Штамм бактерий Bacillus subtilis, используемый для получения препарата для профилактики и лечения воспалительных процессов и аллергических заболеваний

НАЦИОНАЛЬНОЕ ПАТЕНТНОЕ ВЕДОМСТВО ПРИ КАБИНЕТЕ МИНИСТРОВ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН(73) Оренбургский государственный медицинский институт(54) ШТАММ БАКТЕРИЙ ВАСЦЬЦЗ ЗЩВТШЗ. ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ И АЛЛЕРГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ(57)Изобретение относится к биотехнологии. к средствам для профилактики и лечения патологических процессов. а именно гнойно-воспалительных заболеваний различной локализации и пищевой аллергии.Изобретение относится к биотехнологии. к средствам для профилактики и лечения патологических процессов. а именно гнойно-воспалительных заболеваний различной локализации и пищевой аллергиицелью изобретения является новый штамм Вастиз зиттз 534. Способность проникать из желудочно-кишечного тракта и концентрироваться в тканях патологического очага. выделяя антибактериальные вещества. протеолитические ферменты,иммуномодуляторы. позволяет повысить эффективность и лечение (и профилактику) гнойно-воспалительных процессов различной локализации и пищевой аллергии. Штамм выделен из негнойной раны больноЦельюизобретения является штамм Вастиз зибттз 534. способный проникать из желудочно-кишечного тракта и концентрироваться в тканях патологического очага. выделяя антибактериальные вещества. протеолитические ферменты, иммуномодуляторы. что позволяет повысить эффективность профилактики и лечения гнойно-воспалительных процессов различной локализации и пищевой аллергии. Штамм Вастив зибтйпз 534 депонирован во Всесоюзной коллекции микроорганизмов Института биохимии и физиологии микроорганизмов АН СССР под М 1666 О. Препарат из штамма обеспечивает усиление лечебного эффекта за счет проникновения бактерий в очаг повреждения. где они вырабатывают биологически активные вещества, тем самым подавляя развитие инфекции и способствуя очищению от некротизированных тканей.го и депонирован во Всесоюзной коллекции микроорганизмов Института биохимии и физиологии микроорганизмов под Мг 1666 О.Штамм В. зиьтйпз ВКМ Мг 8-16660 характеризуется следующими свойствами.Купьтурно-морфологические свойства. Палочки. Величина клеток односуточной агаровой культуры (24) х (0.60.8) мкм. Бактерии подвидные. Споры образуют. капсулы не образуют. По Граму окрашиваются положительно. Колонии на мясо-пептонном агаре шероховатые. с фестончатыми краями. со слабым розовым оттенком. диаметром 2-12 мм. Штамм размножается при 15-50 С. оптимум роста 3637 С. На мясо-пептонномбульоне при 37 С через 18-24 ч образует белесоватую пленку на поверхности и небольшой придонный осадок, состоящий из пленок. На гретой среде Тароцци через 2448 ч инкубации при 37 С отмечается рост в виде нежной белесоватой пленки, растет при 7 хлорида натрия.Биохимические свойства. Вызывает гидролиз крахмала. редукцию нитратов. Расщепляет без выделения газа глюкозу. сахарозу маннит. мальтозу. дульцит. галактозу. ксилозу, лактозу. Рамнозу. ли зин аргинин, орнитин не ферментируеты, Сероводород и индол не образует. Ацетилметилкарбинол и каталазу выделяет. Чувствителен к бензилпенициллину, амнициллину. эритромицину. мономицину, линкомицину. тетрациклину. не чувствителен к попимиксину.Штамм продуцирует антибиотик широкого спектра действия. подавляющий рост стафилококков. стрептококков. протея. синегнойной палочки, дрожжевых грибков. Выделяет протеолитические ферменты,расщепляющие белки.В 200 бактериологических матрац разливают по 250 смз 3-ного стерильного мясо-пептонного агара. В каждый из них с соблюдением асептики вносят по 10 смз взвеси производственного штамма В. зиотшз ВКМ М 8-16660. содержащей по 100 млн. клеток в 1 смз О,9-ного раствора натрия хлорида. Матрацы закрывают ватномарлевыми пробками и помещают в термостаты с температурой 3 б 37 С. Через 24 ч с соблюдением асептики выросшую культуру смывают стерильным раствором 0.9-ног раствора натрия хлорида из расчета 100 см на 1 бактериологический матрац. Полученную взвесь разливают в 500 смз стеклянные флаконы. 