Способ идентификации родов грамположительных кокков
Номер инновационного патента: 22776
Опубликовано: 16.08.2010
Авторы: Азенова Газиза Жанашевна, Крылова Александра Ивановна, Баймуратова Майраш Аушатовна, Воронина Валерия Эммануиловна
Формула / Реферат
Изобретение относится к медицине, а именно к бактериологии и может быть использовано для идентификации родов грамположительных кокков, способных вызывать неспецифические заболевания человека.
Способ идентификации родов грамположительных кокков включает биохимические тесты и выявление 11 фенотипических признаков, по которым осуществляют межродовую дифференциацию исследуемой культуры микроорганизмов по схеме-ключу, в соответствии с которой при установленном анаэробном типе дыхания и отсутствии фермента каталазы: при наличии черного пигмента идентифицируют род Peptococcus, при наличии желтого пигмента - род Sarcina, при отсутствии пигмента, наличии роста на МПА - род Ruminococcus, при отсутствии пигмента, отсутствии роста на МПА - род Peptostreptococcus, при анаэробном типе дыхания, наличии фермента каталазы: - род Staphylococcus (S.aureus var. anaerobius). При аэробном типе дыхания, наличии фермента каталазы, отсутствии пигмента: и определении сферических клеток, расположенных парами и скоплениями, идентифицируют род Staphylococcus, при определении крупных кокков, расположенных парами и тетрадами - род Deinococcus, при определении палочковидных клеток, расположенных парами - род Deinobacter, при наличии пигмента: и росте на 10% NaCl - род Staphylococcus, при отсутствии роста на 10% NaCl - род Micrococcus, при отсутствии фермента каталазы и наличии роста на МПА: и наличии роста на 10% NaCl, отсутствии роста при 45°С идентифицируют род Aerococcus, при отсутствии роста на 10% NaCl, наличии роста при 45°С - род Enterococcus, при отсутствии роста на МПА: и наличии гемолиза на 5% КА, определении сферических и ланцетовидных клеток, расположенных парами и цепочками - род Streptococcus, при наличии гемолиза на 5% КА, определении сферических клеток, уплощенных в зоне соприкосновения - род Gemella, при отсутствии гемолиза на 5% КА, наличии подвижности - род Stomatococcus, при отсутствии гемолиза на 5% КА, отсутствии подвижности, наличии газообразования при ферментации глюкозы - род Leuconostoc, при отсутствии гемолиза на 5% КА, отсутствии подвижности, отсутствии газообразования при ферментации глюкозы - род Lactococcus.
Предлагаемый способ позволяет с малыми экономическими затратами проводить идентификацию 15 родов грамположительных кокков с их межродовой дифференциацией в лабораториях с любым материально-техническим оснащением, при этом он обеспечивает высокую достоверность идентификации.
Текст
(2006.01), 12 1/14 (2006.01), 12 1/30 (2006.01), 12 1/54 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ фермента каталазы, отсутствии пигмента и определении сферических клеток, расположенных парами и скоплениями, идентифицируют род, при определении крупных кокков,расположенных парами и тетрадами - род, при определении палочковидных клеток, расположенных парами - род ,при наличии пигмента и росте на 10- род, при отсутствии роста на 10 род , при отсутствии фермента каталазы и наличии роста на МПА и наличии роста на 10, отсутствии роста при 45 С идентифицируют род , при отсутствии роста на 10 ,наличии роста при 45 С - род , при отсутствии роста на МПА и наличии гемолиза на 5 КА, определении сферических и ланцетовидных клеток, расположенных парами и цепочками - род, при наличии гемолиза на 5 КА,определении сферических клеток, уплощенных в зоне соприкосновения - род , при отсутствии гемолиза на 5 КА, наличии подвижностирод, при отсутствии гемолиза на 5 КА,отсутствии подвижности, наличии газообразования при ферментации глюкозы - род , при отсутствии гемолиза на 5 КА, отсутствии подвижности, отсутствии газообразования при ферментации глюкозы - род . Предлагаемый способ позволяет с малыми экономическими затратами проводить идентификацию 15 родов грамположительных кокков с их межродовой дифференциацией в лабораториях с любым материально-техническим оснащением, при этом он обеспечивает высокую достоверность идентификации.(72) Баймуратова Майраш Аушатовна Воронина Валерия Эммануиловна Крылова Александра Ивановна Азенова Газиза Жанашевна(73) Республиканское государственное казенное предприятие Алматинский государственный институт усовершенствования врачей Министерства здравоохранения Республики Казахстан(54) СПОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИ РОДОВ ГРАМПОЛОЖИТЕЛЬНЫХ КОККОВ(57) Изобретение относится к медицине, а именно к бактериологии и может быть использовано для идентификации родов грамположительных кокков,способных вызывать неспецифические заболевания человека. Способ идентификации родов грамположительных кокков включает биохимические тесты и выявление 11 фенотипических признаков,по которым осуществляют межродовую дифференциацию