Способ обнаружения ГИНК в моче, для контролируемой терапии амбулаторных больных туберкулезом

(51) 61 31/4409 (2006.01), 09 23/16 (2006.01), 01 33/50 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ Задача изобретения повышение чувствительности,доступности(возможность проведения анализа в сельской местности) и упрощение способа,повышение производительности труда лаборанта - биохимика(проведение капельным путем). Сущность предлагаемого способа заключается в том, что пиридиновый цикл, лежащий в основе молекулы ГИНК под действием хлорродана(получаемого из аммония роданида и хлорсодержащего препарата) расщепляется с образованием производного глутаконового альдегида,последний при конденсации с толилметилпиразолоном образует полиметиновый краситель. Предлагаемый способ осуществляется следующим образом к 0,5 мл мочи больного (после 12-24 часов приема препарата) прибавляют 3-5 капель 0,1 М кислоты хлороводородной, 1 каплю раствора аммония роданида 5, 8 капель раствора хлорсодержащего препарата (можно хлорамина Б),затем прибавляют 1 каплю 0,1 М раствора натрия гидроксида и 3-5 капель раствора толилметилпиразолона 1, сразу появляется розово- фиолетовое окрашивание свидетельствующее о наличии терапевтической концентрации препарата в организме больного. Предлагаемый способ обнаружения ГИНК в моче больных туберкулезом доступен, прост в исполнении, для его осуществления не требуется сложных и дорогостоящих приборов и реактивов, он может быть широко применен в сельской местности,что позволит контролировать ежедневный прием препарата на поддерживающем этапе ДОТС терапии и уменьшит частоту ранних рецидивов и неблагоприятные исходы болезни.(56) Бейсенбеков А.С., Алиев Применение реакции образования полиметиновых красителей в фармацевтическом анализе. -Алма-Ата, 1986, с. 49(54) СПОСОБ ОБНАРУЖЕНИЯ ГИНК В МОЧЕ, ДЛЯ КОНТРОЛИРУЕМОЙ ТЕРАПИИ АМБУЛАТОРНЫХ БОЛЬНЫХ ТУБЕРКУЛЕЗОМ(57) Изобретение относится к способам обнаружения ГИНК (гидразида изоникотиновой кислоты), в моче больных туберкулезом, с целью контроля систематичности приема препарата, на поддерживающем этапе ДОТС терапии амбулаторных больных. Известен способ обнаружения ГИНК по фармакологически активной части молекулы(пиридиновому циклу) с 2,4 динитрохлорбензолом при этом появляется красно-бурое окрашивание усиливающееся или изменяющееся при стоянии. Реакция протекает в спиртовой среде, 2.4 динитрохлорбензол для анализа берется в виде точной навески, при проведении реакции необходимо строгое соблюдение некоторых условий выпаривание на водяной бане,дополнительное охлаждение, 2-х часовая выдержка при комнатной температуре, к тому же сам реагент является альгицидным средством. Указанные недостатки ограничивают широкое применение данного способа в практике. - аналог /1 / Учитывая названные выше недостатки,предлагается способ обнаружения ГИНК в моче с использованием доступных, нетоксичных и простых в приготовлении реактивов. Для повышения чувствительности определения способ осуществляется капельным путем. 22733 Изобретение относится к способам обнаружения ГИНК (гидразида изоникотиновой кислоты), в моче больных туберкулезом, с целью контроля систематичности приема препарата,на поддерживающем этапе ДОТС терапии амбулаторных больных. Тенденция роста заболеваемости туберкулезом, отмечаемая во всех странах мира, делает актуальной проблему повышения эффективности его лечения. В практической медицине сегодня используют,главным образом, химиотерапию в соответствии с последними рекомендациями ВОЗ, при которой больным с впервые выявленным туберкулезом на первом этапе лечения (2-3 мес.) назначается до 4 препаратов, среди которых основным является ГИНК. На последующем этапе (продолжительность лечения 6-9 мес.) больные получают ГИНК амбулаторно. Исключительная роль ГИНК в эффективности лечения туберкулеза объясняется его мощной проникающей способностью в мембрану клеток и действием на бактерии,находящиеся внутриклеточно. Адсорбируясь на микробной клетке, он участвует в обмене веществ микробактерий, блокируя, тем самым образование ферментных систем. Терапевтическая концентрация препарата в крови и моче зависит от характера его метаболизма, который определяется главным образом индивидуальными особенностями организма. Поэтому научная группа ВОЗ требует систематического контроля биодоступности препарата определяемой на основании данных о его концентрации в крови и моче. Разработанная ВОЗ программа ДОТС терапии больных туберкулезом проводится в более короткий, чем это было принято раньше курс химиотерапии. Лечение обязательно контролируется и делится на 2 этапа начальный интенсивный курс и более продолжительный поддерживающий, который в отличие от первого проводится преимущественно в амбулаторных условиях. Данная