишечный тракт и высокой антимикробной активности.
Текст
(51) 12 1/20 (2006.01) МИНИСТЕРСТВО ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ ПРОФИЛАКТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ ПРОТИВ ПАСТЕРЕЛЛЕЗА(57) Изобретение относится к микробиологической промышленности и представляет собой новый штамм молочнокислых бактерий, который может быть использован в составе пробиотиков против пастереллеза. Техническим результатом является получение штамма молочнокислых бактерий, обладающего высокой антагонистической активностью в отношении возбудителя пастереллеза, устойчивого к лекарственным препаратам и может быть использован в составе пробиотика для комплексной терапии пастереллеза и кишечных инфекций. Это повысит эффективность борьбы с пастереллезом.(76) Саданов Аманкелди Курбанович Гаврилова Нина Николаевна Ратникова Ирина Александровна Шорабаев Ерик Жарылкасынович Бектурганов Нуралы Султанович(54) ШТАММ БАКТЕРИЙ 173, ПРЕДНАЗНАЧЕННЫЙ ДЛЯ ВКЛЮЧЕНИЯ В СОСТАВ ЛЕЧЕБНО 30604 Изобретение относится к микробиологической промышленности и представляет собой новый штамм молочнокислых бактерий, который может быть использован в составе пробиотиков против пастереллеза. Пастереллез - контагиозная инфекционная болезнь животных многих видов,характеризующаяся при остром течении септическими явлениями, крупозным воспалением легких, плевритом, отеками в различных областях тела, а при подостром и хроническом течениях гнойно-некротизирующей пневмонией, поражением глаз, суставов, молочной железы и геморрагическим энтеритом. Одним из специфических средств лечения при пастереллезе является гипериммунная поливалентная противопастереллезная сыворотка. Однако эта сыворотка обладает слабым лечебным эффектом. Совместное применение антибиотиков и сыворотки дает хороший лечебный эффект. Так,больным взрослым свиньям вводят гипериммунную сыворотку против пастереллеза в дозе 60-80 мл,молодняку - в дозе 20-40 мл, назначают антибиотики тетрациклинового ряда,сульфаниламидные препараты(например,норсульфазол по 2-5 г внутримышечно в 30 мл дистиллированной воды) и симптоматические средства (например, уротропин по 2-5 г внутрь) Инфекционные болезни свиней /Составители Болоцкий И.А., Васильев А.К., Семенцов В.И.,Пруцаков С.В. Феникс 2007, Учебное пособие для вузов. Специальная литература Куриленко А.Н.,Крупальник В.Л., Пименов Н.В. Бактериальные и вирусные болезни молодняка сельскохозяйственных животных. - М. Колос, 2005. 466 Профилактика и лечение болезней поросят в хозяйствах Краснодарского края, вирусные заболевания. Краснодар 1987. .54. В НВП БашИнком разработана пробиотическая кормовая добавка (ТУ 100289066.064-2011,гос.регистрации 3571-10-11 БПП от 28.07.2011) на основе бактериальных штаммов 11 В (с противогрибковой) и 12 В (с антибактериальной) активностью, выделенных из ризосферы пшеницы в Уфимском районе Республики Башкортостан. Проявляет выраженный антагонизм к штаммам родов, , а также к грибам родов , , ,. Пробиотик рекомендуется для использования в комплексной терапии при лечении пастереллезной пневмонии у телят от рождения до четырех месячного возраста. Механизм действия препарата объясняют тем, что бациллы, входящие в состав препарата, способны оказывать выраженное иммуномодулирующее действие увеличивают продукцию эндогенного интерферона, усиливают функциональную активность макрофагов,повышают фагоцитарную активность лейкоцитов крови - моноцитов и нейтрофилов. Недостатком штаммов, входящих в состав пробиотика,является отсутствие у них 2 антагонистическолй активности в отношении пастереллеза. Среди молочнокислых бактерий антагонистов в