Способ лечения сахарного диабета 2 типа у крыс раннего молодого возраста

(51) 61 31/4439 (2009.01), 61 31/155 (2009.01), 61 36/76 (2009.01),61 3/10 (2009.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ Сущность изобретения состоит в том, что в способе лечения больных, включающем введение в организм больного сахароснижающего препарата и антиоксиданта, в качестве сахароснижающего средства используют - метформин, а именно глюкофаж 25 мг/кг и антиоксиданта оксим пиностробин, который вводят перорально один раз в день, ежедневно в дозе 20 мг/кг в течение 14 дней. При использовании способа у животных с сахарным диабетом отмечается 1) компенсация углеводного обмена 2) стабилизация оксидантноантиоксидантного статуса, т.е. снижение уровня малонового диальдегида и диенового конъюгата,повышение антиоксидантных ферментовглутатионпероксидазы и восстановление каталазы.(76) Месова Асылжан Махмутбаевна Еспенбетова Майра Жаксымановна Жетписбаев Бекболат Адамович(56) Антонова К.В., Недосугова Л.В., Балаболкин М.И. и др. Антиоксидантные эффекты пробукола в комплексной терапии сахарного диабета 2 типа // Проблемы эндокринологии, 2008, т.54,4, с. 7-11(54) СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ САХАРНОГО ДИАБЕТА 2 ТИПА У КРЫС РАННЕГО МОЛОДОГО ВОЗРАСТА(57) Изобретение относится к медицине, а именно к патологической физиологии и может быть использовано для лечения сахарного диабета 2 у крыс раннего молодого возраста. 22483 Изобретение относится к медицине, а именно к патологической физиологии и может быть использовано для лечения сахарного диабета 2 типа у крыс раннего молодого возраста. Известен способ лечения больных сахарным диабетом 2 типа путем перорального введения сахароснижающих препаратов производных сульфаниломочевины - глибенкламида и гликлазида в сочетании с введением антиоксиданта - пробукола в суточной дозе 1 г в течение 2 месяцев. (Антонова К.В., Недосугова Л.В.,Балаболкин М.И. и др. Антиоксидантные эффекты пробукола в комплексной терапии сахарного диабета 2 типа//Проблемы эндокринологии. - 2008. Т.54. - 4. с. 7-11) Однако способ имеет ряд существенных недостатков. Препараты производных сульфанилмочевины всвязи с кумуляцией способны вызывать длительные гипогликемии,способствовать росту гиперинсулинемии,следовательно,увеличивать инсулинорезистентность. Следует отметить, что эта группа не показана пациентам с ожирением. При длительном применении сахароснижающих препаратов возникает снижение чувствительности к ним, что вызывает необходимость увеличения дозы(не всегда возможно) или перехода на инсулин. Применение больших доз антиоксидантов может стимулировать синдром пероксидации,что приводит на фоне недостаточности утилизации глюкозы, к декомпенсации антиоксидантной защиты и усилению свободнорадикального окисления (СРО) липидов мембран, нарушению микроциркуляции, усилению синтеза медиаторов воспаления простагландинов,лейкотриенов. Клинически это проявляется развитием сосудистых осложнений и нарушением показателей гомеостаза,склонностью к тромбообразованию. Задача изобретения создание высокоэффективного комплексного способа лечения сахарного диабета 2 типа,позволяющего компенсировать углеводный обмен, уменьшить дозы пероральных сахаропонижающих препаратов и снизить показатели окислительного стресса. Технический результат достигается за счет того,что с целью коррекции углеводного обмена у крыс раннего молодого возраста используется глюкофаж,а также для метаболической коррекции впервые используются в качестве антиоксиданта оксим пиностробин. Разработанный способ медикаментозного лечения включает использование препаратов метформина - глюкофажа и антиоксидантного препарата оксим пиностробина. Сущность изобретения состоит в том, что в способе лечения больных, включающем введение в организм больного сахаропонижающего препарата и антиоксиданта, в качестве сахароснижающего средства используют -метформин, а именно глюкофаж 25 мг/кг и антиоксиданта оксим пиностробин, который вводят перорально один раз в день, ежедневно в дозе 20 мг/кг в течение 14 дней. Для доказательства эффективности данного способа проведен эксперимент у 40 крыс в возрасте 8-9 недель. Животные были разделены на 4 группы. Первая-контрольная (10), вторая-животные с сахарным диабетом 2 типа (10), третья-животные с сахарным диабетом после лечения препаратом глюкофаж (10), четвертая-животные с сахарным диабетом после комплексного лечения глюкофажем и оксимом пиностробином (10). Сахарный