Штамм бактерий streptococcus equi b-0064 казниви бж-111, используемый для изготовления диагностических препаратов

(2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН(57) Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии и представляет собой штамм мытного стрептококка серологической группы С,используемый для изготовления диагностических препаратов. Технический результат,обеспечиваемый изобретением,выражается в изыскании высокоэффективных диагностических препаратов. Штамм бактерийВ-0064 КазНИВИ БЖ-111, используемый для изготовления диагностических препаратов. Указанный штамм бактерий депонирован в Лаборатории по изучению генофонда микроорганизмов ТОО Казахский научноисследовательский ветеринарный институт(72) Ибрагимов Даулет Умирзакович Каратаев Болат Шайзадаевич Шманов Габдолла Сагинтаевич Жусупов Галымжан Каирбекович Турсункулов Спандияр Ахайдарович(73) Товарищество с ограниченной ответственностью Казахский научно-исследовательский ветеринарный институт-0064 КАЗНИВИ БЖ-111,ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ 22263 Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии и представляет собой штамм мытного стрептококка серологической группы С,используемый для изготовления диагностических препаратов. Известен штамм бактерийЮС-15,используемый для изготовления диагностических препаратов Бижанов А.Б. Мыт лошадей и меры борьбы с ним. Дисс.док.вет.наук 16.00.03. Алматы, КазНИВИ, 1999, с.70-72. Недостатком этого штамма является то, что он обладает низкой антигенностью и высокой реактогенностью. Задачей изобретения является выделение штамма, имеющего этиологическое значение в Республике Казахстан при мыте лошадей с высокими антигенными свойствами и умеренной реактогенностью. Технический результат, обеспечиваемый изобретением, выражается в изыскании высокоэффективных диагностических препаратов. Штамм бактерийВ-0064 КазНИВИ БЖ-111, используемый для изготовления диагностических препаратов. Указанный штамм бактерий депонирован в Лаборатории по изучению генофонда микроорганизмов ТОО Казахский научно-исследовательский ветеринарный институт (КазНИВИ). Идентификацию штамма бактерий проводят по основным морфологическим, культуральным и биохимическим свойствам, согласно определителю(1997). Штамм бактерийВ-0064 КазНИВИ БЖ-111 характеризуется следующими свойствами. Селекция штамма. Штамм бактерийВ-0064 КазНИВИ БЖ-111 выделен из гноя вскрывшегося подчелюстного лимфатического узла больной мытом лошади,принадлежащей крестьянскому хозяйству Женис Казалинского района Кызылординской области,путем посева в селективную питательную среду КазНИВИ с последующими пассажами через организм белых мышей. Культурально-морфологические свойства. На МПБ с 10 крови и 1 глюкозы при рН среды 7,4 дает рост в виде помутнения среды с образованием небольшого осадка на дне пробирки, при хранении в течение 3-5 сут бульон просветляется с образованием обильного сероватого осадка. На МПА с 10 крови и 1 глюкозы образовывает мелкие, округлой формы, прозрачные, росинчатые,гладкие, вязкой консистенции сливающиеся колонии трудно снимаемые петлей, при просмотре на свет прозрачные с голубоватым оттенком, при хранении в течение 2-4 сут колонии становятся серовато-белыми, прозрачными, но сохраняют гладкие очертания. В мазках из бульонных культур и гноя располагаются в виде длинных цепочек состоящих из 16-100 и более кокков, вытянутых в поперечном направлении в виде частокола, в мазках из агаровых культур располагаются одиночно, по две или короткими цепочками. Через 2 24 ч после посева на агар с 10 крови лошади образовывает зоны просветления вокруг колонии диаметром 2-4 мм, при последующем хранении чашек при 4 С в течение 24 ч зона гемолиза не увеличивается. Биохимические свойства. Обладает слабовыраженными биохимическими свойствами, не растет в МПБ с 40 желчи, не изменяет молоко с метиленовой синью, не свертывает молоко, не редуцирует лакмус, не ферментирует сорбит,маннит, глицерин, арабинозу, рафинозу, лактозу, не разжижает желатину, а разлагает глюкозу, сахарозу и мальтозу с образованием кислоты без газа. Антигенные свойства. Штамм преципитируется специфической стрептококковой сывороткой серологической группы С. Антигенная активность. При парентеральном введении в организм лошади вызывает выработку антител, выявляемых в РНГА, титр 11600. Питательные потребности штамма - прототроф. Генетические особенности штамма. Лизирует эритроциты лошади, белых мышей, слабо лизирует эритроциты кроликов, не лизирует эритроциты золотистых хомячков, не ферментирует лактозу и маннит,не продуцирует стрептолизин-О,продуцирует гемолизин, лейкоцидин, токсин общего действия и агрессин. Продукт, синтезируемый штаммом - гемолитический токсин. Активность (продуктивность). Лизис эритроцитов лошади и белой мыши. Реактогенность. Обладает умеренно-средней степенью реактогенности для лошадей. Иммуногенность. При внутримышечном введении в дозе 2,5107 м.к. продолжительность напряжения иммунитета у белых мышей составляет 18 мес. Стабильность при пассировании. Основные биологические свойства штамма стабильно сохраняются в течение 6 мес (срок наблюдения). Штамм хранится в темном месте, в лиофильно высушенном состоянии и в стеклянных ампулах под вакуумом при температуре от 4 до 10 С в течение 12 мес. Пример 1. Штамм бактерийВ 0064 КазНИВИ БЖ-111 выращивают в МПБ,обогащенной 10 сыворотки крови лошади и 1 глюкозы, до накопления 5 млрд м.к. в 1 см 3. Бактериальную массу инактивируют формалином в течение 72 ч, затем добавляют 3 раствор гидроокиси алюминия из расчета 10 к объему культуры. Через 3 сут после внесения адъюванта вакцину расфасовывают во флаконы и контролируют на безвредность, стерильность и активность. При внутримышечном введении жеребятам полученной вакцины заболеваемость снижается до 85 по сравнению с не вакцинированными животными. Пример 2. Штамм бактерийВ 0064 КазНИВИ БЖ-111 используют для изготовления диагностических препаратов. Штамм бактерийВ-0064 КазНИВИ БЖ-111 выращивают в МПБ,обогащенной 10 сыворотки крови лошади и 1 22263 глюкозы, при температуре 36-37 С в течение 16-20 ч, центрифугируют и дважды отмывают в физиологическом растворе. Полученную взвесь прогревают в водяной бане при 56-58 С в течение 45 мин, центрифугируют и к осадку добавляют 0,25 раствор пепсина и оставляют на 4 ч при 37 С,затем рН доводят до 7,0 путем добавления раствора едкого натра, трижды отмывают физиологическим раствором и готовят взвесь,содержащий 2109 м.к. в 1 см 3. Каждым антигеном иммунизируют по 4 кролика. Антиген вводят внутривенно в течение 8 нед. В процессе иммунизации каждому кролику дают 24 инъекции и вводят 40 млрд м.к. Средний титр полученных сывороток в реакции преципитации следующий сывороткаЮС-15 132, сывороткаВ-0064 КазНИВИ БЖ-111 1128. Таким образом, результаты поверки показали,что диагностическая сыворотка к штаммуВ-0064 КазНИВИ БЖ-111 обладает более высокой активностью по сравнению с сывороткой к штаммуЮС-15. Использование штамма бактерийВ-0064 КазНИВИ БЖ-111 позволит изготовить диагностический препарат, выявляющий больных мытом лошадей на ранней стадии заболевания. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Штамм бактерий-0064 КазНИВИ БЖ-111, используемый для изготовления диагностических препаратов.