Способ определения наличия воспалительного процесса в нижних дыхательных путях

(51) 01 33/487 (2006.01) А 61 В 5/08 (2006.01) А 61 В 5/091 (2006.01) А 61 Р 11/08 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ определении выраженности воспалительного процесса в нижних дыхательных путях. Техническим результатом изобретения является повышение точности и доступности способа. Это достигается тем, что в заявляемом способе определения наличия воспалительного процесса в нижних дыхательных путях путем исследования биологической жидкости, согласно изобретению, в качестве биологической жидкости исследуют индуцированную мокроту, определяют в ней количество нейтрофилов и макрофагов и при увеличении процентного содержания нейтрофилов в 2 раза и более и снижения процентного содержания макрофагов в 1,5 раза и более, судят о наличии воспалительного процесса в нижних дыхательных путях.(72) Бегимбетова Раиса Салимовна Тулегенова Любовь Муратовна Карибаева Дина Орынбасаровна(56) Исаченко Е.Г., Калинина Е.П. Определение тяжести течения хронической обструктивной болезни легких по уровню секрециии -8 // Аллергология. 2005,3, с. 27-29(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ НАЛИЧИЯ ВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ПРОЦЕССА В НИЖНИХ ДЫХАТЕЛЬНЫХ ПУТЯХ(57) Изобретение относится к области медицины, в частности к пульмонологии и может быть использовано в лабораторной диагностике при 21609 Изобретение относится к области медицины, в частности к пульмонологии и может быть использовано в лабораторной диагностике при определении выраженности воспалительного процесса в нижних дыхательных путях. Известен способ определения наличия воспалительного процесса в дыхательных путях по прогнозированию эффективности фармакотерапии больных хроническими обструктивными заболеваниями легких путем проведения исследования крови, определения величины адренорецепции клеточных мембран спектрофотометрическим методом до начала и через 7 дней после лечения, и при величине после лечения от 10 до 30 единиц прогнозируют благоприятный эффект фармакотерапии больного.(Патент РФ 2191381, кл. 01 33/48, опубл. 20.10.2002 г.) Недостатком способа является низкая точность оценки, т.к. через 7 дней после лечения невозможно определить степень выраженности воспалительного процесса в дыхательных путях. Известен также способ определения наличия воспалительного процесса в дыхательных путях по определению тяжести заболевания. У больных в фазе ремиссии исследовали биологическую жидкость, а именно сыворотку крови, определяли активность иммунокомпетентных клеток (ИК) по выработке ими цитокинов - фактора некроза опухолии интерлейкина 8. Выявлено снижение синтеза обоих цитокинов в ИК, при стимуляции липополисахаридом Е. . При легком течении ХОБЛ уровень синтеза-8 возрастал после стимуляции вдвое,- в 4 раза. При тяжелом течении ХОБЛ спонтанный и индуцированный синтез цитокинов оказывался сниженным по сравнению с контролем.(Исаченко Е.Г., Калинина Е.П. Определение тяжести течения хронической обструктивной болезни легких по уровню секрециии -8 // Аллергология.- 2005,3.- с. 27-29). Недостатком данного способа является трудность выполнения, т.к. данные исследования требуют наличия специального оборудования и реактивов. Задачей изобретения является создание более точного, нетравматичного и доступного способа определения наличия воспалительного процесса в нижних дыхательных путях,позволяющего получить информацию о возбудителях бронхолегочной инфекции,природе и выраженности воспалительного процесса в нижних дыхательных путях для решения вопросов,связанных с характером ведения больных и возможности определения эффективности проводимой терапии с дальнейшей ее корректировкой. Техническим результатом изобретения является повышение точности и доступности способа. Это достигается тем, что в заявляемом способе определения наличия воспалительного процесса в нижних дыхательных путях путем исследования биологической жидкости, согласно изобретению, в 2 качестве биологической жидкости исследуют индуцированную мокроту, определяют в ней количество нейтрофилов и макрофагов и при увеличении процентного содержания нейтрофилов в 2 раза и более и снижения процентного содержания макрофагов в 1,5 раза и более, судят о наличии воспалительного процесса в нижних дыхательных путях. Способ осуществляется следующим образом. За 30 минут до взятия мокроты проводят ингаляцию сальбутамола дважды по одному вдоху(200 мкг) с интервалом 15 минут. Приступают к ингаляции 