24 ч при давлении 70 Па проводят лиофилизацию. Стабилизаторы при этом не оказывают существенно влияния на лечебный эффект. Они могут быть различными 0.9-ный раствор натрия хлорида,5-ная глюкоза. сахарозо-желатиновая смесь и др.В 1 мг полученного препарата (споробактерин) содержится 250 млн. живых клеток штамма Ввиьтйпз ВКМ М 8-16660. Препарат подавляет рост золотистого стафилококка в зоне 30 мм, протея в зоне 28 мм,дрожжевого грибка в зоне 32 мм.Препарат назначается людям внутрь по 5-10 млрд. клеток в течение 10 сут. Используется для профилактики и лечения гнойновоспалительных процессов различной локализации (гнойные раны, остеомиелит,сепсис, пневмония и др.). пищевой аллергии, дисбактериоза.П р и м е р 1. Больная А 59 лет. Диагноз обострение хронического тонзиллита. Больна в течение двух суток. Отмечает непереносимость антибиотиков. сульфаниламидов. При употреблении в пищу молока и моркови появлялись диаррея и крапивница (высыпания на коже). Внутрь назначен препарат на основе живой культуры штамма В. зиьтйпз ВКМ М 8-16660 в дозе 5 млрд. клеток один раз в сутки. Явление обострения тонзиллита купированы на 4 сут. Лечение продолжено еще в течение 6 дней. Осмотрена через 6 мес. Клинически здорова. Употребляет в пищу в умеренных количествах молоко и морковь. Пищевой аллергии не отмечает.П р и м е р 2. Больная М., 56 лет. Диагноз костный панариций И пальца левой кисти, лимфаденит. Больна 2 мес. Дважды проводилось вскрытие гнойника. выполнялась операция секвестрэктомия. Получала антибиотики широкого спектра действия перевязки с антисептиками. Больной предложена ампутация пальца. Н палец резко отечен. цианотичен (синюшен). В области средней фаланги рана около 1 см вдиаметре. Гранупяции бледные. покрыты фибрином. отделяемое серозно-гнойное. Увеличены и болезненны лимфоузлы в области локтевого сустава. При бактериологическом исследовании выделены золотистый стафилококк и бактерии рода Рэеиоотопаз. Внутрь назначен препарат на основе живой культуры штамма В. эиоттз ВКМ Не 8-16660 по 5 млрд. клеток в 2 раза в сутки. Производились перевязки с 10-ным раствором натрия хлорида. Штамм В. зиштз КМ М 846660 выделен из крови и из раны через сутки. Через 3 дня рана очистилась. на 9 сут она заэпителизировалась.П р и м е р 3. Больная Г., 48 лет. Диагноз хронический сепсис. воспалительный инфил ьтрат левого предплечья. сахарный диабет средней тяжести. дисбактериоз.Больна в течение 1,5 лет. После микротравм и без видимых причин стали возникать фурункулы. абсцессы и флегмоны на конечностях и грудной клетки. Перенесла 9 операций вскрытия и дренирования гнойников. В результате длительного применения антибиотиков развился дисбактериоз, беспокоили чередование диарреи и запоров. метеоризм. Соблюдала диету и постоянно получала инсулин. Во время очередного обострения и формирования воспалительного инфильтрата осмотрена в клинике. Из крови выделен золотистый стафилококк. В течение 10 сут проведено лечение бактериальным препаратом на основе живой культуры штамма В. эирттз ВКМ Мг 8-16660 по 5 млрд. клеток два раза в сутки. Препаратназначался внутрь. Другие антибактериальные препараты больше не получала. Через 2 сут воспалительный инфильтрат исчез. В посеве крови обнаружен только штамм В. 5111311115 ВКМ М 8-16660. Нормализован стул.П р и м е р 4. Для предупреждения гнойно-хирургической инфекции препарат давался внутрь по 1 капсуле (5 млрд. клеток) в сутки в течение 10 дней 9 больным с открытыми переломамиконечностей, 7 со случайными ранами мягких тканей. 12 после плановых оперативных вмешательств(остеосинтеза). Для лечения споробактерин в дозе 1-4 капсулы в сутки внутрь в течение 10 дней применен у 14 больных с острым обострением хронического остеомиелита. у 14 гнойными ранами. у 6 с гнойно-воспалительными процессами в области спиц компрессионно-дистракционных аппаратов, у 1 черепно-мозговой травмой, пневмонией. менингитом. пролежнями, у 1 с хроническим сепсисом на фоне сахарного диабета. у 2 с тонзилитом, у 1 с гайморитом. По показаниям у 12 больных С ОбШИрНЫМИ нагноитепьными процессами курс лечения через 3-7 сут повторялся.