отношении пастереллеза в доступной нам литературы не выявлено. Задача изобретения - получение штамма молочнокислых бактерий, обладающего высокой антагонистической активностью в отношении возбудителя пастереллеза, а именно. Решение поставленной задачи достигается выявлением антагонистической активности у штамма 173 а, находящегося в коллекции РГП Институт микробиологии и вирусологии КН МОН РК. Коллекционный номер 173 а - ИМиВ В-8. Штамм .173 а выделен из рубца жвачных животных. Представляет собой палочки с закругленными концами, 3,0-0,9 мкм, имеет тенденцию к образованию цепочек. Грамположительные,каталазоотрицательные,аспорогенные, неподвижные. Макроколония на агаре выпуклая с цельным краем, консистенция маслянистая, поверхность колонии гладкая, блестящая, по цвету бело-серая,непрозрачная. Глубинные колонии гладкие,линзообразные, светло-желтые. Молоко подкисляет с образованием сгустка. Не обладает денитрифицирующей активностью при росте на мясо-пептонном бульоне, не образует индол сероводород при росте на мясо-пептонном бульоне с добавлением 10 серной кислоты и 0,05 нитрата натрия. Рост на синтетической среде с минеральным азотом хороший. Не растет на картофельной среде. Подкисляет среды с глюкозой, лактозой, мальнозой,маннитом, галактозой, рафинозой, целлобиозой,ксилозой, арабинозой, маннозой, сорбитом. Крахмал и глицерин не использует. Глюконат стимулирует образование углекислого газа. При сбраживании глюкозы образуется молочная кислота - 1,71,уксусная кислота - 0,10, газообразование отсутствует. Микроаэрофил,факультативный анаэроб, минимальный рост при 20 С, оптимальный- 37 С, при 50 С роста нет. Не патогенный. Обладает широким спектром антимикробной активности (Ратникова И.А., Гаврилова .Н.,Колоколова Н.Н. Идентификация антибиотических веществ молочнокислых бактерий // Биотехнология. Теоретический и научно-практический журнал. 1995. -5-6. - .19-21), в том числе к . . Сущность изобретения поясняется следующими конкретными примерами. Пример 1 Культуру .173 а выращивают в течение 24 ч при 37 С на питательной средеследующего состава (г/л) дрожжевой экстракт - 5,0 мясной экстракт - 10,0 пептон - 10,0 глюкоза - 20,0 лимоннокислый аммоний - 2,0 уксуснокислый натрий - 5,0 твин 80 - 1,0 24 - 2,0 КН 2 Р 4 2,0 472 - 0,2 442 - 0,05 ( 6,2-6,6). Затем определяют антагонистическую активность в отношении кишечной инфекции и методом диффузии в агар следующим образом. Чашки Петри с ровным дном помещают на горизонтальную поверхность. На водяной бане расплавляют в колбах стерильную плотную питательную среду следующего состава (г/л) бульон Хоттингера - 30,0 пептон - 5,0 натрий хлористый - 5,0 глюкоза - 10,0 агар-агар - 20,0 вода питьевая для доведения объема среды до 1 дм 3. После охлаждения до 45-50 С в агаризованную среду вносят взвесь тест-культуры из расчета 1,0 см 3 одномиллиардной взвеси на 100 см 3 среды. Содержимое колбы перемешивают и разливают в чашки Петри по 10 см 3 в каждую. В застывшей среде буром вырезают лунки,обычно по шесть. В приготовленные лунки вносят по 0,1 см 3 односуточной культуры молочнокислых бактерий. Затем чашки выдерживают около 3 ч при комнатной температуре для диффузии раствора в агар, после чего помещают в термостат при температуре 37 С на 16-18 ч. Измеряют диаметр зон подавления роста тест-культур. Для каждого образца рассчитывают среднее арифметическое значение не менее чем из трех определений. Результаты исследований представлены в таблице 1. Таблица 1 Антагонистическая активность штамма .173 а при росте в средеДиаметр зон подавления роста тест-культур, мм Как видно из представленной таблицы, штамм 173 а при росте