3 растворачерез ультразвуковой небулайзер с продолжительностью процедуры 7 минут. Гипертонический солевой раствор для ингаляции готовят непосредственно перед исследованием. Каждые 7 мин ингаляции концентрацию гипертонического раствора повышают на 1, то есть последовательно используют 3-, 4-, 5 солевые растворы. После первого сеанса ингаляции и в дальнейшем после каждого последующего сеанса пациенты должны тщательно полоскать рот и глотку и стараться откашлять мокроту в специальную посуду. При получении удовлетворительного образца мокроты процедуру прекращают. До и после каждого сеанса ингаляции проводят измерение показателей жизненной емкости легких(ЖЕЛ) и объема форсированного выдоха за одну секунду ОФВ 1). При снижении показателя Ф 1 на 10, концентрацию гипертонического раствора больше не повышают, при снижении 1 на 20 или при появлении респираторных симптомов(удушье,свистящее дыхание) ингаляцию прекращают. Микроскопическое исследование индуцированной мокроты (ИМ) проводят не позднее 2 ч после получения материала, на протяжении всего этого времени образцы мокроты должны храниться при 4 С. Определяют количество нейтрофилов и макрофагов. В норме у здорового человека количество нейтрофилов составляет 27,83,5,макрофагов 71,53,6. При увеличении процентного содержания нейтрофилов в 2 раза и более и снижения процентного содержания макрофагов в 1,5 раза и более, судят о наличии воспалительного процесса в нижних дыхательных путях. Пример 1. Пациент И., 45 лет, обратился с жалобами на одышку при небольшой физической нагрузке,кашель с трудно отделяемой вязкой мокротой слизисто-гнойного характера повышение температуры,общую слабость,быструю утомляемость, плохой сон.Состоит на диспансерном учете по поводу хронического обструктивного бронхита 5 лет, до этого длительное время кашлял в основном по утрам, но не обращался к врачу и не лечился по поводу кашля, поскольку считал, что это всего лишь проявление курения, которое не лечится. Усиление кашля и выделения мокроты происходило 21609 незаметно для больного, лечился лишь во время обострений хронического бронхита при повышении температуры и усилении респираторной симптоматики. Обострения 1-2 раза в год, обычно в холодное время года. Данное обострение связывает с переохлаждением повысилась температура,появилась одышка при небольшой физической нагрузке, усилился кашель и выделение мокроты,которая приобрела гнойный характерПри осмотре состояние больного относительно удовлетворительное. Рост 168 см, масса тела - 78 кг. ИМТ - 27,6. Кожные покровы обычной окраски, повышенной влажности. Губы цианотичны. Периферические лимфоузлы не увеличены. Дыхание через нос свободное, одышка смешанного характера -21-23 в минуту. Грудная клетка обычной формы. При перкуссии звук легочный с коробочным оттенком,при аускультации легких выслушиваются сухие хрипы в обоих легких, усиливаются при форсированном выдохе. Тоны сердца приглушены,ритм правильный. ЧСС 96 уд/мин, АД 120/80 мм.рт.ст. 10-у сутки Через год Здоровые Симптом поколачивания отрицательный с обеих сторон. Обследование В анализе мокроты мокрота сероватая, слизистогнойная, вязкая, лейк-16-18-20 в п/з, цил.эп.7-10 в п/з, пл.эп 4-6 в п/з, макроф.-12-15 в п/з, спирали Куршмана -и кристаллы Шарко-Лейдена - не найдены эозинофилы - нет клетки сердечных пороков, эластические волокна, атипичные клетки не найдены, БК - нет. Бактериологический анализ мокроты обнаружена 10/6 кое/мл гемолиз. Чувствительна к цефалоспоринам 3-4 поколен,фторхинолонам,канамицину,тетрациклинам,рокситромицину,левомицетину умеренно чувствительна к гентамицину резистентна оксациллин,пенициллин,доксициклин,карбенициллин,ванкомицин,линкомицин,цефалоспорины 1 поколения. Индуцированная мокрота после проведенной антибактериальной терапии (10-е сутки) и через 3 месяца в процентах Показатели функции внешнего дыхания после бронходилатационой пробы в процентах к должным величинам Вентиляционные нарушения по ФЖЕЛ 72,8 Пикфлоуметрия 320 мл (61,9), должные показатели пикфлоуметрии -617 мл.-графия Легкие эмфизематозны, свежих очаговых и инфильтративных изменений нет. С обеих сторон корни легких уплотнены, фиброзно изменены, стенки бронхов уплотнены, утолщены. Диафрагма обычно расположена стенки аорты уплотнены сердце рентгенологически не изменено. Заключение Хр. Бронхит, пневмосклероз Бронхоскопия Анестезия лидокаином 2 -10 мл. Трахея свободно проходима, слизистая розовая,межкольцевые промежутки равномерные. Карина широкая. Бронхи проходимы, в просвете слизистогнойный секрет, слизистая гиперемирована, отечна. Сдавлений извне нет. Сделан лаваж бронхиального дерева физиологическим раствором 200 мл с последующей санацией, инстилляцией раствора клафорана. Заключение 2-сторонний гнойный эндобронхит. 