У 9 больных, ранее длительно получавших антибиотики. были клинические проявления дисбактериоза боли и вздутие живота. чередование запоров и жидкого стула. Кроме того. у 7 больных отмечена непереносимость одного или нескольких антибиотиков, сульфаниламидов, а у одной пищевая аллергия на рыбу, цитрусовые,морковь. помидоры. кВ период лечения споробактерином все больные антибиотики и другие антисептические препараты не получают. Хирургическое лечение, дезинтоксикация, стимулирующую терапию проводят по показаниям и не отличаются от методов, принятых в клинике.При профилактическом приеме спорбактерина по 1 капсуле внутрь нагноение раны отмечено у одного из 28 больных. У этого пострадавшего с открытым переломом голени вследствие некроза кожи образовался струп. который постепенно отторгся. Рана зажила вторичным натяжением. В то же время у больных, неполучавших споробактерин. гнойно-воспа лительные процессы встречались чаще (р 0.05). Так. в клинике нагноения открытых переломов наблюдались в 36. случайных ран мягких тканей в 14. послеоперационных ран после остеосинтеза в 7 наШтамм Вцзибттз высеян из крови у 27 из 28 больных. а из раны у 26 из 28 больных.Осложнений при профилактическом применении споробактерина не отмечено. что подтвердили клинические наблюдения и данные анализов.Из 36 больных с гнойными ранами (в том числе с остеомиелитом.хрониосепсисом) стафилококк в монокультуре и составе микробных ассоциаций высеян у 26. сине-гнойная палочка 6. кишечная палочка у 4. протей у 3. прочие бактерии у 8. К действию пяти и более антибиотиков были устойчивы 76 полученных штаммов. Через сутки после первого приема наблюдалось ЗНЗЧИТЭЛЬНОЗ увеличение количества ГНОЙ ного отделяемого. Раны быстро очищались от некротизированных тканей. В последующем менялся характер раневого секрета. его количество уменьшалось из гнойного он постепенно становился серозно-гнойным с легкой примесью разложившейся крови. Через 1-3 сут после начала лечения появлялась ярко-розовая грануляционная ткань. исчезали отек. лимфаденит, пимфагоит. активизировалась эпителизация.Заживление гнойных ран наступило у 23 из 36 больных. стихание воспалительного процесса (нормализация температуры тела. очищение раны от некротизированных тканей, уменьшение количества гнойного отделяемого и др.) у 11. В последующем раны зажили и свищи закрылись у 9 из них. Только у 2 больных (с обострением хронического остеомиелита и с нагноением в области спицы аппарата Илизарова) лечение Споробактерином было безуспешным. У последнего нагноение в области одной спицы стихло. но вновь возникло в области другой спицы. При лечении пневмоний.гайморита стойкое выздоровление получено у всех больных. с Аллергических реакций. несмотря нане наблюдали. Клинические проявления дисбактериоза стихли у всех 9 больных через 1-4 сут. Учитывая. что до применения споробактерина 21 больной в течение 642 дней без положительного эффекта лечился протеолитическими ферментами,антибиотиками и другими антисептиками. полученные результаты следует признать хорошими. Препарат таким образом. на основе штамма В. зиотшз ВКМ Мг вмввво обладает выраженной лечебной активностью при гнойно-хирургической инфекции подавляет рост возбудителей, способствует очищению ран от некротизированных тканей. ускоряет процессы заживления. Он мо жет быть использован для лечения другихвоспалительных процессов. вызываемых бактериальной микрофлорой пневмоний и тонзилпитов и др.При профилактическом лечении препаратами уменьшается число нагноений ран и открытых переломов.осложнений при лечении препаратом не отмечено. клинические проявления пи 2873Штамм бактерий Васшиз зишшз ВКМ.8-16660. используемый для получения препарата для профилактики и лечения воспалительных процессов и аллергических заболеваний.Верстка Казпатент, исполнитель ЕА.Хасбиева Ответственный за выпуск ЭЗ. Фаизова