Способ выявления предрасположенности к нефрогенной артериальной гипертензии у девушек-подростков казахской этнической принадлежности

(51) 12 1/68 (2009.01) 01 33/48 (2009.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН(АГ) у девушек в возрасте от 18 до 21 года казахской этнической принадлежности. Техническим результатом изобретения является повышение точности и достоверности способа. Это достигается тем, что в заявляемом способе выявления предрасположенности к нефрогенной артериальной гипертензии у казахской этнической принадлежности включающем анализ венозной крови, выделение ДНК, проведение ее молекулярно- генетического анализа, методом полимеразно цепной реакции определение полиморфизма гена,согласно изобретению, предрасположенность к нефрогенной артериальной гипертензии выявляют у девушек - подростков путем определения полиморфизма генов цитокинов и при наличии генотипа 511 ТТ гена- 1, и/или генотипагена- 6, и/или генотипагена прогнозируют развитие нефрогенной артериальной гипертензии.(72) Альмухамбетова Рауза Кадыровна Даулетбакова Марьям Ильясовна Жангелова Шолпан Болатовна Мендеш Мурат шрбеклы Хансеитова Александра Кабуловна(56) Инновационный патент РК 20554, кл. 12 1/68, 01 33/48, 2008(54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТИ К НЕФРОГЕННОЙ АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТЕНЗИИ У ДЕВУШЕК-ПОДРОСТКОВ КАЗАХСКОЙ ЭТНИЧЕСКОЙ ПРИНАДЛЕЖНОСТИ, обусловленной генетическими факторами предрасположенности к артериальной гипертензии 23011 Изобретение относится к медицине, в частности к кардиологии и касается диагностики,обусловленной генетическими факторами предрасположенности к артериальной гипертензии(АГ) у девушек в возрасте от 18 до 21 года казахской этнической принадлежности. Известен способ прогнозирования развития артериальной гипертензии у лиц казахской национальности, включающий анализ венозной крови пациента казахской национальности,проведение молекулярно-генетического анализа,определение полиморфизма 198 гена 1 и при наличии аллелягена 1 диагностируют предрасположенность к заболеванию артериальной гипертензией.(Инновационный патент РК 20555, кл. 12 1/68, 01 33/48, опубл. 15.12.2008, Бюл.12) Недостатком данного способа является то, что по нему невозможно определить нефрогенную АГ, т.к. полиморфизм 198 гена 1 не влияет на развитие и исход инфекционных заболеваний и иммунопатологических процессов. Известен также способ определения предрасположенности к артериальной гипертензии у казахов, включающий анализ венозной крови пациентов казахской национальности, выделение ДНК, проведение ее молекулярно - генетического анализа, методом полимеразно - цепной реакции определение полиморфизма 4 (-675)5 гена ИАПГ-1 и при наличии аллеля 5 гена ИАПГ-1 диагностируют предрасположенность к заболеванию артериальной гипертонией.(Инновационный патент РК 20554, кл. 12 1/68, 01 33/48, опубл. 15.12.2008, Бюл.12) Недостатком данного способа также является невозможность определения нефрогенной АГ, т.к. полиморфизм 4 (-675)5 гена ИАПГ-1 не участвует в иммунном ответе,как предрасполагающем к хронизации процесса в почках. Задачей изобретения является создание эффективного способа выявления предрасположенности к нефрогенной артериальной гипертензии у девушек - подростков казахской этнической принадлежности, позволяющего не только определить индивидуальный риск развития заболевания, но и в целом оценить популяционный риск и долю лиц в этой популяции с неблагоприятным генотипом, что дает возможность сформировать группы риска для дальнейшего наблюдения и проведения ренопротективной терапии. Техническим