программа отличается высокой эффективностью, но вместе с тем, отмечается, что более 70 больных, начавших лечение не закончив его, выбывают из под наблюдения. Среди данного контингента больных встречаются преимущественно социально-дезориентированные люди и жители сельской местности. Учитывая,изложенное, а также высокий риск неблагоприятных исходов и рецидивов заболевания,поддерживающий курс данному контингенту больных целесообразно проводить в условиях специального санатория или пунктах контролируемой терапии в сельской местности. Проведение контролируемой терапии для данной категории больных по существу представляет собой единственный выход в сложившейся ситуации. Контроль систематичности приема ГИНК может осуществляться обнаружением его в моче. Известен способ обнаружения ГИНК по фармакологически активной части молекулы(пиридиновому циклу) с 2,4 динитрохлорбензолом при этом появляется красно-бурое окрашивание усиливающееся или изменяющееся при стоянии. Реакция протекает в спиртовой среде, 2.4 2 динитрохлорбензол для анализа берется в виде точной навески, при проведении реакции необходимо строгое соблюдение некоторых условий выпаривание на водяной бане,дополнительное охлаждение, 2-х часовая выдержка при комнатной температуре, к тому же сам реагент является альгицидным средством. Указанные недостатки ограничивают широкое применение данного способа в практике. - аналог / 1 /. 1. Государственная фармакопея СССРиздания, с. 378, Издательство Медицина, Москва,1968 г. Недостатками способа являются длительность,трудоемкость и токсичность реагента. Наиболее близким к изобретению является ускоренный метод определения ГИНК в моче с использованием бумаг пропитанных растворами аммония роданида и хлорамина Б 5 и барбитуровой кислотой 5 - прототип /2/. 2. Бейсенбеков А.С., Алиев Применение реакции образования полиметиновых красителей в фармацевтическом анализе. Алма-Ата, 1986, с.49 Способ осуществляют следующим образом к 2-3 мл мочи в пробирке (берут после 12-24 часов приема препарата) прибавляют кислоты хлороводородной до рН 2,0 и помещают бумагу пропитанную аммония роданидом и хлорамином Б,взбалтывают до тех пор, пока вся бумага не пропитается раствором. После этого через 1-2 мин появляется розовое окрашивание, переходящее со временем в синее. Недостатками способа являются трудоемкость(необходимость приготовления бумаг пропитанных хлорамином Б и аммония роданидом и барбитуровой кислотой), длительность определения(необходимо точно установить рН 2.) кислотой хлороводородной низкая чувствительность,обусловленная нестабильностью приготовленных реактивных бумаг, к тому же при приготовлении используется раствор хлорамина Б, который нестоек и его необходимо использовать только свежеприготовленным. Учитывая указанные выше недостатки,предлагается способ обнаружения ГИНК в моче с использованием доступных и простых в приготовлении реактивов. Задача изобретения повышение чувствительности,доступности(возможность проведения анализа в сельской местности) и упрощение способа,повышение производительности труда лаборанта - биохимика(проведение капельным путем). Сущность предлагаемого способа заключается в том, что пиридиновый цикл, лежащий в основе молекулы ГИНК под действием хлорродана(получаемого из аммония роданида и хлорсодержащего препарата) расщепляется с образованием производного глутаконового альдегида,последний при конденсации с толилметилпиразолоном образует полиметиновый краситель. Предлагаемый способ осуществляется следующим образом к 0,5 мл мочи больного (после 22733 12-24 часов приема препарата) прибавляют 3-5 капель 0,1 М кислоты хлороводородной, 1 каплю раствора аммония роданида 5, 8 капель раствора хлорсодержащего препарата ( можно хлорамина Б),затем прибавляют 1 каплю 0,1 М раствора натрия гидроксида и 3-5 капель раствора толилметилпиразолона 1, сразу появляется розово- фиолетовое окрашивание свидетельствующее о наличии терапевтической концентрации препарата в организме больного. Предлагаемый способ обнаружения ГИНК в моче больных туберкулезом доступен, прост в исполнении, для его осуществления не требуется сложных и дорогостоящих приборов и реактивов, он может быть широко применен в сельской местности,что позволит контролировать ежедневный прием препарата на поддерживающем этапе ДОТС терапии и уменьшит частоту ранних рецидивов и неблагоприятные исходы болезни. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ обнаружения ГИНК в моче, для контроля систематичности приема препарата на поддерживающем этапе ДОТС терапии амбулаторных больных туберкулезом, на основе реакции образования полиметинового красителя,отличающийся тем,что для получения окрашивания используют цветореагент - 1 раствор толилметилпирозолона и способ осуществляют капельным путем.