Штамм бактерий BACILLUS SERRULATUS для прозводства препарата, стимулирующего рост птицы

НАЦИОНАЛЬНОЕ ПАТЕНТНОЕ ВЕДОМСТВО РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН(56) Физиологические и биохимические основы повышения продуктивности сельскохозяйственных ЖИВОТНЫХ Лениздат,1984, с. 31-34.Образование физиологически актив ных веществ микроорганизмами. Наука,1975, с. 21-29.(54) ШТАММ БАКТЕРИЙ ВАСТЬЬПБ БЕККПЬАТПБ ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ПРЕПАРАТА, СТИМУЛИРУЮЩЕГО РОСТ ПТИЦЫ(57) Изобретение относится к микробиологической промышленности, в частности выделения нового штамма для производства препарата стимулирующего рост птицы. Целью изобретения является получение нового штамма, обладающего более высоким синтезом витаминов группы В. Штамм бактерий Вас 111 п 5 5 е 1 п 11 ат 11 депонирован в ЦМПМ под Не В 7592. Штамм продуцирует витамин В 3 в количестве 290000, В 5 (РР) - 3600, Вб (придоксин) 66000, В 7 (биотин) - 5400, инозат 4139000, В - 39,6 мкг/л кулЬтуралЬноЙ жидкости. Стимулирует рост ць 1 плятбройлеров на 17,6 по сравнению с контролем (без препарата).Изобретение относится К микробиологической промышленности, в частности К выделению нового штамма для получения препарата, стимулирующего рост птицы.Целью изобретения является получение нового штамма для производства препарата, стимулирующего рост птицы,обладающего более высоким синтезом витаминов группы В.Штамм бактерий Вас 111 п 5 зетпатиз выделен из почвы путем посева проб почвы на жидкую среду Рубенчика с последующим выделением чистых культур мочевиноусваивающих бактерий с использованием твердых сред Рубенчика и Омельянского, И отбором штамма, продуцирующего витамины, аминокислоты,антибиотические вещества. Авторами штамму присвоен Не П 2-128. Штамм бактерий Вас. 5 егп 11 ати П 2-128 депонирован в центральной коллекции промышленных микроорганизмов под номером ЦМПМ В-2592.Штамм имеет следующее морфологокультуральные признаки на мясопептонном агаре (МПА) колонии серовато-белые в виде снежинки, плоские, с зубчатыми краями, размером по 5 см и более, на МПА с 5-ной мочевиной колонии так же, как на МПА. На указанных средах клетки имеют форму прямых или слегка искривленных палочек с закругленными концами, размером 3-101 мкм встречаются и длинные цепочки. Особенно много цепочек на МПА. Клетки подвижны, хорошо окрашиваются обычными анилиновыми красками и положительны по Грану. Спора овальная или продолговатая, располагается в центре клеток размером 2-31,5-2 мкм.На синтетической твердой среде Рубенчика с 5-ной мочевиной - колонии серовато-белые в виде снежинки, более компактные (несколько меньше размером 2-3 мм) с приподнятой бугристой поверхностью, с зубчатыми или нитчатыми краями. Клетки имею форму прямых или слегка искривленных палочек с закругленными концами встречаются короткие и длинные цепочки клеток.На мясо-пептонной желатине растет по длине укола рост на поверхности и умеренный по длине укола по уколу нитевидный. разжижения не наблюдается. На мясо-пептонном бульоне (МПБ) - легкое помутнение с пленкой на МПБ с 5-ной мочевиной - рост такой же, как на МПБ на полужидком МПА - рост на поверхности среды с образованием легко разбивающейся пленки на полужидком МПА с 5 -ной мочевиной рост, как на полужидком МПА без мочевины на жидкий синтетической среде Рубенчика с 5-ной мочевиной умеренное помутнение с пленкой.