результатом изобретения является повышение точности и достоверности способа. Это достигается тем, что в заявляемом способе выявления предрасположенности к нефрогенной артериальной гипертензии у казахской этнической принадлежности включающем анализ венозной крови, выделение ДНК, проведение ее молекулярно- генетического анализа, методом полимеразно цепной реакции определение полиморфизма гена,согласно изобретению, предрасположенность к нефрогенной артериальной гипертензии выявляют у 2 девушек - подростков путем определения полиморфизма генов цитокинов и при наличии генотипа 511 ТТ гена- 1, и/или генотипагена- 6, и/или генотипагена прогнозируют развитие нефрогенной артериальной гипертензии. Цитокины представляют собой ключевые белки,опосредующие взаимодействие как между клетками иммунной системы, так и между клетками иммунной и неиммунной системы. Гены цитокинов полиморфны, и определенные мутации в пределах кодирующей или регуляторной части гена ассоциированы с высокой или низкой продукцией соответствующих белков. Считается, что до 50 индивидуальных отличий в продукции цитокинов обусловлено полиморфизмом их генов. Генотипы и аллели провоспалительных цитокинов участвуют в иммунном ответе. Мутации в генах цитокинов приводят к серьезным нарушениям иммунитета. У человека подобные мутации встречаются достаточно редко, что может свидетельствовать о важнейшей роли цитокинов в осуществлении защитных реакций. Функциональный полиморфизм генов цитокинов обусловливает индивидуальные наследственные колебания уровня их продукции,которые влияют на развитие и исход инфекционных заболеваний и иммунопатологических процессов. Способ осуществляется следующим образом. У девушки - казашки в возрасте от 18 до 21 года берут 5 мл венозной крови, выделяют ДНК,проводят ее молекулярно - генетический анализ,определяют полиморфизм генов цитокинов- 1, - 6 и -. Полиморфизм генов цитокинов изучают методом полимеразной-цепной реакции(ПЦР) с использованием олигонуклеотидных праймеров. Частотное распределение аллелей и генотипов генов цитокинов оценивают с помощью критерия 2. Фрагменты ДНК амплифицируют на автоматическом термоциклере - (США) при помощи термостабильной -полимеразы. Затем проводят рестрикцию и определяют распределение генотипов и аллелей генов цитокинов. На основании полученных данных генотип 511 ТТ гена- 1, и/или генотипгена- 6, и/или генотипгена - рассматривают как молекулярно-генетический маркер предрасположенности к развитию артериальной гипертензии у девушек -казашек в возрасте от 18 до 21 года. Пример 1. Больная А., 18 лет, студентка 2 курса, проживает в общежитии, страдает 4 года хроническим пиелонефритом. Из анамнеза мать больной страдает МКБ, больная отмечает частые простудные заболевания (2-3 раза в год), последний год стала замечать частые головные боли, повышенную утомляемость, чувство дискомфорта в поясничной области,желание укутать поясницу,раздражительность,снижение аппетита. Дизурических явлений не отмечает. При обследовании выявлено рост 167 см, вес 57 кг,температура тела нормальная. При осмотре кожные покровы бледноваты. Почки не 23011 пальпируются. Симптом Пастернацкого отрицательный с обеих сторон. Сердце, легкие,органы ЖКТ без особенностей. АД 125/90 мм рт.ст. ,пульс 84 уд.