Способ ранней дигностики стереоидрезистентного нефротического синдрома у детей и подростков

(51) 61 1/307 (2006.01) 01 33/493 (2006.01) 01 33/50 (2006.01) 01 33/53 (2006.01) МИНИСТЕРСТВО ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ диагностики резистентности нефротического синдрома к гормональной терапии у детей. Способ ранней диагностики стероидезистентного нефротического синдрома включает исследование мочи иммунохимическим методом на содержание нейтрофильного желатиназо-ассоциированного липокалина в самом начале заболевания, и при выявлении повышение уровня более 300 нг/мл диагностируют стероидезистентный нефротический синдром у детей и подростков. Предлагаемый способ конкурентноспособен, так как способствует ранней диагностике и обоснованию применения эффективных методов лечения нефротического синдрома у детей, что позволяет замедлять его прогрессирование до терминальной почечной недостаточности, повысить качество жизни и снизить экономические затраты на лечение у данной категории пациентов. Способ позволит обосновать раннее назначение циклоспорина А и раннему достижению ремиссии нефротического синдрома, избежать побочных явлений терапии высокими дозами преднизолона, а также осложнений некупирующегося нефротического синдрома.(72) Канатбаева Асия Бакишевна Наушабаева Асия Еркиновна Кабулбаев Кайрат Абдуллаевич Чингаева Гульнара Нуртасовна Диканбаева Сауле Алькеевна Досым Сауле Мухамеджаровна Усманов Анвар Равшанович Кокшеева Наркес Бердигалиевна(73) Республиканское государственное предприятие на праве хозяйственного ведения Казахский национальный медицинский университет им. С.Д. Асфендиярова Министерства здравоохранения Республики Казахстан(54) СПОСОБ РАННЕЙ ДИГНОСТИКИ СТЕРЕОИДРЕЗИСТЕНТНОГО НЕФРОТИЧЕСКОГО СИНДРОМА У ДЕТЕЙ И ПОДРОСТКОВ Изобретение относится к медицине, а именно к детской нефрологии, и предназначено для ранней диагностики резистентности нефротического синдрома к гормональной терапии у детей. Диагностика резистентности нефротического синдрома необходима по многим причинам для обоснования проведения биопсии почки и морфологических исследований биоптата для установки морфологического диагноза, а также для определения тактики лечения в долгосрочном аспекте. В настоящее время известен способ диагностики стероидрезистентности нефротического синдрома у детей и подростков, включающий предварительное проведение 6-недельного лечения большими дозами(2 мг/кг/сут) преднизолона, а также 3-6 пульсовых введений метилпреднизолона внутривенно и при выявлении эффективности лечения данной патологии диагностируют стероидрезистентности нефротического синдрома у детей и подростков. Сама терапия преднизолоном зачастую (до 80) эффективна у детей с нефротическим синдромом,однако сопряжена с побочными явлениями со стороны желудочно-кишечного тракта, центральной нервной системы, сердечно-сосудистой системы. При установлении стероидрезистентности, согласно протоколу диагностики и лечения, проводят биопсию почки с морфологическим исследованием,и так как в большинстве случаев стероидрезистентного нефротического синдрома у детей морфологическая картина представлена фокально-сегментарным гломерулосклерозом, то назначают лечение циклоспорином А в дозе 150 мг/м 2/сут (2007 22(8)2183-93). Известен способ диагностики стероидрезистентности нефротического синдрома у детей и подростков, включающий предположение о том, что выявление в моче содержания нейтрофильного желатиназо-ассоциированного липокалина может служить показателем стероидрезистентности нефротического синдрома применением аппарата 2000 (..(2012) 27807812). Недостатком известного способа является то, что исследование проведено на небольшой группе детей(30),поэтому результаты сложно интерпретировать с большой степенью надежности. Кроме того, в данном исследовании метод определения нейтрофильного желатиназоассоциированного липокалина не является рекомендованным для определения данного маркера, Кроме того, авторами полученные показатели делились на уровень креатинина в той же порции мочи, в которой определяют устаревшим колориметрическим методом. Это дает основания сомневаться в точности полученных авторами результатов и выводов. Задачей изобретения является разработка способа ранней диагностики стероидрезистентного нефротического синдрома у детей и подростков,2 который позволяет провести диагностику (ранее никакими методами определить было невозможно) с целью снижения побочных явлений терапии преднизолоном, а также раннего начала адекватного лечения циклоспорином А. Способ ранней диагностики стероидезистентного нефротического синдрома включает исследование мочи иммунохимическим методом на содержание нейтрофильного желатиназо-ассоциированного липокалина в самом начале заболевания, и при выявлении повышение уровня более 300 нг/мл диагностируют стероидезистентный нефротический синдром у детей и подростков. Способ осуществляют следующим образом. Способ предназначен для диагностического исследования пациентов в возрасте от 0 до 18 лет, у которых установлен диагноз нефротического синдрома. В самом начале заболевания осуществляют забор 10 мл свежевыпущенной мочи в стеклянную центрифужную пробирку. Пробирку с мочой центрифугируют при 5000 об./мин в течение 5 минут. 