Жидкая питательная среда для реактивации музейных штаммов энтеробактерий

(51) 12 1/20 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН(57) Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии и может быть использовано для повышения эффективности реактивации клеток коллекционных штаммов энтеробактерий. Технический результат,обеспечиваемый изобретением,выражается в получении качественной жидкой питательной среды для реактивации музейных штаммов энтеробактерий после длительного хранения. Жидкая питательная среда для реактивации музейных штаммов энтеробактерий, включающая питательную основу, калий фосфорнокислый двузамещенный и натрия хлорид, в качестве питательной основы она содержит картофельный экстракт и дополнительно пептон ферментативный,экстракт пекарских дрожжей при следующем соотношении компонентов, мас.картофельный экстракт 91,0 - 94,5 ферментативный пептон 0,7 - 1,2 натрия хлорид 0,3 - 0,7 калий фосфорнокислый двузамещенный 0,7 - 1,2 дрожжевой экстракт остальное(72) Тлегенова Жулдыз Женисовна Сансызбай Абылай Рысбайулы Сейдахметова Роза Джаровна Мантрова Татьяна Павловна Егорова Наталья Николаевна(73) Дочернее государственное предприятие на праве хозяйственного ведения Научноисследовательский ветеринарный институт Республиканского государственного предприятия на праве хозяйственного ведения Научнопроизводственный центр животноводства и ветеринарии Министерства сельского хозяйства Республики Казахстан(54) ЖИДКАЯ ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ РЕАКТИВАЦИИ МУЗЕЙНЫХ ШТАММОВ ЭНТЕРОБАКТЕРИЙ 19922 Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии и может быть использовано для повышения эффективности реактивации клеток коллекционных штаммов энтеробактерий. Известна жидкая питательная среда для выращивания энтеробактерий,включающая питательную основу, калий фосфорнокислый двузамещенный и натрия хлорид Сансызбай А. Р.,Султанов А. А., Сейдахметова Р.Д. и др. Каталог культур микроорганизмов. Алматы, 2005 с. 201-202. Недостатком известной жидкой питательной среды является низкая высеваемость и незначительная интенсивность роста энтеробактерий, при этом реактивация клеток энтеробактерий полностью проявляется только через 24 часа. Задачей изобретения является разработка жидкой питательной среды, обладающей быстрой и высокой селективной способностью для реактивации музейных штаммов энтеробактерий родови Е.после длительного хранения, обеспечивающей стимулирование роста сальмонелл и кишечных бактерий. Технический результат,обеспечиваемый изобретением,выражается в получении качественной жидкой питательной среды для реактивации музейных штаммов энтеробактерий после длительного хранения. Жидкая питательная среда для реактивации музейных штаммов энтеробактерий, включающая питательную основу, калий фосфорнокислый двузамещенный и натрия хлорид, дополнительно в качестве питательной основы она содержит картофельный экстракт, пептон ферментативный,экстракт пекарских дрожжей при следующем соотношении компонентов, мас.картофельный экстракт 91,0-94,5 ферментативный пептон 0,7 - 1,2 натрия хлорид 0,3 - 0,7 калий фосфорнокислый двузамещенный 0,7 - 1,2 дрожжевой экстракт остальное Для подбора жидкой питательной среды,повышающей эффективность реактивации,высеваемость и интенсивность роста энтеробактерий, были апробированы различные процентные соотношения компонентов. Пример 1. Жидкую питательную среду для реактивации музейных штаммов энтеробактерий используют при следующем соотношении компонентов картофельный экстракт 91,0 ферментативный пептон 0,7 натрия хлорид 0,3 калий фосфорнокислый двузамещенный 0,7 дрожжевой экстракт остальное Пример 2. Жидкую питательную среду для реактивации музейных штаммов энтеробактерий используют при следующем соотношении компонентов картофельный экстракт 92,5 ферментативный пептон 1,0 натрия хлорид 0,52 калий фосфорнокислый двузамещенный 1,0 дрожжевой экстракт остальное Пример 3. Жидкую питательную среду для реактивации музейных штаммов энтеробактерий используют при следующем соотношении компонентов картофельный экстракт 94,5 ферментативный пептон 1,2 натрия хлорид 0,7 калий фосфорнокислый двузамещенный 1,2 дрожжевой экстракт остальное Пример 4. Для изготовления 1000,0 мл жидкой питательной среды берут 500,0 г вымытого,очищенного, крупно нарезанного картофеля,заливают двойным количеством водопроводной воды в объеме 1000,0 мл, затем автоклавируют при 133 С в течение 10 мин. Полученный отвар охлаждают и оставляют для просветвления на 15-20 мин. Верхний слой жидкости сливают, дважды фильтруют через бумажный фильтр, доводят уровень воды до первоначального объема. К полученному фильтрату добавляют 5,0 г хлористого натрия,10,0 г пептона,10,0 г калия фосфорнокислого двузамешенного и 50,0 мл дрожжевого экстракта. После чего смесь кипятят в течение 1-2 мин, затем остужают, устанавливают рН 7,0-7,4 и фильтруют через бумажный фильтр,разливают в стерильных условиях по 10,0 мл в пробирки, закрывают ватно-марлевыми пробками. Пробирки с жидкой питательной средой стерилизуют автоклавированием при температуре 112 С в течение 15-20 мин. В каждую пробирку вносят культуру и ставят в термостат на 16-18 час при температуре 37 С. Культуры в пробирках начинают расти по истечении 4-5 час. Через 16-18 ч,после инкубации, отмечают интенсивный рост штаммов. Результаты проведенных исследований роста бактерий родови Е.в испытуемой и контрольной питательной средах представлены в таблице. Из таблицы видно, что рост штаммов энтеробактерий начинается по истечении 4-5 часов и в контрольной (бульон Хоттингера), и в испытуемой жидкой питательной средах. Однако предложенная жидкая питательная среда через 10 часов имеет больший выход бактериальной массы по сравнению с контрольной. Через 16-18 часов инкубации отмечается обильный рост в испытуемой питательной среде. Реактивация клеток музейных штаммов энтеробактерий происходит быстрее в предлагаемой жидкой питательной среде. Предложенная жидкая питательная среда позволяет ускорить реактивацию клеток музейных штаммов энтеробактерий в два раза (по сравнению с контролем), что делает более эффективными и продуктивными бактериологические исследования. 19922 Таблица Рост бактерий родови Е.в испытуемой и контрольной питательной средах Культивируемые штаммы Примечание Знаком- отмечено наличие роста культур -рост хороший -рост обильный,очень густой. пептон ферментативный, экстракт пекарских дрожжей при следующем соотношении ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ компонентов, мас.Жидкая питательная среда для реактивации картофельный экстракт 91,0 - 94,5 музейных штаммов энтеробактерий, включающая ферментативный пептон 0,7 - 1,2 питательную основу, калий фосфорнокислый натрия хлорид 0,3 - 0,7 двузамещенный и натрия хлорид, отличающаяся калий фосфорнокислый двузамещенный 0,7 - 1,2 остальное тем, что в качестве питательной основы она дрожжевой экстракт содержит картофельный экстракт и дополнительно