в мин. В общем анализе крови - эр. 4,5 х 10, Нб - 120 г/л, цпк 0,9. Лейкоциты - 6,210, э- 2,п-4, с - 68, лимф. - 18, м - 8. СОЭ - 12 мм/час. В общем анализе мочи цвет - соломенно-желтый,прозрачная, реакция кислая, плотность 1010, сахар- отсутствует, белок - 0,8 г/л. При микроскопии плоский эпителий - един, в п/зр. лейкоциты - 3-5-8 в п/зр. слизь - , Бак. посев мочи высеяна Креатинин крови - 0,07 ммоль/л, мочевина - 4,8 ммоль/л. СКФ -100 мл/мин. УЗИ - отмечается неровность контуров обеих почек, неоднородность эхогенности участков паренхимы, деформация чашечно-лоханочной системы. Цитокины в сыворотке крови -1-65 пг/мл, -6 -2,0 пг/мл,2,6 пг/мл. Гены интерлейкина 1 -генотип СС - 0,21, генотип СТ -0,32 генотип ТТ - 0,47,аллель С - 0,62, аллель Т - 0,38 гены интерлейкина 6 генотип - 0,45, генотип СС - 0,06, генотип 0,49 аллель С - 0,27, аллель-0,73 геныгенотип-0,27, генотип-0,77, генотип АА- 0 аллель -0,88, аллель А - 0,12. На основании полученных результатов можно делать вывод, что у данной больной есть риск развития артериальной гипертензии. Пример 2. Больная Р. 18 л., студентка 2 курса, живет в общежитии, в течение 5 лет страдает хроническим пиелонефритом. Из анамнеза у матери было 2 выкидыша, во время беременности диагностировали пиелонефрит беременных с повышением АД,которое периодически повышалось и в последующем по этому поводу состоит на диспансерном учете. Повышение АД у больной последние 2 года, состоит на диспансерном учете. Жалуется на периодические головные боли,слабость, чувство зябкости, похолодания в поясничной области, нарушение аппетита, сна. Температуру тела не измеряет. При обследовании рост - 162 см, вес - 60 кг, параорбитальная бледность. Лимфоузлы не увеличены. Границы сердца не изменены. Тоны звучные, ритм не нарушен. АД 140/95 мм рт.ст. Пульс 90 в мин. Со стороны легких, органов ЖКТ патологии не выявлено. Почки не определяются. Симптом Пастернацкого слабо положителен справа. В общем анализе крови - эр. 3,5 х 10 , Нб - 100 г/л, цпк 0,85. Лейкоциты - 4,210, э- 4,п- 3, с -72, лимф. 13, м - 8. СОЭ - 16 мм/час. В общем анализе мочи цвет - соломенно-желтый, прозрачная,реакция кислая, плотность 1006, сахар отсутствует, белок - 1,2 г/л. При микроскопии плоский эпителий - един, в п/зр. лейкоциты - 3-5-8 в п/зр. слизь - . Бак. посев мочи высеяна Креатинин крови - 1,3 ммоль/л, мочевина - 7,5 ммоль/л. СКФ - 68 мл/мин. УЗИ - отмечается неровность контуров обеих почек, неоднородность эхогенности участков паренхимы, деформация чашечно-лоханочной системы. Цитокины в сыворотке крови -1 - 110 пг/, -6 -7,4 пг/мл, Т-2,8 пг/мл. Гены интерлейкина 1 - генотип СС 0,14, генотип СТ - 0,34, генотип ТТ - 0,52 аллель С 0,68, аллель Т - 0,32 гены интерлейкина 6 -генотип СС - 0,12, генотипв С - 0,60, генотип - 0,28 аллель С -0,20, аллель- 0,80 гены генотип 0,24, генотип- 0,72, генотип АА -0,04 аллель-0,78, аллель А - 0,22. На основании полученных результатов можно делать вывод, что у данной больной есть риск развития артериальной гипертензии. Таким образом, заявляемый способ позволяет определить индивидуальный риск развития артериальной гипертензии, оценить популяционный риск и долю лиц в этой популяции с неблагоприятным генотипом и дает возможность сформировать группы риска для дальнейшего наблюдения и проведения ренопротективной терапии. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ выявления предрасположенности к нефрогенной артериальной гипертензии у казахской этнической принадлежности, включающий анализ венозной крови, выделение ДНК, проведение ее молекулярно-генетического анализа,методом полимеразно-цепной реакции определение полиморфизма гена, отличающийся тем, что предрасположенность к нефрогенной артериальной гипертензии выявляют у девушек - подростков путем определения полиморфизма генов цитокинов и при наличии генотипа 511 ТТ гена- 1, и/или генотипагена- 6,и/или генотипагена- прогнозируют развитие нефрогенной артериальной гипертензии.