2 мл надосадочной мочи сливают в пробирку Эппендорф объемом 2,5 мл без наполнителей и добавок. Мочу замораживают при-80 С, при которой ее можно хранить в течение длительного времени. Перед заморозкой мочу можно хранить не более 24 часов при комнатной температуре, иначе нейтрофильный желатиназоассоциированный липокалин деградирует. Нейтрофильный желатиназо-ассоциированный липокалин определяют иммунохимическим методом на анализаторе 2000 (, США). Использование иммунохимического метода является наиболее точным, в отличие от метода анализа с применением аппарата 2000. При уровне нейтрофильного желатиназоассоциированного липокалина от 0 до 300 нг/мл с вероятностью 92 устанавливают стероидчувствительность нефротического синдрома и назначают лечение преднизолоном по стандартной схеме. При повышении уровня нейтрофильного желатиназо-ассоциированного липокалина более 300 нг/мл диагностируют стероидрезистентный нефротический синдром и назначают терапию циклоспорином А. Примеры выполнения способа. Пациент 1., 4 г, диагноз Нефротический синдром, дебют. Выраженные отеки до анасарки,выраженная протеинурия 11 г/сут, гипопротеинемия 35 г/л,гипоальбуминемия 15 г/л и гиперхолестеринемия 12,7 ммоль/л. На высоте активности уровень нейтрофильного желатиназоассоциированного липокалина составляет 7,2 нг/мл. Это статистически достоверно не отличается от уровня данного биомаркера в моче у здоровых детей той же возрастной группы (6,33,2 нг/мл). Пациент 2., 5 лет, диагноз Нефротический синдром,дебют. Клиническая картина и лабораторные изменения крови и мочи аналогичные. Однако уровень нейтрофильного желатиназо-ассоциированного липокалина составляет 338,7 нг/мл, что достоверно выше, чем у здоровых детей (р 0,01). Обоим пациентам назначается стандартный курс диуретической терапии, малобелковая и бессолевая диета, преднизолон в дозе 60 мг/м 2/сут в течение 6 недель. У пациента 1 в течение первых 7 суток терапии преднизолоном протеинурия снизилась до 2 г/с, а на 10 сутки исчезла. При этом через 6 недель уровень нейтрофильного желатиназо-ассоциированного липокалина продолжал оставаться низким(1,7 нг/мл). Все клинические и лабораторные признаки нефротического синдрома так же купировались. Это свидетельствовало о стероидчувствительном нефротическом синдроме, который характеризуется благоприятным прогнозом, почему проведение биопсии почки не требуется, так как у 95 таких пациентов отмечаются минимальные изменения в клубочках почек. У пациента 2 протеинурия снизилась до 3,4 г/сут и далее не снижалась, отечный синдром уменьшился, персистировали все клинические и лабораторные признаки нефротического синдрома вплоть до конца 6-8 недель лечения преднизолоном в терапевтической дозе. Через 6 недель уровень нейтрофильного желатиназо-ассоциированного липокалина оставался повышенным (301,5 нг/мл). Это признак стероид-резистентного нефротического синдрома, для лечения которого требуется проведение биопсии почки, так как в большинстве таких случаев у ребенка имеет место фокальносегментарный гломерулосклероз, Кроме того,пациенту были назначены селективные иммуносупрессоры (ЦсА, ММФ) для достижения полной ремиссии нефротического синдрома,которая является конечной целью лечения. Очевидно,что уровень нейтрофильного желатиназо-ассоциированного липокалина в самом начале нефротического синдрома являлся предиктором отсутствия ответа на терапию преднизолоном. До настоящего момента стероидрезистентность и неблагоприятные варианты нефротического синдрома у детей диагностировали только через 6 недель лечения преднизолоном. Применение данного способа позволяет определить неблагоприятный вариант уже в самом начале заболевания на основании повышенного уровня нейтрофильного желатиназо-ассоциированного липокалина в моче, своевременно провести биопсию почки и назначить целенаправленное лечение в зависимости от морфологических изменений в почках. Предлагаемый способ конкурентноспособен, так как способствовует ранней диагностике и обоснованию применения эффективных методов лечения нефротического синдрома у детей, что позволяет замедлять его прогрессирование до терминальной почечной недостаточности, повысить качество жизни и снизить экономические затраты на лечение у данной категории пациентов. Способ позволит обосновать раннее назначение циклоспорина А и раннему достижению ремиссии нефротического синдрома, избежать побочных явлений терапии высокими дозами преднизолона, а также осложнений некупирующегося нефротического синдрома. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ ранней диагностики стероидрезистентного нефротического синдрома у детей и подростков, включающий комплексное обследование пациента и исследование уровня нейтрофильного желатиназа-ассоциированного липокалина в моче и крови,отличающийся тем, что определение уровняв моче осуществляют иммунохимическим методом до начала терапии, и, при значении уровняболее 300 нг/мл диагностируют стероидрезистентный нефротический синдром.