диабет 2 типа воспроизводили внутрибрюшинным введением дексаметазона в течении 14 дней 1 мг/кг, также лабораторные животные содержались на высокоуглеводной диете в течении 14 дней с добавлением печенья,картофеля, глюкозы с творогом или мясным фаршем. По калорийности рацион включал 75-80 углеводов. Оценку эффективности предложенного способа лечения проводили на основании определения глюкозы в сыворотке крови, перекисного окисления липидов и антиоксидантной активности в гомогенатах тканей печени,селезенки,поджелудочной железы. Таблица 1 Изменение уровня гликемии и массы тела до и после лечения глюкофажем и оксим пиностробином Показатели СД после лечения глюкофажем СД после лечения ГФ и Р- р 0,05 оо р 0,001 достоверно ко 2 группе Как видно из таблицы 1 уровень глюкозы в сыворотке крови при сахарном диабете повышался в 3,2 раз по сравнению с интактной группой. После 2 недельного лечения глюкофажем уровень глюкозы в 2 сыворотке крови достоверно снижался в 2,5 раза(р 0,001). При комплексном лечении глюкофажем и оксим пиностробином глюкоза в сыворотке крови 22483 снижалась в 2,8 раз (р 0,001) по сравнению со 2 группой и соответствовала контрольным данным. При сахарном диабете масса животных достоверно повышалась на 29,5 по сравнению с интактной группой. В результате лечения глюкофажем снижалась масса тела на 10,8 по сравнению со 2 группой с сахарным диабетом(р 0,05). При сочетанном применении препарата глюкофаж масса тела снижалась на 11,5 (р 0,001). Несмотря на снижение массы тела в обоих случаях,они не достигали контрольного уровня. При изучении первичных продуктов перекисного окисления липидов при сахарном диабете уровень диеновых конъюгатов достоверно повышался в печени, селезенке, поджелудочной железе в 2,1(р 0,05), в 2,8 (р 0,01) и в 2,9 раз (р 0,01) соответственно. Уровень малонового диальдегида достоверно повышался при сахарном диабете в гомогенатах печени в 3,1 (р 0,001), в селезенки в 3,7 Содержание ДК (у.е.на мг) и МДА (нмоль/мг) при сахарном диабете 2 типа у крыс раннего молодого возраста на фоне лечения глюкофажем и оксимом пинотробином Показатели 3 группа 4 группа Печень МДА 0,0150,004 0,0470,005 0,0340,003 0,0220,001 ДК 0,0180,007 0,0380,003 0,0290,002 0,0140,007 Селезенка МДА 0,0120,014 0,0440,004 0,0360,002 0,0250,005 ДК 0,0130,004 0,0370,005 0,0230,003 0,010,007 Поджелудочная железа МДА 0,0170,001 0,0450,005 0,0320,003 0,0240,008 ДК 0,0110,002 0,0320,004 0,0210,003 0,0150,007 1 группа-контроль, 2 группа-животные с сахарным диабетом, 3 группа-животные с сахарным диабетом после лечения препаратом глюкофаж,4 группа- животные с сахарным диабетом после лечения глюкофажем и оксим пиностробином ДК-диеновый конъюгат, МДА-малоновый диальдегид- р 0,01 достоверно к 3- группе После лечения препаратом глюкофаж уровень диеновых конъюгатов снижался в печени, селезенке,поджелудочной железе в 1,3, 1,6, 1,5 раз соответственно в сравнении с группой с сахарным диабетом (р 0,05). Также достоверно снижался уровень малонового диальдегида в печени в 1,38 и в поджелудочной железе в 1,4 раз, в селезенке имел тенденцию к снижению в 1,2 раз. Таким образом, под действием препарата произошло снижение уровня первичного продукта перекисного окисления липидов-диенового конъюгата в печени и селезенке до контрольных величин, однако в поджелудочной железе уровень диеновых конъюгатов оставался достоверно повышенным в 1,9 раз (р 0,001) в сравнении с контрольной группой. Действие глюкофажа оказалось недостаточным для снижения малонового диальдегида,уровень которого оставался достоверно повышенным в сравнении с контрольной группой в печени в 2,3 раза (р 0,01),поджелудочной железе в 1,9 раз (р 0,05), а в селезенке имел тенденцию к снижению в 3 раза. Однако, при комплексном лечении оксимом пиностробином и глюкофажем отмечалось снижение уровеня диеновых конъюгатов в тканях печени, селезенке, поджелудочной железы до контрольных величин. Уровень малонового диальдегида под действием фитопрепарата оксим пиностробина и сахароснижающего препарата глюкофажа также достигал контрольных величин достоверно снижаясь в печени в 2,1 (р 0,01) раз, в селезенке 1,76 (р 0,02) раз и в поджелудочной железе в 1,9(р 0,05) раз по сравнению с группой животных с сахарным диабетом. Как видно из таблицы 3 со стороны антиоксидантной системы отмечались следующие изменения активность фермента глутатионпероксидазы при сахарном диабете 2 типа у крыс раннего молодого возраста достоверно снижалась в печени в 9,5 (р 0,001), в селезенке в 4,1 и в поджелудочной железе в 8,5 раз(р 0,01) по сравнению с 1 группой. Каталаза же напротив достоверно повышалась в печени в 1,7 раз, в селезенке в 2,6 раз, в поджелудочной железе в 2,4 раза. 22483 Таблица 3 Активность глутатионпероксидазы (мкмоль вост. глутатиона/мг тканей/мин) и каталазыпри сахарном диабете 2 типа у крыс раннего молодого возраста на фоне лечения глюкофажем и оксимом пиностробином Показатели Контроль СД СДГФ СДГФРВ-10 Печень ГПО 3,100,5 0,3250,13 1,930,07 3,00,9 КАТ 27,932,07 47,531,46 41,32,34 26,94,82 Селезенка ГПО 2,430,3 0,590,28 1,230,15 3,161,2 КАТ 21,474,5 55,425,96 58,59,9 29,972,4 Поджелудочная железа ГПО 2,980,6 0,350,18 1,660,15 3,230,7 КАТ 20,273,8 49,175,4 27,67,0 21,725,3 ГПО-глутатионпероксидаза КАТ-каталаза- р 0,05- р 0,01 - р 0,001 достоверно к контрольной группе- р 0,05- р 0,010,001 достоверно ко 2 группе- р 0,05 достоверно к 3 - группе После лечения препаратом глюкофаж отмечалось достоверное повышение активности глутатионпероксидазы в печени в 5,9 (р 0,001), в селезенке 2,08 (р 0,05), поджелудочной железе в 4,7 раза (р 0,001) по сравнению с группой с сахарным диабетом, но показатели оставались сниженными по сравнению с контрольной группой. Активность каталазы в селезенке после лечения глюкофажем существенно не менялась. В печени и в поджелудочной железе активность каталазы после лечения глюкофажем достоверно снижалась в 1,15(р 0,05) и в 1,8 (р 0,05) раз соответсвенно по сравнению с группой с сахарным диабетом. Уровень глутатионпероксидазы оставался достоверно повышенным в печени в 1,6 раз (р 0,05), в селезенке в 2 раза (р 0,01), в поджелудочной железе в 1,8 раз (р 0,05) по сравнению с контрольной группой. Каталазная активность была выше по сравнению с 1 группой в печени в 1,5 раз (р 0,01) и в селезенке 2,7 раз (р 0,01), в поджелудочной железе также имела тенденцию к повышению в 1,4 раз. После лечения глюкофажем и оксимом пиностробином активность глутатионпероксидазы достигала контрольных величин, повышаясь в печени в 9,23 (р 0,05), в селезенке в 5,3 (р 0,05), в поджелудочной железе в 9,22 (р 0,001) раз по сравнению с группой с сахарным диабетом. Каталазная активность также восстанавливалась до контрольных величин после лечения глюкофажем и оксимом пиностробином. Глюкофаж снижает глюкозу в крови за счет снижения инсулинорезистентности, глюконеогенеза и гликогинолиза. Масса тела животных снижается за счет анорексиногенного действия глюкофажа. Оксим пиностробина проявляет высокую антиоксидантную,гепатопротекторную активность Сейтембетова А.Ж. Некоторые полифенольные соединения и их антиоксидантная активность // Развитие фитохимии и перспективы создания новых лекарственных препаратов, Алматы, Издательство ылым - 2004,-с. 240-248. При использовании способа у животных с сахарным диабетом отмечается 1) компенсация углеводного обмена 2) стабилизация оксидантноантиоксидантного статуса, т.е. снижение уровня малонового диальдегида и диенового конъюгата,повышение антиоксидантных ферментовглутатионпероксидазы и восстановление каталазы. Пример у крысы в возрасте 7-8 недель воспроизводили сахарный диабет 2 типа. Затем лечили препаратом глюкофажоксим пиностробин в течении 2 недель. После лечения животное декапитировали и взяли органы для исследования. Результаты исследований глюкоза в сыворотке крови при сахарном диабете составила 13,2 ммоль/л. После 2 недельного лечения глюкофажем и оксимом пиностробином отмечалось снижение глюкозы в крови до 4,7 ммоль/л. Как видно из таблицы 4 при исследовании липидного обмена после лечения глюкофажем и оксим пиностробином отмечалось снижение перекисного окисления липидов и повышение антиоксидантной активности. Таблица 4 Перекисное окисление липидов и антиоксидантная активность при сахарном диабете 2 типа МДА ДК ГПО КАТ 1 2 1 2 1 2 1 2 Печень 0,0349 0,0225 0,0237 0,0115 0,451 3,8 45,56 26,4 Селезенка 0,0568 0,0244 0,0176 0,0055 0,197 4,5 53,26 32,2 Подж.ж 0,0435 0,0082 0,0205 0,025 0,304 4,3 44.15 18,5 1 - при сахарном диабете 2 - при сахарном диабете после лечения глюкофажем и оксим пиностробином 4 22483 ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ лечения сахарного диабета 2 типа,включающий введение сахароснижающего препарата и антиоксиданта, отличающийся тем, что в качестве сахароснижающего препарата используют глюкофаж в дозе 25 мг/кг и в качестве антиоксиданта используют оксим пиностробина в дозе 20 мг/кг, перорально один раз в день в течение 14 дней.