6 минутная шаговая проба 438 метров, должные показатели 6 минутной шаговой пробы 600 метров,повторная 6 минутная шаговая проба после проведенной терапии 470 метров, прирост 6 МШП 32 метра, прирост 6 МШП в процентах -5. Больному был выставлен клинический диагноз хроническая обструктивная болезнь легких, Эозинофилы 0 0 00 преимущественно бронхитический тип,среднетяжелое течение (стадия ), обострение. Диффузный пневмосклероз. ДН -Больной получил лечение Стол 15, режим , ципрофлоксацин 0,5 х 2 раза в день в течение 10 дней, беродуал (20 мкг ипратропиума бромид и 50 мкг фенотерола) по 2 вдоха 3 раза в день, теотард 350 мг 1 раз в день вечером, амбробене 30 мг 3 раза в день. Кроме медикаментозной терапии больной прошел реабилитационную программу физическую реабилитацию, обучение, психосоциальную и поведенческую работу, коррекцию нутритивного статуса (рекомендовано питание богатое белками и витаминами). На фоне проводимой терапии состояние пациента заметно улучшилось кашель стал беспокоить значительно меньше, мокрота при кашле отделяется легче, уменьшилась одышка при физической нагрузке. В удовлетворительном состоянии пациент был выписан домой с рекомендациями принимать беродуал по 2 вдоха 2 раза в день, флуимуцил 600 мг/сут (курсами по 10 дней) продолжать реабилитационные мероприятия с посещением пульмошколы при поликлинике. Возросла толерантность к физической нагрузке. В пробе с шестиминутной ходьбой пройденное 3 21609 расстояние возросло до 470 метров, прирост 6 МШП- 32 метра, прирост 6 МШП в процентах -5. В индуцированной мокроте через 3 месяца уменьшилось количество нейтрофилов с 79 до 54, что указывает на снижение интенсивности воспалительного процесса в дыхательных путях,увеличилось количество макрофагов с 18 до 44. Но количество нейтрофилов не достигало значений,характерных для здоровых лиц. Через 3 месяца у больного остается сухой кашель, общее состояние удовлетворительное, в анализе крови нет признаков воспаления (СОЭ 6 мм/ч, лейкоциты - 5,7109/л), только лишь в анализе индуцированной мокроты имеются нейтрофилы, которые указывают на наличие продолжающегося местного воспалительного процесса. На основании данных индуцированной мокроты у нашего больного имеется доказательное обоснование продолжения лечения, несмотря на клиническое улучшение - удовлетворительное состояние и спокойный анализ крови. Также аргументируется продолжение больному терапии. Пример 2. Больная Б., 52 лет, обратилась с жалобами на одышку при небольшой физической нагрузке,кашель с трудно отделяемой вязкой мокротой слизисто-гнойного характера повышение температуры, чувство заложенности в груди, общую слабость, быструю утомляемость, плохой сон.Состоит на диспансерном учете по поводу хронического обструктивного бронхита 7 лет. Обострения 1-2 раза в год, обычно в холодное время года. Медикаментозную терапию получала Макрофаги 17 39 68,32,2 10-у сутки Через год Здоровые Показатели функции внешнего дыхания после бронходилатационной пробы в процентах к должным величинам Вентиляционные нарушения ЖЕЛ 79,7 по обструктивному типу (прирост ОФВ 1 после ингаляции сальбутамола 11) Пикфлоуметрия 270 мл (61,8), должные показатели пикфлоуметрии -437 мл.-графия Легкие эмфизематозны, свежих очаговых и инфильтративных изменений нет. С обеих сторон корни легких уплотнены, фиброзно изменены, стенки бронхов уплотнены, утолщены. Диафрагма обычно расположена стенки аорты уплотнены сердце рентгенологически не изменено. Заключение Хр. Бронхит, пневмосклероз Бронхоскопия Анестезия лидокаином 2 -10 мл. Трахея свободно проходима, слизистая розовая,межкольцевые промежутки равномерные. Карина широкая. Бронхи проходимы, в просвете слизистогнойный секрет, слизистая гиперемирована, отечна. Сдавлений извне нет. Сделан лаваж бронхиального дерева физиологическим раствором 200 мл с 4 лишь во время обострений. Данное обострение связывает с переохлаждением повысилась температура, появилась одышка при небольшой физической нагрузке, усилился кашель и выделение мокроты, которая приобрела гнойный характер. При осмотре состояние больного относительно удовлетворительное. Рост 152 см, масса тела - 84 кг. ИМТ - 27,6. Кожные покровы обычной окраски,повышенной влажности. Губы цианотичны. Периферические лимфоузлы не увеличены. Дыхание 20-22 в минуту. Грудная клетка эмфизематозна. При перкуссии звук легочный с коробочным оттенком, при аускультации легких выслушиваются сухие хрипы в обоих легких,усиливаются при форсированном выдохе. Тоны сердца приглушены, ритм правильный. ЧСС 100 уд/мин, АД 120/80 мм.