Способ оценки степени гистологической активности гепатита и выраженности фиброза печени у больных хроническими диффузными заболеваниями печени

(51) 01 33/48 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ включает проведение морфологического исследование гистологических срезов биоптата ткани печени,взятого при пункционной или операционной биопсии, окрашенного гематоксилином и эозином,пикрофуксином и по Ван-Гизону, проведение балльной оценки активности хронического гепатита по выявленными различного вида некрозовоспалительными изменениями ткани печени, оценка выраженности фиброза ткани печени по выявленными цирротическими изменениями ткани печени, при этом дополнительно гистологические срезы окрашивают, используя Шифф-реакцию, для проведения оценки степени активности хронического гепатита дополнительно используют определение дистрофии гепатоцитов, изменение синусоидов и поражение желчных протоков, при этом проводят балльную оценку степени выявленного фиброза ткани печени. Использование способа позволяет повысить точность диагностики,уточнить этиологию заболевания, а также степень активности и стадию заболевания, выявит цирроз, оценить эффективность терапии.(72) Сариева Сауле Изтургановна Енин Евгений Альбертович Пальгова Людмила Константиновна(54) СПОСОБ ОЦЕНКИ СТЕПЕНИ ГИСТОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ГЕПАТИТА И ВЫРАЖЕННОСТИ ФИБРОЗА ПЕЧЕНИ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМИ ДИФФУЗНЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ПЕЧЕНИ(57) Изобретение относится к медицине, а именно к гепатологии, и может быть использовано для введения в протокол описания морфологического исследования степени гистологической активности и степени фиброза у больных хроническими гепатитами и циррозами печени. Способ оценки степени активности хронического гепатита и выраженности фиброза печени у больных хроническими диффузными заболеваниями печени 22311 Изобретение относится к медицине, а именно к гепатологии, и может быть использовано для введения в протокол описания морфологического исследования степени гистологической активности и степени фиброза у больных хроническими гепатитами и циррозами печени. Известен способ оценки степени активности хронического гепатита включающий проведение морфологического исследования гистологических срезов биоптата ткани печени, взятого при пункционной биопсии или при оперативных вмешательствах, окрашенного гематоксилином и эозином, пикрофуксином и по Ван-Гизону путем определения различных видов очаговых некрозов с образованием мостовидных связей или без них,перипортальных и перисептальных ступенчатых некрозов и по степени их выраженности проводят оценку гистологического индекса активности (ИГА) в баллах. Минимальная степень гистологической активности составляет от 1 до 3 баллов, слабая - от 4 до 8 баллов, умеренная - от 9 до 12 баллов,выраженная - от 13 до 18 баллов ( . ., ,.. . , 1981 1431-435). Недостатком способа является то, что он не позволяет определять степень фиброза и проводить более детальную оценку поражения гепатоцитов,воспалительного инфильтрата и поражения желчных протоков Известен способ оценки степени активности хронического гепатита и выраженности фиброза печени у больных хроническими диффузными заболеваниями печени, включающий проведение морфологического исследования гистологических срезов биоптатов ткани печени, взятого при пункционной биопсии или при оперативных вмешательствах, окрашенных гематоксилином и эозином, пикрофуксином и по Ван-Гизону,определение различных видов очаговых некрозов с образованием мостовидных связей или без них,перипортальных и перисептальных ступенчатых некрозов и по степени их выраженности выделяют 4 степени активности хронического гепатита в баллах,а именно АО - нет некрозовоспалительной активности, А 1 - минимальная активность, А 2 умеренная активность, 3 - выраженная активность. Проводят определение 4 стадий фиброза биоптата ткани печени таких как 1 - портальный фиброз без септ, 2 - портальный фиброз с редкими септами, 3- множество септ без цирроза, 4 - цирроз (шкала-,.