Способ определения предрасположенности к артериальной гипертонии у казахов

(51) 12 1/68 (2006.01) 01 33/48 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ Задачей изобретения является создание более эффективного способа определения предрасположенности к артериальной гипертонии у казахов, устанавливающего прямую связь между функциональной молекулярной модификацией гена ИАПГ - 1 и гипертонией, повышающего точность определения. Это достигается тем, что в способе определения предрасположенности к артериальной гипертонии,включающем анализ венозной крови, выделение ДНК, проведение ее молекулярно - генетического анализа, методом полимеразной цепной реакции определение полиморфизма гена, согласно изобретению, используют кровь лиц казахской национальности, определяют полиморфизм 4 (-675)5 гена ИАПГ-1 и при наличии аллеля 5 гена ИАПГ-1 диагностируют предрасположенность к заболеванию артериальной гипертонией.(72) Джусипов Алихан Казахпаевич Байтасова Назия Багадурбековна Джолдасбекова Алия Утепбаевна(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТИ К АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТОНИИ У КАЗАХОВ(57) Изобретение относится к области медицины, а именно к кардиологии, и касается способа диагностики, обусловленной генетическими факторами предрасположенности к артериальной гипертонии у казахов. 20554 Изобретение относится к области медицины, а именно к кардиологии, и касается способа диагностики, обусловленной генетическими факторами предрасположенности к артериальной гипертонии у казахов. Артериальная гипертония (АГ) - один из наиболее значимых факторов риска развития инфаркта миокарда и ОНМК. На протяжении многих лет основное место в изучении артериальной гипертензии отводилось исследованию гемодинамики. За последние годы ситуация изменилась появились эпидемиологические и экспериментальные данные, констатирующие наличие протромботических изменений в системе гемостаза при гипертонической болезни. В процессе гемостаза немалую роль играет и полиморфизм генов, кодирующих факторы этой системы. Эти гены можно рассматривать в качестве кандидатов для изучения наследственной предрасположенности к АГ. В настоящее время описаны и активно изучаются целый ряд генов-кандидатов факторов системы гемостаза, связанных с АГ. Среди них ингибитор активатора плазминогена первого типа (ИАПГ -1). Известен способ определения предрасположенности к артериальной гипертонии путем установления связи полиморфного маркера Т 174 М гена ангиотензиногена с данным заболеванием. При этом выявлено, что генотип ТМ является фактором риска развития гипертонии.(Насибуллин Т.Р.,Мустафина О.Е.,Хуснутдинова Э.К. Связь полиморфного маркера Т 174 М гена ангиотензиногена с эссенциальной гипертензией у русских и татар Башкортостана // Молекулярная биология. - 2002. -36,4. - с. 599 604). Недостатком данного способа является то, генне является предиктором поражения сосудистой стенки,что снижает его информативность в определении предрасположенности к артериальной гипертонии. Известен также способ определения предрасположенности к артериальной гипертонии путем исследования венозной крови, выделения ДНК, проведения молекулярно - генетического анализа и обнаружения конкретных последовательностей гена , обуславливающих предрасположенность к гипертонии.(Патент РФ 2287160, кл. 01 33/48, опубл. 10.11.2006, Б.31) Недостатком данного способа является то, что процесс дефосфорилирования, влияющий на генсвязан с липидным холестериновым обменом и не является предиктором поражения стенок сосудов, поэтому данный ген не может являться эффективным генетическим маркером артериальной гипертонии. Задачей изобретения является создание более эффективного способа определения предрасположенности к артериальной гипертонии у казахов, устанавливающего прямую связь между функциональной молекулярной модификацией гена ИАПГ - 1 и гипертонией, повышающего точность определения. 2 Техническим результатом является повышение точности и эффективности способа. Это достигается тем, что в способе определения предрасположенности к артериальной гипертонии,включающем анализ венозной крови, выделение ДНК, проведение ее молекулярно - генетического анализа, методом полимеразной цепной реакции определение полиморфизма гена,согласно изобретению, используют кровь лиц казахской национальности, определяют полиморфизм 4(675)5 гена ИАПГ-1 и при наличии аллеля 5 гена ИАПГ-1 диагностируют предрасположенность к заболеванию артериальной гипертонией. Способ осуществляется следующим образом. У пациента берут 5 мл венозной крови,выделяют ДНК, проводят ее молекулярно генетический анализ, определяют полиморфизм 