Способ клеточной терапии экспериментального хронического орхоэпидидимита
Номер инновационного патента: 28421
Опубликовано: 15.05.2014
Авторы: Медеубеков Улугбек Шалхарович, Алчинбаев Мырзакарим Каримович, Кусымжанов Суният Мирзакенович, Буйрашев Ануар Канашевич, Токтабаянов Биржан Галымович
Формула / Реферат
Способ клеточной терапии экспериментального хронического
орхоэпидидимита
Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к урологии и предназначено для лечения экспериментальной хронического орхоэпидидимита для усовершенствования общепринятых и разработка новых методов лечения и профилактики этого заболевания у людей.
Способ клеточной терапии экспериментального хронического
орхоэпидидимита включает проведение антибактериальной терапии экспериментального животного цефазолином в дозе 10 мг/кг веса в течение трех суток, после чего производят забор костного мозга из крыла подвздошной кости экспериментального животного в объеме 5 см3 , отделяют и отмывают клетки костного мозга, отмытые аутологичные мононуклеарные клетки выращивают в питательной среде Mesencult, полученные мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки в объеме 1 мл вводят в организм экспериментальных животных в паренхиму яичка.Разработанный способ выделения и введения аутологичных мононуклеарных клеток в ушную раковину лабораторных животных с целью изучения и внедрения новых методов лечения инфертильности и может быть использования для экспериментального лечения этих заболеваний.
Текст
(51) 61 10/02 (2006.01) 61 10/00 (2006.01) 61 35/28 (2006.01) 61 49/00 (2006.01) 12 1/14 (2006.01) 12 3/00 (2006.01) 01 1/00 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ общепринятых и разработка новых методов лечения и профилактики этого заболевания у людей. Способ клеточной терапии экспериментального хронического орхоэпидидимита включает проведение антибактериальной терапии экспериментального животного цефазолином в дозе 10 мг/кг веса в течение трех суток, после чего производят забор костного мозга из крыла подвздошной кости экспериментального животного в объеме 5 см 3, отделяют и отмывают клетки костного мозга,отмытые аутологичные мононуклеарные клетки выращивают в питательной среде , полученные мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки в объеме 1 мл вводят в организм экспериментальных животных в паренхиму яичка.Разработанный способ выделения и введения аутологичных мононуклеарных клеток в ушную раковину лабораторных животных с целью изучения и внедрения новых методов лечения инфертильности и может быть использования для экспериментального лечения этих заболеваний.(72) Алчинбаев Мырзакарим Каримович Медеубеков Улугбек Шалхарович Кусымжанов Суният Мирзакенович Буйрашев Ануар Канашевич Токтабаянов Биржан Галымович(73) Акционерное общество Научный центр урологии имени академика Б.У. Джарбусынова(56) Чиненный В.Л. Острый эпидидимит в урологической практике // Автореферат на соискание ученой степени кандидата медицинских наук, 1991, Москва, с.10-15(54) СПОСОБ КЛЕТОЧНОЙ ТЕРАПИИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ХРОНИЧЕСКОГО ОРХОЭПИДИДИМИТА(57) Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к урологии и предназначено для лечения экспериментальной хронического орхоэпидидимита для усовершенствования Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к урологии и предназначено для лечения экспериментальной хронического орхоэпидидимита для усовершенствования общепринятых и разработка новых методов лечения и профилактики этого заболевания у людей. Острое воспаление яичка и придатка(орхоэпидидимит), является одним из наиболее частых урологических заболеваний. Более 27 мужчин на протяжении жизни переносят эпидидимоорхит. Статистические данные о частоте заболевания свидетельствуют об актуальности его изучения с различных точек зрения патогенетической,диагностической,лечебной,профилактической. Переход острого орхоэпидидимита в хронический чреват многими последствиями, среди которых наиболее серьзны нарушение проходимости придатка яичка,развитие склеротического и дистрофического процессов в яичке, что приводит к нарушению репродуктивной функции этих органов на стороне поражения. Тактика лечения острого и хронического орхоэпидидимита у пациентов строго дифференцирована, в некоторых случаях при остром орхоэпидидимите выполняют эпидидимотомию, ведущую к декомпрессии органа и уменьшению остроты воспаления, а также проведение консервативного лечения путем антибиотикотерапии и физиотерапии(Чиненный В. Л. Острый эпидидимит в урологической практике -автореферат на соиск. ученой степени канд. мед наук.