о.1995 19(12) 1409-1417). Задачей изобретения является разработка способа оценки степени активности хронического гепатита и выраженности фиброза печени у больных хроническими диффузными заболеваниями печени,использование которой позволяет более подробно оценить и описать воспалительно-клеточную инфильтрацию, различные формы гепатоцеллюлярной дегенерации и некроза, а также изменения 2 синусоидов и степень поражения желчных протоков. Способ оценки степени активности хронического гепатита и выраженности фиброза печени у больных хроническими диффузными заболеваниями печени включает проведение морфологического исследование гистологических срезов биоптата ткани печени,взятого при пункционной или операционной биопсии, окрашенного гематоксилином и эозином,пикрофуксином и по Ван-Гизону, проведение балльной оценки активности хронического гепатита по выявленными различного вида некрозовоспалительными изменениями ткани печени, оценка выраженности фиброза ткани печени по выявленными цирротическими изменениями ткани печени, при этом дополнительно гистологические срезы окрашивают, используя Шифф-реакцию, для проведения оценки степени активности хронического гепатита дополнительно используют определение дистрофии гепатоцитов, изменение синусоидов и поражение желчных протоков, при этом проводят балльную оценку степени выявленного фиброза ткани печени. Способ осуществляют следующим образом. Проводят морфологическое исследование гистологических срезов биоптата ткани печени,взятого при пункционной биопсии или при оперативных вмешательствах. Материал для гистологического исследования фиксируют в 10 забуференном формалине. Проводку осуществляют по общепринятой гистологической методике. Гистологические срезы окрашивают гематоксилином и эозином,пикрофуксином по Ван-Гизону, суданом ,осуществляют Шифф-реакцию. Препараты просматривают на световом микроскопе 4000 В с цифровой камерой 320. Разработана компьютерная программа, которая производит расчет оценки степени активности хронического гепатита и выраженности фиброза печени у больных хроническими диффузными заболеваниями печени по балльной системе. Проводят балльную оценку активности хронического гепатита у пациента по выявленными различного вида некрозовоспалительными изменениями ткани печени, а именно различных видов очаговых некрозов с образованием мостовидных связей или без них, перипортальных и перисептальных ступенчатых некрозов, а также по дистрофии гепатоцитов, изменениям синусоидов по поражению желчных протоков. Проводят балльную оценку выраженности фиброза ткани печени по выявленными цирротическими изменениями ткани печени. Предлагаемый нами способ оценки степени гистологической активности гепатита и выраженности фиброза печени у больных хроническими диффузными заболеваниями печени отражен следующий протокол морфологической диагностики хронических диффузных заболеваний печени 5. Поражение желчных протоков 6. Фиброз Перипортальные сегментарные некрозы гепатоцитов части портальных трактов Перипортальные сегментарные некрозы всех портальных трактов Перипортальные, перисинусоидальные некрозы,вплоть до мостовидных Внутридольковые фокальные некрозы в части долек Внутридольковые фокальные некрозы в большинстве долек Гидропическая и/или жировая гепатоцитов Баллонная дистрофия и/или тельца Каунсильмена В портальных трактах В перипортальной зоне Внутри долек Лимфоидные фолликулы в портальных трактах Гиперплазия звездчатых ретикулоэндотелиоцитов и эндотелия Цепочки лимфоцитов в синусоидах Большинства портальных трактов, их расширение Тожесегментарный и перипортальный фиброз Синусоидальный фиброз большинства долек С образованием портосептальных септ и нарушением строения печени С образованием септ и ложных долек 7. Цирроз Первые пять показателей отражают степень активности заболевания, шестой, седьмой - стадию процесса. Пример выполнения способа. Больная У., 16 лет, клинический диагноз хроническое диффузное заболевание печени, а именно - хронический вирусный гепатит С, 1 генотип, ст. репликации, с минимальной вирусной нагрузкой. С целью уточнения степени активности хронического гепатита и выраженности фиброза печени была произведена пункционная биопсия печени с последующим морфологическим описанием биоптата, для более детального наблюдения за эффективностью противовирусной терапии. Данные морфологического исследования по. Критерии 1. Перипортальные и мостовидные некрозы Отсутствуют Слабовыраженные ступенчатые некрозы Умеренно выраженные ступенчатые некрозы, захватывающие