исследуемой культуры микроорганизмов по схемеключу, в соответствии с которой при установленном анаэробном типе дыхания и отсутствии фермента каталазы при наличии черного пигмента идентифицируют род , при наличии желтого пигмента - род , при отсутствии пигмента, наличии роста на МПА - род, при отсутствии пигмента, отсутствии роста на МПА - род , при анаэробном типе дыхания, наличии фермента каталазы - род(. .). При аэробном типе дыхания, наличии 22776 Изобретение относится к медицине, а именно к бактериологии и может быть использовано для идентификации родов грамположительных кокков,способных вызывать неспецифические заболевания человека. При поведении поиска аналогов предлагаемому способу не найдено. Задачей изобретения является разработка способа идентификации родов грамположительных кокков. Технический результат - предлагаемый способ позволяет с малыми экономическими затратами проводить идентификацию 15 родов грамположительных кокков с их межродовой дифференциацией в лабораториях с любым материально-техническим оснащением, при этом он обеспечивает высокую достоверность идентификации. При разработке предлагаемого способа был использован комплексный подход к этапам идентификации 15 родов, отнесенных по 9-му Определителю Берджи к 17-ой группе грамположительных кокков, составлена схемаключ по биохимическим тестам и фенотипическим признакам с определением родовой принадлежности бактерий родов , , , , посредством использования минимального количества тестов с ранжированием их в виде алгоритма. Технический результат достигается путем исследования культуры микроорганизмов с помощью последовательного применения биохимических тестов и выявления 11 фенотипических признаков исследуемой культуры микроорганизмов с дальнейшей их межвидовой дифференциацией по схеме-ключу. На первом этапе определяют способ дыхания клинических изолятов. Дальнейшую дифференциацию между родами осуществляют с поэтапным учетом каталазной активности, гемолитической активности,способности образовывать пигмент, способности роста при 45 С, резистентности к 10 , теста на ауксотрофность, морфологии, подвижности,наличия фермента фосфатазы, наличия газа при ферментации глюкозы. Способ осуществляется следующим образом. Сущность изобретения поясняется на фиг. 1 и 2,где представлены этапы межвидовой дифференциацией по схеме-ключу. Начинают идентификацию с создания наряду с аэробными, анаэробных условий культивирования,т.е. часть культуры выращивают в анаэростате. Это позволяет осуществить дифференциацию родов с анаэробным способом дыхания от родов с аэробным типом дыхания. В группу анаэробов входят бактерии родов(. .), , , ,. По положительному тесту на наличие фермента каталазы идентифицируют . . 2. Группа, у которой отсутствует фермент каталаза, объединяет 4 рода , . Для идентификации родаучитывают наличие черного пигмента у колоний, выросших на 5 кровяном агаре. Идентификация родаоснована на определении наличия у колоний пигмента желтого цвета. Два оставшихся рода, не образующих пигмент, дифференцируются по тесту наличия роста на мясо-пептонном агаре (МПА) у бактерий родаи отсутствия роста на МПА бактерий рода . (фиг. 1) Другая группа грамположительных кокков с аэробным типом дыхания объединяет 11 родов , , , , ,дифференциация которых основывается на тесте наличия фермента каталазы. Из четырх родов каталазоположительных кокков , , двум родам (,) присущ признак образования желтого пигмента. Их межродовую дифференциацию осуществляют по различной чувствительности к 10 . Для заключительной дифференциации 3-х родов, не образующих пигмент, , учитывают морфологические различия микробных клеток. Многочисленную группу из 7 родов , , , не образующих фермента каталазу, дифференцируют в первую очередь по способности расти на простом мясо-пептонном агаре. Для бактерий родов, , растущих на МПА,идентификацию заканчивают после учета теста на способность к росту при 45 С и способность к росту на среде, содержащей 10 . Характерная гемолитическая активность для оставшихся 5-ти родов, не растущих на МПА, т.е. обладающих ауксотрофностью (, , ), является дифференциальным признаком, объединяющим отдельно 2 родаи , которые впоследствии по морфологическим признакам дифференцируют между собой. Для гемолитически неактивных родов , , положительный тест на подвижность служит заключительным для идентификации рода. Дифференциацию между бактериями родовиосуществляют по тесту образования газа при ферментации глюкозы,(фиг. 2) Пример 1. Со слизистой ротовой полости на 5 кровяном агаре при культивировании в аэробных условиях выделен изолят, который по морфологии и тинкториальным свойствам отнесен к 17 группе 9-го Определителя бактерий Берджи грамположительные кокки. Учитывая условия культивирования, определен аэробный тип дыхания. Установленная отрицательная реакция на наличие фермента каталазы,объединила 7 родов , , . Отсутствие роста на мясо-пептонном