на средеобладает антагонистической активностью не только в отношении возбудителей колибактериоза и сальмонеллеза, но и пастереллеза. Пример 2 Культуру .173 а выращивают в течение 24 ч при 37 С на комбинированной питательной среде следующего состава (г/л) кукурузный экстракт (по сухому веществу) - 15,0 глюкоза -13,0, меласса 18- 0,003 КН 2 РО 4 - 0,3 К 2 НРО, - 0,7- 0,17 4 х 7 Н 2 - 0,5 пептон - 3,0 СаС 2, - 10,0 (7,0). Затем определяют антагонистическую активность в отношении кишечной инфекции ианалогично примеру 1. Результаты исследований представлены в таблице 1. Таблица 1 Антагонистическая активность штамма .173 а при росте в среде комбинированной среде Диаметр зон подавления роста тест-культур, мм Как видно из представленной таблицы, штамм 173 а при росте на комбинированной среде также обладает антагонистической активностью в отношении возбудителя пастереллеза. Пример 3 Культуру .173 а выращивают аналогично примеру 1, затем определяют ее устойчивость к антибиотикам Для определения чувствительности культуры .173 а к антибиотикам использовали диски, пропитанными антибиотиками в следующих концентрациях сульфадимезин, левомицетин, сульфадиметоксин,норсульфазол, этазол, тетрацицлин - по 50,0 фуразалидон - 15,0. Диски помещали на поверхность агара, предварительно засеянного испытуемым штаммом. Об устойчивости штамма к лекарственным средствам судили по зонам подавления роста культуры. Результаты представлены в таблице 3 Таблица 3 Зоны подавления роста культуры 173 а лечебными препаратами Штамм бактерий Диаметр зон подавления роста молочнокислых бактерий лекарственными препаратами, мм 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10.173 8 8 0 0 0 0 0 0 0 0 Примечание Эритромицин - 1, стрептомицин - 2, тетрациклин - 3, сульфадимезин - 4, левомицетин - 5,сульфадиметоксин - 6, норсульфазол - 7, этазол - 8, тетрацицлин - 9, фуразалидон -10 Как видно из таблицы 3, штамм .173 а устойчив к испытанным лекарственным средствам. Небольшие зоны подавления роста культуры (8 мм) отмечены только при воздействии на нее эритромицина и стрептомицина. Таким образом, штамм .173 а обладает антагонистической активностью к возбудителю пастереллеза, устойчив к лекарственным препаратам и может быть использован в составе пробиотика для комплексной терапии пастереллеза и кишечных инфекций. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Штамм бактерий 173 а,депонированный в коллекции Института микробиологии и вирусологии МОН РК под коллекционным номером ИМиВ В-8,предназначенный для включения в состав лечебнопрофилактических препаратов против пастереллеза.
МПК / Метки
МПК: C12N 1/20
Метки: заболеваний, plantarum, штамм, препаратов, бактерий, lactobacillus, микробных, состав, предназначенный, инфекций, гнойных, желудочно-кишечных, включения, против
Код ссылки
<a href="https://kz.patents.su/4-30603-shtamm-bakterijj-lactobacillus-plantarum-14d-a-17-prednaznachennyjj-dlya-vklyucheniya-v-sostav-mikrobnyh-preparatov-protiv-gnojjnyh-infekcijj-i-zheludochno-kishechnyh-zabolevanijj.html" rel="bookmark" title="База патентов Казахстана">Штамм бактерий lactobacillus plantarum 14д/а-17, предназначенный для включения в состав микробных препаратов против гнойных инфекций и желудочно-кишечных заболеваний</a>
Предыдущий патент: Штамм бактерий lactobacillus salivarius 8д/ак-5, предназначенный для включения в состав микробных препаратов против бруцеллеза
Следующий патент: Штамм бактерий lactobacillus casei 173a, предназначенный для включения в состав лечебно-профилактических препаратов против пастереллеза
Случайный патент: Способ получения флотореагента-вспенивателя