4(-675)5 гена ИАПГ-1. Полиморфизм гена ИАПГ-1 изучают методом полимеразной цепной реакции(ПЦР) с использованием олигонуклеотидных праймеров. Частотное распределение аллелей и генотипов гена ИАПГ-1 оценивают с помощью критерия 2. Фрагменты ДНК амплифицируют на автоматическом термоциклере(США) при помощи термостабильной полимеразы. Затем проводят рестрикцию и определяют распределение генотипов и аллелей гена ИАПГ-1. На основании полученных данных аллель 5 гена ИАПГ-1 рассматривают как молекулярно-генетический маркер предрасположенности к развитию артериальной гипертонии. Пример 1. Больной Б., 45 лет, казах, поступил с жалобами на головную боль в затылочной области,снижение остроты зрения, общую слабость, снижение работоспособности, головокружение, на повышение АД до 180/100 мм.рт.ст. На ЭКГ выраженная гипертрофия левого желудочка. У больного взяли 5 мл венозной крови и выделили ДНК. Методом полимеразной цепной реакции с использованием олигонуклеотидных праймеров определили полиморфизм гена ИАПГ-1. У больного выявлен генотип 55 гена ИАПГ-1,что дает возможность диагностировать артериальную гипертонию. Пример 2. Больной Ж., казах, 42 года. Поступил с жалобами на головные боли, в области сердца сжимающего характера, головокружение, общую слабость, повышение АД до 170/90 мм.рт.ст. У больного взяли 5 мл венозной крови, выделили ДНК и определили полиморфизм гена ИАПГ-1. При молекулярно - генетическом анализе определили генотип 45 гена ИАПГ-1, что также дает возможность диагностировать артериальную гипертонию. Необходимость в этом исследовании возникла потому, что выяснение ассоциаций различных генотипов изученного гена ИАПГ-1 с развитием артериальной гипертонии позволит получить сведения о группах больных, имеющих различия в патогенетических механизмах развития этого заболевания. 20554 Пример 3. Пациент Е., казах, 44 лет. Жалоб не предъявляет. У пациента Е., взяли 5 мл венозной крови,выделили ДНК и определили полиморфизм гена ИАПГ-1. При молекулярно - генетическом анализе определили генотип 44 гена ИАПГ-1, что не подтверждает генетическую предрасположенность к артериальной гипертонии. Пример 4. Пациент М., казах, 39 лет. Жалоб не предъявляет. У пациента М., взяли 5 мл венозной крови,выделили ДНК и определили полиморфизм гена ИАПГ-1. При молекулярно - генетическом анализе определили генотип 55 гена ИАПГ-1, что подтверждает генетическую предрасположенность к артериальной гипертонии. Больному рекомендовано проводить регулярные профилактические осмотры. Были обследовано 120 мужчины, казахской национальности, поступивших в кардиологическое отделение ННМЦ г.Астаны с диагнозом артериальная гипертония 2-3 степени, риск 2-3, без сопутствующих заболеваний. Средний возраст больных составил 45,00,7 лет. В контрольную группу были включены 80 практически здоровых лиц без клинических проявлений сердечно-сосудистых заболеваний, без отягощенной наследственности по вышеуказанному заболеванию, с нормальными показателям ЭхоКГ,ЭКГ и нагрузочных проб, средний возраст которых составил 42,50,9. Анализ полиморфизма 4(-675)5 гена ИАПГ-1 среди больных АГ и практически здоровых лиц казахской национальности (таблица) показал, что наиболее часто встречается генотип 45,частота встречаемости 45 имеет промежуточное положение. Частота генотипа 55 была наименьшей у больных АГ и в 1 случае встречался у практически здоровых лиц. Таблица. Частота полиморфизма 4(-675)5 гена ИАПГ-1 у больных АГ и практически здоровых лиц казахской национальности. Генотипы, аллели Казахи Больные АГ 120 частота,Аналогичное распределение частоты встречаемости наблюдалось и среди аллелей аллель 4 наиболее часто встречаемая, аллель 5-реже. При сравнении частоты встречаемости различных генотипов (44, 45, 55) и аллелей (4, 5) гена ИАПГ-1 между больными АГ и практически здоровыми лицами обнаружены достоверные различия (5,940,057,8 р 0,05, соответственно). Таким образом, наличие аллеля 5 гена ИАПГ-1 ассоциировано с предрасположенностью к артериальной гипертонии у лиц казахской национальности и проведение подобного анализа будет способствовать более полной информации о риске возникновения болезни. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ определения предрасположенности к артериальной гипертонии, включающий анализ венозной крови, выделение ДНК, проведение ее молекулярно-генетического анализа, определение полиморфизма генов методом полимеразной цепной реакции, отличающийся тем, что используют кровь лиц казахской национальности,определяют полиморфизм 4(-675)5 гена ИАПГ-1 и, при наличии аллеля 5 гена ИАПГ-1, диагностируют предрасположенность к заболеванию артериальной гипертонией