рт.ст. В анализе мокроты мокрота желтоватая,гнойная, вязкая, лейк-20-25 в п/з, цил.эп.7-10 в п/з,пл.эп 4-6 в п/з, спирали Куршмана -и кристаллы Шарко-Лейдена - не найдены эозинофилы - нет клетки сердечных пороков, эластические волокна,атипичные клетки не найдены, БК - нет. Бактериологический анализ мокроты обнаружена 1106 /мл,чувствительнафторхинолоны 3 поколения,цефалоспорины 3-4 поколения,умеренная чувствительность фторхинолоны 2 поколения,гентамицин устойчива цефалоспорины 1-2 поколения, эритромицин, ампициллин Индуцированная мокрота после проведенной антибактериальной терапии (10-е сутки) и через 3 месяца в процентах последующей санацией, инстилляцией раствора клафорана. Заключение 2-сторонний гнойный эндобронхит. 6 минутная шаговая проба 296 метров, должные показатели 6 минутной шаговой пробы 472 метров,повторная 6 минутная шаговая проба после проведенной терапии 333 метров, прирост 6 МШП 37 метра, прирост 6 МШП в процентах - 8. Больной был выставлен клинический диагноз ХОБЛ, преимущественно бронхитический тип,среднетяжелое течение (стадия ), обострение хронический гнойный бронхит,обострение,диффузный пневмосклероз, ДН -. Больная получила лечение Стол 15, режим ,ципрофлоксацин 0,5 х 2 раза в день в течение 10 дней, ингаляции беродуала по 2 вдоха 3 раза в день, 21609 теотард 350 мг 1 раз в день вечером, амбробене 30 мг 3 раза в день. Кроме медикаментозной терапии больная прошла реабилитационную программу физическую реабилитацию,обучение,психосоциальную и поведенческую работу. На фоне проводимой терапии состояние пациента заметно улучшилось кашель стал беспокоить значительно меньше, мокрота при кашле отделяется легче, уменьшилась одышка при физической нагрузке. В удовлетворительном состоянии пациентка была выписана домой с рекомендациями принимать беродуал по 2 вдоха 2 раза в день, флуимуцил 600 мг/сут (курсами по 10 дней) продолжать реабилитационные мероприятия с посещением пульмошколы при поликлинике. У больной после проведенной терапии возросла толерантность к физической нагрузке. В пробе с шестиминутной ходьбой пройденное расстояние возросло до 333 метров, прирост 6 МШП - 37 метров, прирост 6 МШП в процентах- 8. В индуцированной мокроте через 3 месяца уменьшилось количество нейтрофилов с 82 до 60, что указывает на снижение интенсивности воспалительного процесса в дыхательных путях,увеличилось количество макрофагов с 17 до 39. Но количество нейтрофилов не достигало значений,характерных для здоровых лиц. Через 3 месяца у больной остается сухой кашель на фоне удовлетворительного состояния, в анализе крови нет признаков воспаления (СОЭ 5 мм/ч,лейкоциты - 4,7109/л), только лишь в анализе индуцированной мокроты имеются нейтрофилы(60),которые указывают на наличие продолжающегося местного воспалительного процесса. На основании данных индуцированной мокроты у нашей больной имеется доказательное обоснование продолжения терапии, несмотря на клиническое улучшение. Таким образом, анализ мокроты методом индурования гипертоническими растворами является неинвазивным, легко осуществимым в практической работе методом определения степени воспалительного процесса в дыхательных путях. К достоинствам способа относятся неинвазивность, простота выполнения процедуры,безопасность, низкое число побочных эффектов,отсутствие необходимости в дорогостоящем оборудовании,возможность многократного получения материала, доверительность и высокая репродуктивность. Исследование клеточных и неклеточных факторов (маркеров воспаления) в ИМ,взятой у больных в разные сроки заболевания,позволяет дать сравнительную оценку активности воспалительного процесса в нижних отделах дыхательных путей и тем самым осуществить мониторинг заболевания и дифференцированно подходить к лечению. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ определения наличия воспалительного процесса в нижних дыхательных путях путем исследования биологической жидкости, отличающийся тем, что в качестве биологической жидкости исследуют индуцированную мокроту,определяют в ней количество нейтрофилов и макрофагов и при увеличении процентного содержания нейтрофилов в 2 раза и более и снижения процентного содержания макрофагов в 1,5 раза и более, судят о наличии воспалительного процесса в нижних дыхательных путях.