Вакцина против бруцеллеза животных

(2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ Авторское свидетельство 1725904, А 61 К 39/10, 12 1/04, 1992(54) ВАКЦИНА ПРОТИВ БРУЦЕЛЛЕЗА ЖИВОТНЫХ(57) Изобретение относится к области иммунологии и может быть использовано при промышленном производстве живых вакцин против бруцеллеза животных. Вакцина против бруцеллеза животных включает бруцеллезный штамм 82, и дополнительно содержит протективный бруцеллезный антиген, выделенный из штамма. Преимуществом предложенной вакцины является более высокая иммуногенность.(72) Иванов Николай Петрович Хусаинов Дамир Микдатович Белобаб Виктор Иванович 17525 Изобретение относится к области иммунологии и может быть использовано при промышленном производстве живых вакцин против бруцеллеза животных. Известна живая вакцина против бруцеллеза животных, состоящая из бруцеллезного штамма 82 (Ветеринарные препараты. Под ред. Осидзе Д.Ф., М. 1981, с.178). Недостатком существующего способа является невысокая активность данной вакцины. Задачей изобретения является разработка вакцины против бруцеллеза животных, обладающей более высокой иммуногенностью. Вакцина против бруцеллеза животных включает бруцеллезный штамм 82, при этом дополнительно содержит протективный бруцеллезный антиген, выделенный из штамма. Пример 1. Приготовление вакцины против бруцеллеза. Сухую культуру штамма .82 засевают на эритрит-агар и культивируют в течение 48 ч при температуре 37-38 С. Далее засевают в биоферментеры из расчета 5-10 млрд микробных клеток на 1,0 см 3 жидкой питательной среды на основе перевара Хоттингера. Культивируют 24-36 ч при температуре 37-38 С, поддержании растворенного кислорода на уровне 20-40 см 3/час, рН 6,8-7,1, перемешивании при 200-300 об/мин. После осаждения бактериальную массу разводят забуференным физиологическим раствором с рН 8,0 до концентрации 100 млрд микробных клеток. Часть бактериальной массы, с концентрацией 100 млрд микробных клеток, убивают в автоклаве при 120 С в течение 30 минут. Полученную взвесь подвергают воздействию (с помощью ультразвукового диспергатора УЗДН-1 при частоте 20-30 кГц,мощности 50-70 Вт/см 2) ультразвуковых волн до просветления (25-30 минут). Другую часть бактериальной массы разводят до концентрации 100 млрд микробных клеток, далее к ней добавляют сахарозо-желатиновую среду высушивания в соотношении 11 и дезинтеграт бруцелл 5-10 к общему объему, разливают вакцину в ампулы или флаконы, подвергают лиофильной сушке, запаивают ампулы и укупоривают флаконы, этикетируют и упаковывают. На всех стадиях способа изготовления вакцины осуществляется биологический контроль на чистоту и специфичность культуры. Реализуемый биопрепарат также проверяется на чистоту, иммуногенность,безвредность и выживаемость. Пример 2 Иммуногенные свойства вакцины проверяют в опытах на морских свинках. С этой целью морским свинкам (10 голов) массой 300-400 г вводят подкожно в паховую область взвесь вакцинного штамма 82 в дозе 100 млрд микробных клеток по оптическому стандарту мутности ГНИИСК им. Л.А. Тарасевича в объеме 1,0 см 3. Иммунизированных свинок через 3060 суток заражают 5-10 минимальными инфицирующими дозами вирулентной культуры бруцелл вида 54. Суспензию вирулентного штамма бруцелл вводят под кожу в области паха со стороны,противоположной месту введения вакцинной культуры бруцелл. Одновременно заражают 15 контрольных (невакцинированных) свинок в той же дозе. Через 35-40 суток зараженных свинок убивают и проводят бактериологические высевы из паховых,подчелюстных, шейных, параортальных лимфатических узлов, печени, селезенки, почки и костного мозга. При этом используют 1 пробирку с бульоном и две с агаром для каждого из 10 объектов и помещают на 15 суток в термостат при 37-38 С для инкубирования. Посевы учитываются трижды первый раз через 4-6 суток, второй раз на 14-е сутки и третий раз через 3-4 недели. Причем после первого учета пробирки с агаром дополнительно увлажняют посевным материалом. Препарат считают иммуногенным, если он предохраняет не менее 70 вакцинированных морских свинок. В случае заражения более 30 морских свинок, проверку иммуногенных свойств повторяют. Если при повторном контроле иммунных животных окажется менее 70 , то такую вакцину бракуют. Результаты опыта, приведенные в таблице, свидетельствуют о высоких иммуногенных свойствах заявленной вакцины. Таблица Иммуногенные свойства комбинированной вакцины в сравнении с коммерческой Количество морских свинок 10 Количество иммунных абсолютное число в 10 100 Штамм .82 с протективным антигеном Штамм .82 10 8 80 Контроль 10 Предложенная вакцина против бруцеллеза животных обладает более высокой иммуногенностью. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Вакцина против бруцеллеза животных, состоящая из бруцеллезного штамма 82, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит протективный бруцеллезный антиген, выделенный из штамма 82.