менее чем 50 периметра большинства портальных трактов Выраженные ступенчатые некрозы, захватывающие более чем 50 периметра большинства портальных трактов Умеренно выраженные ступенчатыемостовидные некрозы Выраженные ступенчатыемостовидные некрозы Мультилобулярные некрозы 22311 Продолжение таблицы 2. Внутридольковые очаговые некрозы и дистрофия гепатоцитов Отсутствуют Слабовыраженные (ацидофильные тельца, баллонная дегенерация и/или рассыпанные очаги гепатоцеллюлярных некрозов в менее 1/3 долек или узлов) Умеренно выраженные, захватывающие более 2/3 долек или узлов 3. Портальное воспаление Нет Слабовыраженное (единичные воспалительные клетки в менее 1/3 портальных трактов) Умеренно выраженное (повышенное количество воспалительных клеток в 1/3-2/3 портальных трактов) Выраженное (плотное заполнение воспалительными клетками более 2/3 портальных трактов) 4. Фиброз Нет Расширение портальных трактов за счет фиброза Мостовидный фиброз (портальные или портоцентральные септы) 5. Цирроз Заключение Хронический гепатит вирусной этиологии (ВГС) со слабовыраженной степенью гистологической активностью (ИГА 5 баллов) и Морфологические Проявления 1. Некроз гепатоцитов 5. Поражение желчных протоков 6. Фиброз слабой степенью фиброза (индекс фиброза 1 балл).1 1. Перипортальные сегментарные некрозы гепатоцитов части портальных трактов Перипортальные сегментарные некрозы всех портальных трактов Перипортальные, перисинусоидальные некрозы,вплоть до мостовидных Внутридольковые фокальные некрозы в части долек Внутридольковые фокальные некрозы в большинстве долек Гидропическая и/или жировая гепатоцитов Баллонная дистрофия и/или тельца Каунсильмена В портальных трактах В перипортальной зоне Внутри долек Лимфоидные фолликулы в портальных трактах Гиперплазия звездчатых ретикулоэндотелиоцитов и эндотелия Цепочки лимфоцитов в синусоидах Большинства портальных трактов, их расширение Тожесегментарный и перипортальный фиброз Синусоидальный фиброз большинства долек С образованием портосептальных септ и нарушением строения печени С образованием септ и ложных долек 22311 Заключение Хронический гепатит вирусной этиологии (ВГС) со слабовыраженной степенью гистологической активностью (ИГА 5 баллов) и слабой степенью фиброза (фиброз - 1 балл).1 1. Таким образом, и по системе. по прототипу и по предлагаемому нами способу исследования морфологических изменений ткани печени при хроническом диффузном заболевании печени балльная оценка гистологической активности и балльная оценка фиброза ткани печени совпадают. Однако в протоколе биопсии, используя разработанный способ, определены поражения синусоидов (чего нет в протоколе по.), в то время как воспалительный процесс развился внутри долек, лимфоидных фолликул в портальных трактах. Это дает возможность в процессе и по окончанию лечения более детально наблюдать за эффективностью противовирусной терапии. Апробация способа была проведена в 2008 г при морфологическом исследовании гистологических срезов биоптата ткани печени, взятого при пункционной биопсии или при оперативных вмешательствах у 20 больных с хроническим диффузным заболеванием печени. Использование способа позволяет повысить точность диагностики, уточнить этиологию заболевания, а также степень активности и стадию заболевания, выявит цирроз,оценить эффективность терапии. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ оценки степени активности хронического гепатита и выраженности фиброза печени у больных хроническими диффузными заболеваниями печени,включающий проведение морфологического исследования гистологических срезов биоптата ткани печени, взятого при пункционной или операционной биопсии, окрашенного гематоксилином и эозином, пикрофуксином и по Ван-Гизону,проведение балльной оценки активности хронического гепатита по выявленными различного вида некрозовоспалительными изменениями ткани печени, оценка выраженности фиброза ткани печени по выявленными цирротическими изменениями ткани печени,отличающийся тем,что дополнительно гистологические срезы окрашивают,используя Шифф-реакцию, для проведения оценки степени активности хронического гепатита дополнительно используют определение дистрофии гепатоцитов, изменение синусоидов и поражение желчных протоков, при этом проводят балльную оценку степени выявленного фиброза ткани печени.