- 1991. - Москва. с.10-15). Недостатком известного способа лечения является то, он предназначен для лечения пациентов. В доступных патентно-информационных источниках информации прототипа способу клеточной терапии экспериментального хронического орхоэпидидимита не найдено. Задача изобретения - разработка способа клеточной терапии экспериментального хронического орхоэпидидимита, позволяющего эффективно и доступно провести лечение. Способ клеточной терапии экспериментального хронического орхоэпидидимита включает проведение антибактериальной терапии экспериментального животного цефазолином в дозе 10 мг/кг веса в течение трех суток, после чего производят забор костного мозга из крыла подвздошной кости экспериментального животного в объеме 5 см 3, отделяют и отмывают клетки костного мозга,отмытые аутологичные мононуклеарные клетки выращивают в питательной среде , полученные мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки в объеме 1 мл вводят в организм экспериментальных животных в паренхиму яичка. Способ осуществляют следующим образом. В качестве объекта исследований используют беспородных кроликов, самцов, весом 3-4 кг,которым ранее осуществляют модель экспериментального хронического 2 орхоэпидидимита путем введения в половые органы экспериментального животного бактериальной культуры. Введение осуществляют в паренхиму мошонки на глубину 3 мм в объеме 0,2 мл, в качестве бактериальной культуры используют смешанные культуры стафиллококстрептококк в титре 106 микробных тел. Клиническую картину экспериментального хронического орхоэпидидимита у экспериментального животного(кролик) определяют на 30 сутки, при проведении патоморфологических и ультразвуковых исследований экспериментальных животных. На 30 сутки от начала введения в половые органы экспериментального животного бактериальной культуры и при постановки диагноза экспериментального хронического орхоэпидидимита на основе патоморфологических и ультразвуковых исследований подопытным животным проводят антибактериальную терапию цефазолином в дозе 10 мг/кг. Затем выполняют забор костного мозга из крыла подвздошной кости в объеме 5 см 3 с гепаринизированным раствором Хенкса. После сепарации и отмывания ядросодержащих клеток от эритроцитов осадок ресуспендируют в питательной среде,специальной среде для культивирования мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток (ММСК). Клетки высевают в матрасики Т-25. По достижению монослоя клетки снимают диспергирующим раствором, отмывают раствором Хенкса. После центрифугирования осадок клеток ресуспендируют в физиологическом растворе. Концентрация клеток - 1 млн.клеток/см 3.Взвесь клеток в объеме 1 мл вводят в организм экспериментальных животных в паренхиму яичка. Пример выполнения способа. Использовано животное - кролик самец, весом 3,5 кг. В паренхиму мошонки на глубину 3 мм в объеме 0,2 мл, в качестве бактериальной культуры были введены смешанные культуры стафиллококстрептококк в титре 106 микробных тел. Клиническую картину экспериментального хронического орхоэпидидимита у данного экспериментального животного определили на 30 сутки, при проведении ультразвуковых исследований. После этого животному провели антибактериальную терапию цефазолином в дозе 10 мг/кг. Затем выполнили забор костного мозга из крыла подвздошной кости экспериментального животного в объеме 5 см 3,отделили и отмыли клетки костного мозга. После сепарации и отмывания ядросодержащих клеток от эритроцитов осадок ресуспендировали в питательной среде,специальной среде для культивирования мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток (ММСК). Клетки высеяли в матрасики Т-25. По достижению монослоя клетки сняли со стекла диспергирующим раствором, отмыли раствором Хенкса. После центрифугирования осадок клеток ресуспендировали в физиологическом растворе. Концентрация клеток - 1 млн.