Способ диагностики бактериальных болезней плодовых и лесных древесных культур

(51) 01 63/00 (2006.01) 01 1/00 (2006.01) МИНИСТЕРСТВО ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ может быть использовано при защите плодовых и лесных древесных культур от бактериальных болезней, в том числе и карантинных. Предлагаемое изобретение позволит быстро и упрощенно провести диагностику бактериальных болезней плодовых и лесных древесных культур. Правильно выбрать и целенаправленно провести защитные мероприятия, в том числе и карантинные и предотвратить потери от болезни. Суть изобретения заключается в том, что после поверхностной стерилизации обжиганием в спирте пораженные болезнью образцы древесины плодовых и лесных древесных культур помещают в стерильную воду на 6-12 часов и после диффузии возбудителя заболевания в воду его выделяют в чистую культуру и, на основании морфологических,культуральных и патогенных свойств, проводят идентификацию.(72) Джаймурзина Алия Абдрахимовна Копжасаров Бакыт Кенжекожаевич Сагитов Абай Оразулы Умиралиева Жансая Зиятовна(73) Товарищество с ограниченной ответственностью Казахский научноисследовательский институт защиты и карантина растений(56) Гвоздяк Р.И., Яковлева Л.М. Методические указания Диагностика бактериальных болезней лесных древесных пород. Москва, 1980, с.11-12(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ БОЛЕЗНЕЙ ПЛОДОВЫХ И ЛЕСНЫХ ДРЕВЕСНЫХ КУЛЬТУР(57) Изобретение относится к области сельскохозяйственного производства, а именно к защите растений от инфекционных заболеваний и Изобретение относится к области сельского хозяйства, а именно к защите растений от инфекционных болезней,и может быть использовано при защите плодовых и лесных древесных культур от бактериальных болезней, в том числе и карантинных. Известен способ визуальной диагностики бактериальных болезней по симптомам их проявления на различных органах растений(Хохряков М.К., Потлайчук В.И., Семенова А.Я.,Элбакнян М.А. Определитель болезней сельскохозяйственных культур. Колос, 1984. с.203240). Недостатком известного способа является то, что аналогичные симптомы могут вызвать и другие микроорганизмы грибы, вирусы, микоплазмы, а также абиотические факторы, недостаток влаги или переувлажнение, резкие перепады температуры,токсические вещества, нарушение режима питания(избыток или недостаток микро и макроудобрений). Выявить и установить бактериальные болезни, на основании симптомов не всегда возможно. Для проведения целенаправленных защитных мероприятий необходима точная диагностика. Известен способ диагностики бактериальных болезней путем микроскопирования (Методы диагностики бактериозов. Справочная книга Бактериозы культурных растений перевод с немецкого К.В. Попкова. Москва. Колос. 1980. с.6263). Для этого готовят микроскопические препараты из пораженных органов растений на границе между больной и здоровой тканью. Препараты просматривают под микроскопом. Если на средах тканей видны скопления бактериальных клеток, то можно распознать бактериальную природу заболевания. Недостатком известного способа является то, что места повреждения органов растений могут быть заселены сапрофитной и эпифитной микрофлорой,которые не являются фитопатогенными бактериями. Известен способ диагностики бактериальных болезней путем реакции сверхчувствительности на индикаторном растении пеларгонии (комнатная герань). (Инновационный патент РК 74052 от 01.06.2011 МПК А 01 56/06), где в качестве инокулюма используется вытяжка из пораженных органов растений. При бактериальной природе болезни в местах инъекции образуются некротические пятна. Сапрофитные (непатогенные) виды бактерий не вызывают такую реакцию(некроз) даже при введении высоких концентраций. Недостатком известного способа является то, что при этом устанавливается только бактериальная природа болезни, но не выделяется возбудитель болезни в чистую культуру. Многие растения поражаются несколькими видами бактериозов. Так, плодовые культуры поражаются двумя видами бактериоза - некрозом, возбудитель, и бактериальным ожогом - возбудитель. Бактериальный ожог является карантинным заболеванием для республики. Оба бактериоза схожи по симптомам и поражают кору и 2 древесину плодовых культур. Для их точной диагностики необходимо выделение бактерий в чистую культуру,чтобы на основании морфологических,культуральных патогенных признаков провести их идентификацию. Известен способ диагностики бактериальных болезней плодовых и лесных древесных пород изолированием из пораженных органов дерева чистой культуры возбудителя (Гвоздяк Р.И.,Яковлева Л.М. Методические указания Диагностика бактериальных болезней лесных древесных пород. Москва 1980. .11-12). Недостатком известного способа является то, что пораженная болезнью древесина плодовых и лесных древесных культур очень твердая и не поддается мацерации, ее необходимо размягчать в воде несколько дней (2-3 дня) часто возбудители находятся в глубоких слоях паренхимы древесины(при некрозе и ожоге плодовых) и в сосудистой системе при бактериальном раке березы. Задача изобретения - разработать способ быстрой и упрощенной диагностики бактериальных болезней плодовых и лесных древесных культур. Технический результат достигается тем, что в разработанном способе диагностики бактериальных болезней плодовых и лесных древесных культур пораженные болезнью образцы древесины поверхностно стерилизуют обжиганием в спирте,выдерживают в стерильной воде 6-12 часов, после диффузии возбудителя в воду, его выделяют в чистую культуру. Способ осуществляется следующим образом. Пораженный бактериозом образец древесины яблони и пораженный бактериальным раком образец древесины березы промывают проточной водой, слегка просушивают, обливают спиртом и обжигают. Обеззараженный снаружи материал опускают в колбу со стерильной водой и выдерживают 6-12 часов для диффузии возбудителя болезни в воду. Затем несколько капель воды высевают на питательную среду картофельный агар и растирают стерильным шпателем Дригальского по трем чашкам Петри с питательной средой для получения отдельных колоний бактерий,возбудителей болезни. По морфологическим,культуральным и патогенным свойствам изолированных в чистую культуру бактерий проводят их идентификацию. В эталоне(прототип) также образцы поверхностно обеззараживают промыванием в проточной воде и обжиганием спиртом. Затем стерильным скальпелем расщепляют образцы на отдельные кусочки и раскладывают в стерильные влажные камеры (чашки Коха, увлажненные фильтровальной бумагой), и помещают в термостат при температуре 25-26 С. Через несколько дней(3-5 дней) на поверхности древесины образуются капельки экссудата. Их помещают в пробирках со стерильной водой, делают серию разведений и высевают на питательную среду. Для получения отдельных колоний бактерий также растирают шпателем Дригальского. По морфологическим культуральным и патогенным свойствам изолированных в чистую культуру бактерий проводят их идентификацию. Использование предлагаемого изобретения позволит быстро и точно провести диагностику вида бактериального заболевания плодовых и лесных древесных культур, в том числе и карантинного бактериального ожога плодовых культур и провести своевременно защитные и карантинные мероприятия. Предлагаемое изобретение имеет ряд преимуществ перед известными способами. 1. Быстрота и точность диагностики вида бактериального заболевания. 2. Возможность изолировать возбудителя болезни из глубоких слоев паренхимы древесины и из сосудистой системы. 3. Сокращение длительности бактериологических анализов. 4.Возможность выявления карантинного заболевания - бактериальный ожог плодовых культур. 5.Возможность своевременно провести защитные и карантинные мероприятия. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ диагностики бактериальных болезней плодовых и лесных древесных культур,включающий поверхностную стерилизацию пораженной древесины, отличающийся тем, что ее помещают в стерильную воду на 6-12 часов и после диффузии возбудителя заболевания выделяют в чистую культуру.