Штамм “нисхи-мпк” вируса бешенства, используемый для приготовления культуральной инактивированной антирабической вакцины

(51) 12 7/00 (2006.01) 61 39/205 (2006.01) 12 1/93 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ ринарных биологических препаратов / Тез.докл. Вс.конф., М., 1978, с. 141-142(54) ШТАММ НИСХИ-МПК ВИРУСА БЕШЕНСТВА, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ КУЛЬТУРАЛЬНОЙ ИНАКТИВИРОВАННОЙ АНТИРАБИЧЕСКОЙ ВАКЦИНЫ(57) Изобретение относится к ветеринарной вирусологии и представляет собой новый штамм НИСХИ-МПК вируса бешенства, пригодный для приготовления культуральной инактивированной антирабической вакцины. Предложенный штамм обладает повышенной биологической и иммуногенной активностью и пригоден для промышленной технологии изготовления культуральной инактивированной антирабической вакцины.(72) Мамадалиев Сейдигапбар Мамадалиевич Хайруллин Берик Мухитович Троицкий Евгений Николаевич Демченко Анатолий Григорьевич(73) Дочернее государственное предприятие на праве хозяйственного ведения Научно-исследовательский институт проблем биологической безопасности Республиканского государственного предприятия на праве хозяйственного ведения Национальный центр биотехнологии Республики Казахстан Министерства образования и науки Республики Казахстан(56) Сазанова Э.Я., Кузнецова СВ., Кузнецов П.П.,Иванов Влияние различных инактивантов на иммуногенность вируса бешенства // Научные основы технологии промышленного производства вете 10103 Изобретение относится к ветеринарной вирусологии и представляет собой новый штамм вируса бешенства, пригодный для приготовления культуральной инактивированной антирабической вакцины. Известен производственный штамм ОК-4 вируса бешенства, используемый для приготовления культуральной инактивированной антирабической вакцины (Сазанова Э.Я., Кузнецова С.В., Кузнецов П.П., Иванов В.С. Влияние различных инативантов на иммуногенность вируса бешенства // Научные основы технологии промышленного производства ветеринарных биологических препаратов. Тез. докл. Вс.конф., М., 1978, с. 141-142). Недостатком указанного штамма является низкая биологическая и иммуногенная активность. Задачей изобретения является создание штамма вируса бешенства, обладающего повышенной биологической и иммуногенной активностью и пригодного для промышленной технологии изготовления культуральной инактивированной антирабической вакцины. Штамм НИСХИ-МПК получен в результате длительного пассирования эпизоотического вируса в культуре клеток ВНК-21 сотрудниками Научноисследовательского сельскохозяйственного института и хранится в лабораторнии Культивирования вирусов с музеем штаммов микроорганизмов НИСХИ Национального центра по биотехнологии Республики Казахстан. Штамм характеризуется следующими свойствами Морфология Вирион имеет пулевидную форму диаметром 7580 нм и длиной 1805 нм. Физические свойства РНП вируса в градиенте сахарозы имеет КС 200, очищенный вирус - 600, плавучая плотность в хлористом цезии 1,32 г/см 3. Чувствительность Вирус быстро инактивируется липидорастворителями и 0,1 -ным трипсином, устойчив к рН 5,010,0 при температуре 4 С. Репродукционная активность Штамм культивируют в перевиваемой культуре клеток ВНК-21. Максимальное накопление вируса происходит при заражении 3-4-суточной культуры клеток ВНК-21 в дозе 0,1-0,5 ТЦД 50 на клетку при 37 С в течение 5-7 суток. Цитопатическое действие вируса характеризуется окружением клеток и отслоением от стенки. Данные условия культивирования позволяют получать вирусную суспензию с активностью 7,0-6,5 ТЦД 50/см 3. Штамм НИСХИ-МПК в составе вакцины обладает выраженными антигенными и иммуногенными свойствами. Безвредность. Культуральная инактивированная антирабическая вакцина из штамма НИСХИ-МПК не вызывает каких-либо отклонений в физиологическом состоянии животных в течение 14 суток клинического наблюдения после подкожного введения белым мышам, кроликам и овцам в дозах, соответственно, 0,5 2,0 и 10,0 см 3. Иммуногенность. Отмечена полная невосприимчивость животных к контрольному интрацеребральному заражению через 20 суток после подкожной иммунизации подопытных мышей, кроликов и овец,соответственно, 0,5 1,0 и 4,0 см 3 вакцины из штамма НИСХИ-МПК при 100-процентной гибели контрольных животных в течение 14 суток наблюдения. Вакцина пригодна для иммунизации всех восприимчивых к бешенству сельскохозяйственных животных, а также собак и кошек. Пример. Культуру клеток ВНК-21 заражают вирусом бешенства шт. НИСХИ-МПК в дозе 0,10,5 ТЦД 50 на клетку. Сбор вируса производят на 5-7 сутки при 80-90 поражении монослоя клеток ВНК-21. Собранный материал центрифугируют при 3 тыс. об/мин в течение 30 минут и отбирают надосадочную жидкость, которую инактивируют формальдегидом. После окончания процесса инактивации суспензию адсорбируют на гель гидроокиси алюминия и добавляют дополнительный адъювантсапонин. Готовую вакцину отстаивают и разливают во флаконы. В дальнейшем биопрепарат проходит биологический контроль на стерильность, безвредность, токсичность, авирулентность и иммуногенность. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Штамм НИСХИ-МПК вируса бешенства (коллекция НИСХИ НЦБ РК,П 10-98/Д), используемый для приготовления культуральной инактивированной антирабической вакцины