агаре,позволило оставить по данному признаку лишь 5 родов , , . Далее,отсутствие гемолиза на 5 кровяном агаре, позволило провести дифференциацию между тремя родами, , . Учет положительного теста на подвижность позволил окончательно идентифицировать выделенную культуру и отнести е к роду . Пример 2. Выделенная из мочи на 5 кровяном агаре урокультура, при культивировании в анаэробных условиях с термостатированием при 37 С в течение 72 часов, по морфологии и тинкториальным свойствам отнесена к 17 группе 9 го Определителя бактерий Берджи грамположительные кокки. Учитывая условия культивирования, определен анаэробный тип дыхания. Установленная отрицательная реакция на наличие фермента каталазы, объединила 4 рода. Учет отсутствия роста на МПА позволил окончательно идентифицировать выделенную культуру и отнести е к роду. Таким образом, применение предлагаемой схемы-ключа позволяет в относительно короткий промежуток времени с малыми экономическими затратами проводить идентификацию грамположительных кокков до вида по 11 признакам, ограничиваясь в отдельных случаях, как в последнем описанном примере, лишь пятью информативными ключевыми тестами. Схема-ключ позволяет проводить идентификацию грамположительных кокков до вида,для осуществления эффективной бактериологической диагностики неспецифических заболеваний. Она может служить основой для рациональной идентификации кокков посредством изучения минимального количества фенотипических признаков даже для лабораторий со средним материально-техническим оснащением. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ идентификации родов грамположительных кокков, отличающийся тем,что проводят биохимические тесты и выявляют 11 фенотипических признаков,после чего осуществляют межродовую дифференциацию исследуемой культуры микроорганизмов по схемеключу, в соответствии с которой при установленном анаэробном типе дыхания, отсутствии фермента каталазы и наличии черного пигмента идентифицируют род , при анаэробном типе дыхания, отсутствии фермента каталазы и наличии желтого пигмента идентифицируют род, при анаэробном типе дыхания, отсутствии фермента каталазы, отсутствии пигмента, наличии роста на МПА идентифицируют род ,при анаэробном типе дыхания, отсутствии фермента каталазы, отсутствии пигмента, отсутствии роста на МПА идентифицируют род , при анаэробном типе дыхания, наличии фермента каталазы, идентифицируют род(. . ), при аэробном типе дыхания, наличии фермента каталазы, отсутствии пигмента, определении сферических клеток,расположенных парами и скоплениями,идентифицируют род , при аэробном типе дыхания, наличии фермента каталазы,отсутствии пигмента, определении крупных кокков расположенных парами и тетрадами,идентифицируют род , при аэробном типе дыхания, наличии фермента каталазы,отсутствии пигмента, определении палочковидных клеток, расположенных парами идентифицируют род , при аэробном типе дыхания,наличии фермента каталазы, наличии пигмента,росте на 10 идентифицируют род, при аэробном типе дыхания,наличии фермента каталазы, наличии пигмента,отсутствии роста на 10 идентифицируют род , при аэробном типе дыхания,отсутствии фермента каталазы, наличии роста на МПА, наличии роста на 10 , отсутствии роста при 45 С идентифицируют род ,при аэробном типе дыхания, отсутствии фермента каталазы, наличии роста на МПА, отсутствии роста на 10 , наличии роста при 45 С идентифицируют родпри аэробном типе дыхания, отсутствии фермента каталазы,отсутствии роста на МПА, наличии гемолиза на 5 КА, определении сферических и ланцетовидных клеток, расположенных парами и цепочками идентифицируют родпри аэробном типе дыхания, отсутствии фермента каталазы,отсутствии роста на МПА, наличии гемолиза на 5 КА, определении сферических клеток, уплощенных в зоне соприкосновения идентифицируют род, при аэробном типе дыхания, отсутствии фермента каталазы, отсутствии роста на МПА,отсутствии гемолиза на 5 КА, наличии подвижности идентифицируют родпри аэробном типе дыхания, отсутствии фермента каталазы, отсутствии роста на МПА, отсутствии гемолиза на 5 КА, отсутствии подвижности,наличии газообразования при ферментации глюкозы идентифицируют род , при аэробном типе дыхания, отсутствии фермента каталазы,отсутствии роста на МПА, отсутствии гемолиза на 5 КА, отсутствии подвижности, отсутствии газообразования при ферментации глюкозы идентифицируют род .
МПК / Метки
МПК: C12N 1/02, C12Q 1/14, C12Q 1/04, C12Q 1/30, C12Q 1/54
Метки: идентификации, грамположительных, способ, кокков, родов
Код ссылки
<a href="https://kz.patents.su/5-ip22776-sposob-identifikacii-rodov-grampolozhitelnyh-kokkov.html" rel="bookmark" title="База патентов Казахстана">Способ идентификации родов грамположительных кокков</a>
Предыдущий патент: Микросолодовня “ШГА”
Следующий патент: Штамм вируса чумы плотоядных аv-0029 казниви “ввк-95″, используемый для изготовления культуральной вакцины
Случайный патент: Способ нефропексии