На указанных выше средах клетки штамма имеют вид прямых или искривленных палочек с закругленными концами, формирующих цепочки.При выращивании штамма на среде,оптимизированной по Бирюкову (дистиллированная вода 1000 мл, мочевина 7,26 г,сахароза 9,82 г, КН 2 РО 4 1,0 г, 1 ТаС 1 1,0 г,М 3 О 47 Н 2 О 1 г, РеС 13 следы, рН 8,0-8,2) в колбах-качалках (240-250 об/мин) и в ферментерах, культура дает равномерное обильное помутнение, при этом урожай клеток за 2-3 сут. достигает до 15 млрд/мл среды. Растет на среде Рубенчика при температуре 28-30 С и рН 6,6-8,2, Аэроб.На голодной минеральной среде Рубенчика на рост штамма оказывает стимулирующее действие ВЬ-аргинин солянокислый, Ь-треонин, Ь-изолейцин, Ь-цистеин, которые взаимозаменяемы.Восстанавливает нитраты, обладает каталазной, аминолитической И уреазной активностью. Редукция метиленовой сини, гемолиз эрттроцитов барабана, токсичность не выражены, образование аммиака, сероводорода, индола не наблюдается. Является антагонистом золотистого стафилококка. Штамм нетоксичен для теплокровных.Штамм хранят на полужидком МПА с мочевиной и без нее под вазелиновым маслом высотой около 1 см.Пересевают один раз в 3-4 мес. Хорошо сохраняется лиофильно высушенным на стерильном обезжиренном молоке при плюс 5 С.Были проведены сравнительные исследования с известными видами мочевиноусваивающих бактерий, трансформирующих мочевину в микробный белок,продуцирующих витамины группы В,свободные аминокислоты, антибиотические вещества и используемых в качестве стимулятора роста при выращивании бройлеров. Полученные материалы представлены в табл. 1.Из таблиц видно, что штамм бактерий В. егш 1 атп 5 П 2-128 более эффективен по качественному набору и по количественному содержанию витаминов в сравнении с известными штаммами.Выращивание штамма В. егш 1 аш 5 П 2-128 осуществляют на стерильной среде Рубенчика, следующего состава, г/лПосевной материал, содержащий не менее 60 млрд. микробных тел в 1 мл, вводят в количестве 2,5 к общему объему среды. Ферментацию проводят при температуре 28 /- 1 С (КП 4/ 1) и аэрации 4 Ом 3 воздуха на 1 мз культуральной жидкости в 1 ч, рН 8,0-8,2, в течение трех-четырех суток.Титр клеток в культуральной жидкости достигает 15 108 клеток/мл.Затем в культуральную жидкость вводят отруби из расчета 11 и высушивают при температуре 60-70 С, затем стандартизируют по содержанию витамина В 3. В готовом препарате содержание витамина должна быть не менее 2900 мкг/г.Пример 2. Сухой препарат применили в качестве стимулятора роста при выращивании ць 1 плят-бройлеров с суточного до 56-дневного возраста. Препарат вводят в комбикорм в количестве 0,2-1 из расчета содержания 9 - 10 мг витамина В 3 в 1 кг комбикорма.Штамм бактерий Вас 111 и 5 егг 111 аш 5 ЦМПМ В-2592 для производства препарата, стимулирующего рост птицы.Образование свободных витаминов группы В различными штаммами бактерий (мкг/1000 мг среды)ПрИМСЧЗНИП На СВОбОДНЫС витамины ИССЛДОВЗНЫ кулЬтуралЬные ЖИДКОСТИТаблица 2 Влияние препарата на рост Цыплят-бройлеров и выход продукцииво Цыплят ностъ ЦЫ- (тушка 1 в начале в начале в конце в к длят, Катого- На 1 КГ в к опыта опыта, г опыта, г Контролю рии), Прирос контролю ЖИВОИ массы,Верстка Казпатент, исполнитель К.Л. Бражников Корректор Н.А. Молчанова Ответственный за выпуск ЭЗ. Фаизова