клеток/см 3. Взвесь клеток в объеме 1 мл ввели в организм экспериментальных животных в паренхиму яичка. Результаты гистоморфологического исследования после трансплантации аутологичных ММСК в организм экспериментальных животных в паренхиму яичка. В материале ткань (паренхима) яичка с нормальной фиброзной стромой без признаков настоящего или прошлого воспаления или его организации. Сперматогенез выражен отлично во всех извитых канальцах - Фиг.1. В материале исследования ткань яичка,нормального гистологического строения. Строма яичка нежно-волокнистая,хорошо васкуляризирована, без признаков воспаления или его организации. Во всех канальцах хорошо выражен сперматогенез (слегка запустевшие канальцы единичны около 5) - Фиг.2. В исследуемом материале ткань яичка нормального гистологического строения. Строма нежно-волокнистая, без признаков воспаления или его организации. Сперматогенез в извитых канальцах выражен хорошо признаки запустения выражены очень слабо (около 10) - Фиг.3. В исследуемом материале нормальная ткань яичка. Признаков воспаления или его организации в строме и в паренхиме не обнаружено. Сперматогенез выражен хорошо (полупустых канальцев около 5) Фиг.4. В материале ткань яичка без признаков бывшего или настоящего воспаления в строме и паренхиме яичка, а так же в прилежащих тканях Сперматогенез отличный - Фиг.5. В исследуемом материале ткань яичка нормального гистологического строения, без признаков воспаления или его организации в строме и в паренхиме. Сперматогенез отличный полупустых канальцев менее 5. Фиг.6. Результаты гистоморфологии после трансплантации аутологичных мононукларных клеток в паренхиму яичка показывают, что при этом наблюдается положительный эффект,выражающийся в следующем- уменьшение запустевших канальцев. Таким образом,статистически доказано,что трансплантация аутологичных мононукларных клеток в паренхиму яичка приводят к уменьшению и исчезновению признаков воспаления и, главным образом, улучшает сперматогенез. Экспериментальным путем установлены нормальные показатели размеров яичек, показателей скорости кровотока, индекса резистентности и пульсационного индекса у лабораторных кроликов после проведенного лечения. Разработанный способ получения и введения ММСК в паренхиму яичка в организм лабораторных животных с целью изучения и внедрения новых методов лечения инфертильности и может быть использован для экспериментального лечения этих заболеваний. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ клеточной терапии экспериментального хронического орхоэпидидимита,включающий проведение антибактериальной терапии экспериментального животного цефазолином в дозе 10 мг/кг веса в течение трех суток, отличающийся тем, что после антибиотикотерапии производят забор костного мозга из крыла подвздошной кости экспериментального животного в объеме 5 см 3,отделяют и отмывают клетки костного мозга,отмытые аутологичные мононуклеарные клетки выращивают в питательной среде С,полученные мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки в объеме 1,0 мл вводят в паренхиму яичка экспериментального животного.
МПК / Метки
МПК: A61K 49/00, A61B 10/00, A61K 35/28, C12Q 1/14, C12M 3/00, A61B 10/02, A01N 1/00
Метки: хронического, способ, орхоэпидидимита, терапии, экспериментального, клеточной
Код ссылки
<a href="https://kz.patents.su/5-ip28421-sposob-kletochnojj-terapii-eksperimentalnogo-hronicheskogo-orhoepididimita.html" rel="bookmark" title="База патентов Казахстана">Способ клеточной терапии экспериментального хронического орхоэпидидимита</a>
Предыдущий патент: Способ получения антигенного эритроцитарного диагностикума для определения специфических антител к бруцеллезным фагам
Следующий патент: Способ герниопластики при вентральных грыжах
Случайный патент: Способ приготовления бурового раствора